| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第10-17页 |
| 1.1 球孢白僵菌的分类和生物学特性 | 第10-11页 |
| 1.1.1 球孢白僵菌的分类地位 | 第10页 |
| 1.1.2 球孢白僵菌的生物学特性 | 第10-11页 |
| 1.2 球孢白僵菌的杀虫作用 | 第11-12页 |
| 1.2.1 球孢白僵菌的致病原理 | 第11-12页 |
| 1.2.2 球孢白僵菌的杀虫优势 | 第12页 |
| 1.3 球孢白僵菌的遗传转化及基因工程研究 | 第12-14页 |
| 1.3.1 白僵菌的菌种选育 | 第12页 |
| 1.3.2 球孢白僵菌遗传转化常用方法 | 第12-13页 |
| 1.3.3 球孢白僵菌基因工程研究进展 | 第13-14页 |
| 1.4 热激蛋白启动子在真菌遗传转化中的作用 | 第14-15页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第15-16页 |
| 1.6 技术路线 | 第16-17页 |
| 第2章 材料与方法 | 第17-24页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.1 供试菌株和质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 供试虫源 | 第17页 |
| 2.1.3 培养基 | 第17页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-24页 |
| 2.2.1 hsp70-F 质粒载体的构建 | 第18-20页 |
| 2.2.2 球孢白僵菌原生质体的制备 | 第20-21页 |
| 2.2.3 PEG 介导的遗传转化体系建立 | 第21页 |
| 2.2.4 继代培养稳定性检测 | 第21-22页 |
| 2.2.5 hsp70 介导的白僵菌对玉米螟毒力影响分析 | 第22页 |
| 2.2.6 常规分子实验方法 | 第22-24页 |
| 第3章 球孢白僵菌遗传转化体系的构建 | 第24-32页 |
| 3.1 hsp70-F 质粒载体的构建 | 第24-27页 |
| 3.1.1 通过 PHD3-hsp70 载体扩增 hsp70 基因 | 第24页 |
| 3.1.2 PF 质粒与 PHD3-hsp70 质粒的酶切和连接构建 | 第24-25页 |
| 3.1.3 hsp70-F 载体的 PCR 及双酶切验证 | 第25-26页 |
| 3.1.4 测序结果 | 第26-27页 |
| 3.2 球孢白僵菌原生质体的制备 | 第27-28页 |
| 3.2.1 菌龄培养时间的筛选 | 第27页 |
| 3.2.2 原生质体的获得 | 第27-28页 |
| 3.3 PEG 介导的原生质体遗传转化 | 第28-31页 |
| 3.3.1 平均转化效率结果分析 | 第29页 |
| 3.3.2 转化子 PCR 检测 | 第29-31页 |
| 3.4 小结 | 第31-32页 |
| 第4章 hsp70 介导的球孢白僵菌稳定性分析及杀虫性能研究 | 第32-37页 |
| 4.1 三代继代培养结果分析 | 第32-33页 |
| 4.2 稳定性分析 | 第33-34页 |
| 4.3 hsp70 介导的球孢白僵菌对玉米螟毒力影响分析 | 第34-35页 |
| 4.3.1 转化前后受体菌孢子形态对比 | 第34页 |
| 4.3.2 白僵菌对玉米螟毒力影响 | 第34-35页 |
| 4.4 小结 | 第35-37页 |
| 结论与展望 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-45页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
