| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 目录 | 第11-13页 |
| 符号说明 | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-34页 |
| 2.1 研究对象 | 第16页 |
| 2.2 仪器设备与试剂 | 第16-18页 |
| 2.2.1 主要仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.2.2 主要试剂和耗材 | 第17页 |
| 2.2.3 其他常用试剂 | 第17页 |
| 2.2.4 常用试剂配制 | 第17-18页 |
| 2.3 实验步骤 | 第18-33页 |
| 2.3.0 分离外周静脉血单个核细胞 | 第18页 |
| 2.3.1 磁珠法分选CD4~+T细胞 | 第18-19页 |
| 2.3.2 细胞培养及MPA处理 | 第19页 |
| 2.3.3 DNA抽提 | 第19-20页 |
| 2.3.4 测定CD4~+T细胞基因组整体甲基化水平 | 第20-21页 |
| 2.3.5 组蛋白抽提和组蛋白H3K4/H3K9整体甲基化及组蛋白H3/H4整体乙酰化检测 | 第21-22页 |
| 2.3.6 流式细胞学检测CD4~+T细胞CD11a、CD70及CD40L的表达 | 第22页 |
| 2.3.7 RNA抽提 | 第22页 |
| 2.3.8 逆转录合成cDNA | 第22-23页 |
| 2.3.9 实时定量RT-qPCR | 第23-24页 |
| 2.3.10 亚硫酸氢钠处理和焦磷酸测序 | 第24-29页 |
| 2.3.11 ChIP检测CD4~+T细胞中CD40L启动子区组蛋白修饰 | 第29-31页 |
| 2.3.12 T、B细胞共孵育和IgG抗体检测 | 第31-33页 |
| 2.3.13 统计学方法 | 第33页 |
| 2.4 实验总流程图 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-48页 |
| 3.1 MPA对SLE患者CD4~+T细胞整体DNA甲基化水平和组蛋白整体乙酰化及甲基化水平影响 | 第34-35页 |
| 3.2 MPA对SLE患者CD4~+T细胞中乙酰转移酶(HATs)和去乙酰化酶(HDACs)mRNA表达水平的影响 | 第35-41页 |
| 3.3 MPA对SLE患者CD4~+T细胞CD40L、CD11a和CD70蛋白表达水平的影响 | 第41-42页 |
| 3.4 MPA对SLE患者CD4~+T细胞CD40L、CD11a和CD70的mRNA表达水平的影响 | 第42-44页 |
| 3.5 MPA对SLE患者CD4~+T细胞CD40L基因启动子区DNA甲基化水平的影响 | 第44-45页 |
| 3.6 MPA对SLE患者CD4~+T细胞中CD40L基因启动子调控序列组蛋白修饰水平的影响 | 第45-46页 |
| 3.7 MPA对SLE患者CD4~+T细胞自身反应性的影响 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 综述 | 第53-61页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 攻读学位期间主要的成果 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
