| 符号说明 | 第4-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1. 前言 | 第14-32页 |
| 1.1 玉米纹枯病 | 第15页 |
| 1.2 玉米纹枯病病原种类及其融合群 | 第15-16页 |
| 1.3 纹枯病病原菌 | 第16-18页 |
| 1.3.1 纹枯病菌的形态学特征和理化性质 | 第16页 |
| 1.3.2 纹枯病菌的侵染循环 | 第16页 |
| 1.3.3 纹枯病菌的致病机制 | 第16-17页 |
| 1.3.4 纹枯病菌寄主抗病机制 | 第17-18页 |
| 1.4 纹枯病抗性研究 | 第18-20页 |
| 1.4.1 玉米纹枯病抗性研究 | 第18-19页 |
| 1.4.1.1 玉米纹枯病抗病种质资源筛选 | 第18页 |
| 1.4.1.2 玉米纹枯病抗性遗传研究 | 第18-19页 |
| 1.4.1.3 玉米抗纹枯病分子调控研究 | 第19页 |
| 1.4.2 其他作物纹枯病抗性研究 | 第19-20页 |
| 1.5 植物启动子 | 第20-31页 |
| 1.5.1 植物启动子的基本结构和功能 | 第20-21页 |
| 1.5.1.1 转录起始位点 | 第20-21页 |
| 1.5.1.2 TATA框 | 第21页 |
| 1.5.1.3 CAAT框 | 第21页 |
| 1.5.1.4 其它启动子作用元件 | 第21页 |
| 1.5.2 植物启动子的分类 | 第21-29页 |
| 1.5.2.1 组成型启动子 | 第22页 |
| 1.5.2.2 组织或器官特异性启动子 | 第22-25页 |
| 1.5.2.3 诱导型启动子 | 第25-28页 |
| 1.5.2.3.1 病原菌诱导表达启动子 | 第25-26页 |
| 1.5.2.3.2 其他类型诱导启动子 | 第26-28页 |
| 1.5.2.4 特殊类型启动子 | 第28-29页 |
| 1.5.2.4.1 双向启动子 | 第28页 |
| 1.5.2.4.2 可变启动子 | 第28-29页 |
| 1.5.3 启动子的研究方法 | 第29-31页 |
| 1.5.3.1 启动子预测工具 | 第29页 |
| 1.5.3.2 启动子的克隆 | 第29-30页 |
| 1.5.3.3 病原诱导启动子的研究方法 | 第30-31页 |
| 1.5.3.3.1 瞬时表达分析法 | 第30-31页 |
| 1.5.3.3.2 稳定表达分析 | 第31页 |
| 1.5.3.3.3 突变分析法 | 第31页 |
| 1.5.3.3.4 凝胶阻滞技术 | 第31页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第31-32页 |
| 2. 材料与方法 | 第32-38页 |
| 2.1 水稻、玉米及烟草品种 | 第32页 |
| 2.2 菌株和载体 | 第32页 |
| 2.3 启动子全长和缺失序列的获得以及载体构建 | 第32-35页 |
| 2.3.1 启动子序列的分析 | 第32页 |
| 2.3.2 启动子序列的克隆 | 第32-33页 |
| 2.3.2.1 启动子序列克隆引物的设计 | 第32-33页 |
| 2.3.2.2 启动子序列的扩增体系 | 第33页 |
| 2.3.3 PCR产物的切胶回收 | 第33-34页 |
| 2.3.4 空载体、目的片段的酶切及纯化 | 第34页 |
| 2.3.5 连接产物的热激转化 | 第34页 |
| 2.3.6 质粒的提取 | 第34-35页 |
| 2.3.7 质粒的电击转化 | 第35页 |
| 2.4 农杆菌介导的遗传转化 | 第35-36页 |
| 2.4.1 全长启动子的水稻遗传转化 | 第35-36页 |
| 2.4.2 启动子瞬时表达系统 | 第36页 |
| 2.5 转基因植株阳性检测 | 第36-37页 |
| 2.5.0 植物基因组DNA的提取 | 第36页 |
| 2.5.1 PCR阳性检测 | 第36页 |
| 2.5.2 GUS染色 | 第36-37页 |
| 2.6 纹枯病菌接种与调查 | 第37页 |
| 2.6.1 纹枯病菌接种水稻 | 第37页 |
| 2.6.2 纹枯病菌接种烟草激发报告基因表达 | 第37页 |
| 2.7 GUS的定性及定量分析 | 第37-38页 |
| 2.8 GFP的定性及定量分析 | 第38页 |
| 3. 结果与分析 | 第38-53页 |
| 3.1 GRMZM2G127328基因启动子的功能研究 | 第38-45页 |
| 3.1.1 P_(GRMZM2G127328)启动子的结构 | 第38-39页 |
| 3.1.2 P_(GRMZM2G127328)表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3.1.3 P_(GRMZM2G127328)转基因水稻的阳性鉴定 | 第40-41页 |
| 3.1.4 P_(GRMZM2G127328)的组织表达模式分析 | 第41-42页 |
| 3.1.5 P_(GRMZM2G127328)的病原诱导表达模式分析 | 第42-43页 |
| 3.1.6 P_(GRMZM2G127328)病原诱导核心区域的鉴定 | 第43-44页 |
| 3.1.7 P_(GRMZM2G127328)病原诱导核心元件的鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2 GRMZM2G169240基因启动子的功能研究 | 第45-53页 |
| 3.2.1 P_(GRMZM2G169240)启动子的结构 | 第45-46页 |
| 3.2.2 P_(GRMZM2G169240)表达载体的构建 | 第46-47页 |
| 3.2.3 P_(GRMZM2G169240)转基因水稻阳性鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2.4 P_(GRMZM2G169240)的组织表达模式分析 | 第48页 |
| 3.2.5 P_(GRMZM2G169240)的病原诱导表达模式分析 | 第48-49页 |
| 3.2.6 P_(GRMZM2G169240)病原诱导核心区域的鉴定 | 第49-53页 |
| 4. 讨论 | 第53-56页 |
| 4.1 玉米纹枯病抗病机制中可能存在不同调控途径 | 第53-54页 |
| 4.2 GT-1可能介导保守的病原菌响应途径 | 第54页 |
| 4.3 玉米纹枯病菌可能存在保守的致病机理 | 第54页 |
| 4.4 本研究启动子和调控元件的应用前景 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 附录 | 第64-71页 |
| 附录1: 常规培养基及溶液配制 | 第64-71页 |
| 附录2: 在读期间发表论文及专利目录 | 第71页 |
