| 缩写词 | 第10-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第15-23页 |
| 1 荔枝果实生长发育进展 | 第15-16页 |
| 1.1 荔枝概况 | 第15页 |
| 1.1.1 荔枝的起源和传播 | 第15页 |
| 1.1.2 荔枝生产销售现状及问题 | 第15页 |
| 1.2 荔枝的发育过程 | 第15-16页 |
| 1.2.1 荔枝果实发育模式 | 第15-16页 |
| 1.2.2 果皮的着色发育 | 第16页 |
| 2 褐变的研究进展 | 第16-22页 |
| 2.1 过氧化物酶与褐变的关系 | 第17-20页 |
| 2.2 多酚氧化酶与褐变的关系 | 第20-21页 |
| 2.3 其他酶与酶促褐变关系 | 第21-22页 |
| 3 本试验的研究意义及目的 | 第22-23页 |
| 3.1 目的与意义 | 第22页 |
| 3.2 试验内容 | 第22-23页 |
| 第二章 荔枝果皮POD的分离纯化 | 第23-32页 |
| 1 材料与方法 | 第23-25页 |
| 1.1 仪器与试剂 | 第23页 |
| 1.2 POD粗酶液提取及盐析分级 | 第23页 |
| 1.3 Streamline Phenyl柱层析 | 第23-24页 |
| 1.4 DEAE-Cellulose柱层析 | 第24页 |
| 1.5 Phenyl Sepharose HP柱层析 | 第24页 |
| 1.6 Superdex 200柱纯化 | 第24页 |
| 1.7 POD、PPO的活性测定 | 第24-25页 |
| 1.8 酶蛋白的定量与光谱特性分析 | 第25页 |
| 1.9 相对分子量测定 | 第25页 |
| 1.10 SDS-PAGE | 第25页 |
| 1.11 Native-PAGE | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-32页 |
| 2.1 分离纯化结果 | 第25-29页 |
| 2.1.1 柱分离结果 | 第25-28页 |
| 2.1.2 分离纯化POD的电泳检测 | 第28-29页 |
| 2.2 提取POD定量测定及纯度鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3 分子量结果 | 第30-32页 |
| 2.3.1 SDS-PAGE结果 | 第30页 |
| 2.3.2 相对分子量测定结果 | 第30-32页 |
| 第三章 POD各组分的酶学常数及理化性质 | 第32-46页 |
| 1 材料与方法 | 第32-35页 |
| 1.1 仪器与试剂 | 第32页 |
| 1.2 四组分POD性质研究 | 第32-35页 |
| 1.2.1 四组分POD反应及表现PPO性质时的最适温度 | 第32页 |
| 1.2.2 四组分POD反应及表现PPO性质时的最适pH值 | 第32-33页 |
| 1.2.3 POD对不同底物活性的特异性及表现PPO性质时对底物的特异性 | 第33页 |
| 1.2.4 金属离子及抑制剂对POD活性及表现PPO活性的影响 | 第33-34页 |
| 1.2.5 POD对不同底物的Km值及表现PPO性质时对不同底物的Km值 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-46页 |
| 2.1 四组分POD生理生化性质 | 第35-41页 |
| 2.1.1 四组分POD反应最适温度 | 第35-36页 |
| 2.1.2 四组分POD反应最适pH值 | 第36页 |
| 2.1.3 四组分POD对不同底物的特异性 | 第36-38页 |
| 2.1.4 四组分POD对不同底物的米氏常数 | 第38-41页 |
| 2.2 四组分表现PPO性质时生理生化特性 | 第41-46页 |
| 2.2.1 四组分表现PPO性质时反应最适温度 | 第41-42页 |
| 2.2.2 表现PPO性质时最适反应pH值 | 第42页 |
| 2.2.3 表现PPO性质对底物的特异性 | 第42-44页 |
| 2.2.4 表现PPO性质时的Km值 | 第44-46页 |
| 第四章 POD的质谱鉴定 | 第46-52页 |
| 1 材料与方法 | 第46页 |
| 1.1 仪器与试剂 | 第46页 |
| 1.2 方法 | 第46页 |
| 1.2.1 样品准备 | 第46页 |
| 1.2.2 质谱样品制备 | 第46页 |
| 1.2.3 质谱分析 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-52页 |
| 第五章 基于质谱结果的cDNA克隆 | 第52-59页 |
| 1 材料与方法 | 第52-53页 |
| 1.1 材料 | 第52页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第52页 |
| 1.3 方法 | 第52-53页 |
| 1.3.1 荔枝果皮RNA提取与检测 | 第52页 |
| 1.3.2 A1、A2的cDNA克隆 | 第52-53页 |
| 1.3.3 POD-B1、B2的ORF验证 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-59页 |
| 2.1 RNA质量 | 第53-54页 |
| 2.2 A1、A2的cDNA克隆结果 | 第54-56页 |
| 2.3 B1、B2 ORF验证 | 第56页 |
| 2.4 荔枝POD同源性比对 | 第56-57页 |
| 2.5 POD-A、B的信号肽检索 | 第57-58页 |
| 2.6 POD的表达后修饰 | 第58-59页 |
| 第六章 POD对花色苷花色素的降解 | 第59-70页 |
| 1 材料与方法 | 第59-61页 |
| 1.1 材料 | 第59页 |
| 1.2 方法 | 第59-61页 |
| 1.2.1 花色苷的提取 | 第59页 |
| 1.2.2 花色素的降解生成 | 第59-60页 |
| 1.2.3 花色苷鉴定及定量分析 | 第60页 |
| 1.2.4 POD对花色素的降解 | 第60页 |
| 1.2.5 POD对花色苷提取样及其标样的降解 | 第60-61页 |
| 1.2.6 花色苷样品与标样在不同pH下的稳定性 | 第61页 |
| 1.2.7 POD催化降解花色苷样品及标样的最适温度 | 第61页 |
| 1.2.8 POD催化降解花色苷样品及标样的最适pH值 | 第61页 |
| 1.2.9 POD催化降解花色苷样品及标样的Km值 | 第61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-70页 |
| 2.1 花色苷提取结果 | 第61-62页 |
| 2.2 花色素降解生成 | 第62页 |
| 2.3 花色苷鉴定与定量分析 | 第62-64页 |
| 2.4 POD对花色素的降解 | 第64页 |
| 2.5 POD对花色苷的降解 | 第64-66页 |
| 2.6 样品和标样在不同pH值下的稳定性 | 第66页 |
| 2.7 POD催化降解花色苷的最适温度 | 第66-67页 |
| 2.8 POD催化降解花色苷的最适pH值 | 第67页 |
| 2.9 POD催化降解花色苷的Km值 | 第67-70页 |
| 第七章 荔枝果实生长过程中POD的变化 | 第70-76页 |
| 1 材料与方法 | 第70-71页 |
| 1.1 材料 | 第70页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第70页 |
| 1.3 方法 | 第70-71页 |
| 1.3.1 荔枝果皮生长曲线 | 第70页 |
| 1.3.2 结合态POD的提取及其稳定性的研究 | 第70-71页 |
| 1.3.3 POD、PPO活性的测定 | 第71页 |
| 1.3.4 同工酶谱的方法 | 第71页 |
| 2 结果分析 | 第71-76页 |
| 2.1 荔枝果皮的生长曲线 | 第71-72页 |
| 2.2 不同提取液对结合态POD活性和同工酶谱的影响 | 第72-73页 |
| 2.3 结合态POD的稳定性 | 第73-74页 |
| 2.4 果实生长发育过程中不同形态POD活性与同工酶谱变化 | 第74-76页 |
| 第八章 讨论与小结 | 第76-81页 |
| 1 POD纯化 | 第76页 |
| 2 POD的性质 | 第76-77页 |
| 3 POD和PPO的关系 | 第77-78页 |
| 4 POD催化花色苷降解 | 第78-79页 |
| 5 小结 | 第79页 |
| 6 展望 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 附录 | 第85-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
