| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 杨树——林木研究中的模式树种 | 第12-13页 |
| 1.2 重金属污染及植物修复 | 第13-17页 |
| 1.2.1 镉对人类的危害及与镉相关的超富集植物 | 第14-15页 |
| 1.2.2 利用基因工程进行植物修复 | 第15-17页 |
| 1.3 研究中存在的问题 | 第17-19页 |
| 1.3.1 植物修复存在的问题 | 第17页 |
| 1.3.2 灰杨是否能作为超富集植物 | 第17-18页 |
| 1.3.3 HMA2/4 存在的疑问 | 第18-19页 |
| 1.4 原生质体及其应用概述 | 第19-22页 |
| 1.4.1 原生质体相关研究历史 | 第19-20页 |
| 1.4.2 原生质体应用 | 第20-22页 |
| 1.5 试验的研究目的及技术路线 | 第22-24页 |
| 1.5.1 研究目的及内容 | 第22页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第22-24页 |
| 第二章 灰杨 PcHMA4 基因的克隆与载体构建 | 第24-34页 |
| 2.1 试验材料 | 第24页 |
| 2.1.1 材料及菌株载体 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂药品及试剂盒 | 第24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-29页 |
| 2.2.1 灰杨根总 RNA 提取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 第一链 cDNA 合成 | 第25页 |
| 2.2.3 目的基因的克隆 | 第25-26页 |
| 2.2.4 目的片断的回收 | 第26-27页 |
| 2.2.5 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第27页 |
| 2.2.6 TA 克隆 | 第27页 |
| 2.2.7 阳性克隆鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.8 小量质粒提取 | 第28页 |
| 2.2.9 质粒酶切 | 第28-29页 |
| 2.2.10 重组反应 | 第29页 |
| 2.2.11 转化 | 第29页 |
| 2.3 结果 | 第29-33页 |
| 2.3.1 PcHMA4 克隆 | 第29-30页 |
| 2.3.2 PcHMA4 TA 克隆及同源性分析 | 第30-31页 |
| 2.3.3 pET28a-HMA4 载体构建 | 第31-32页 |
| 2.3.4 pTF486-HMA4 载体构建 | 第32-33页 |
| 2.4 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 灰杨原生质体分离体系的建立 | 第34-40页 |
| 3.1 试验材料 | 第34页 |
| 3.1.1 材料 | 第34页 |
| 3.1.2 主要试剂药品及试配置 | 第34页 |
| 3.2 试验方法 | 第34-36页 |
| 3.2.1 原生质体分离 | 第34-35页 |
| 3.2.2 血球计数板计数 | 第35页 |
| 3.2.3 染色 | 第35-36页 |
| 3.3 结果 | 第36-38页 |
| 3.3.1 酶液配比对原生质体产量及活性的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.2 酶解时间对原生质体产量及活性的影响 | 第37-38页 |
| 3.4 小结 | 第38-40页 |
| 第四章 PcHMA 的表达分析研究 | 第40-47页 |
| 4.1 试验材料 | 第40-41页 |
| 4.1.1 材料及菌株载体 | 第40页 |
| 4.1.2 主要试剂药品及仪器 | 第40-41页 |
| 4.2 试验方法 | 第41-43页 |
| 4.2.1 诱导靶蛋白表达 | 第41页 |
| 4.2.2 蛋白电泳 | 第41-42页 |
| 4.2.3 原生质体的瞬时表达 | 第42页 |
| 4.2.4 材料处理 | 第42-43页 |
| 4.2.5 实时定量 PCR | 第43页 |
| 4.3 结果 | 第43-46页 |
| 4.3.1 原核表达 | 第43-44页 |
| 4.3.2 瞬时表达 | 第44-45页 |
| 4.3.3 Cd 在各组织中含量分析 | 第45-46页 |
| 4.3.4 PcHMA4 组织表达分析 | 第46页 |
| 4.4 小结 | 第46-47页 |
| 第五章 试验讨论与结论 | 第47-51页 |
| 5.1 讨论 | 第47-50页 |
| 5.1.1 灰杨 PcHMA4 基因的克隆与载体构建 | 第47页 |
| 5.1.2 灰杨原生质体分离体系的建立 | 第47-48页 |
| 5.1.3 PcHMA4 基因表达分析 | 第48-50页 |
| 5.2 试验结论 | 第50-51页 |
| 附录 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |