| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-18页 |
| 1.1 阿维菌素的概述 | 第12-13页 |
| 1.2 阿维菌素的毒理学研究概况 | 第13-14页 |
| 1.2.1 阿维菌素药理作用机制的研究 | 第13页 |
| 1.2.2 阿维菌素毒性的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 自噬的概述 | 第14-15页 |
| 1.4 自噬的检测方法 | 第15-16页 |
| 1.5 自噬在毒理学研究中的作用研究进展 | 第16页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-27页 |
| 2.1 主要仪器和试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.2 实验材料 | 第19页 |
| 2.2.1 实验动物及处理 | 第19页 |
| 2.2.2 样品的采集和处理 | 第19页 |
| 2.3 王鸽LC3基因的克隆、原核表达、多克隆抗体的制备 | 第19-24页 |
| 2.3.1 LC3-Ⅱ抗原性分析及重组蛋白的设计 | 第19页 |
| 2.3.2 PCR引物设计与合成 | 第19-20页 |
| 2.3.3 qRT-PCR扩增目的基因 | 第20页 |
| 2.3.4 基因的克隆、鉴定及序列测定与分析 | 第20-21页 |
| 2.3.5 王鸽LC3基因重组表达载体的构建与鉴定 | 第21页 |
| 2.3.6 王鸽LC3基因在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定 | 第21-23页 |
| 2.3.7 抗王鸽LC3多克隆抗体的制备和鉴定 | 第23-24页 |
| 2.4 检测项目与方法 | 第24-26页 |
| 2.4.1 组织超微结构的观察 | 第24页 |
| 2.4.2 王鸽脑组织中自噬相关基因mRNA表达的检测 | 第24-26页 |
| 2.4.3 王鸽LC3、Beclin 1和Dynein蛋白表达情况的检测 | 第26页 |
| 2.5 试验数据分析与统计 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-41页 |
| 3.1 王鸽LC3多克隆抗体的制备 | 第27-30页 |
| 3.1.1 王鸽脑组织中总RNA的提取与鉴定 | 第27页 |
| 3.1.2 王鸽LC3基因的PCR扩增结果 | 第27-28页 |
| 3.1.3 王鸽LC3mRNA基因基因序列的测序结果 | 第28页 |
| 3.1.4 重组表达载体的构建与鉴定 | 第28-29页 |
| 3.1.5 融合蛋白的表达、鉴定与纯化 | 第29-30页 |
| 3.1.6 多克隆抗体的制备和鉴定结果 | 第30页 |
| 3.2 王鸽脑组织超微结构观察结果 | 第30-31页 |
| 3.3 王鸽脑组织中LC3、Beclin 1、Dynein、ATG5、ATG4B和TOR mRNA和LC3、Beclin 1、Dynein蛋白表达的检测结果 | 第31-41页 |
| 3.3.1 实时PCR检测方法的建立 | 第31页 |
| 3.3.2 阿维菌素亚慢性中毒对王鸽大脑中LC3、Beclin 1、Dynein、ATG5、ATG4B和TOR mRNA表达影响的检测结果 | 第31-33页 |
| 3.3.3 阿维菌素亚慢性中毒对王鸽大脑中LC3、Beclin 1、Dynein蛋白表达影响的检测结果 | 第33-34页 |
| 3.3.4 阿维菌素亚慢性中毒对王鸽小脑中LC3、Beclin 1、Dynein、ATG5、ATG4B和TOR mRNA表达影响的检测结果 | 第34-36页 |
| 3.3.5 阿维菌素亚慢性中毒对王鸽小脑中LC3、Beclin 1、Dynein蛋白表达影响的检测结果 | 第36-37页 |
| 3.3.6 阿维菌素亚慢性中毒对王鸽视叶中LC3、Beclin 1、Dynein、ATG5、ATG4B和TOR mRNA表达影响的检测结果 | 第37-40页 |
| 3.3.7 阿维菌素亚慢性中毒对王鸽视叶中LC3、Beclin 1、Dynein蛋白表达影响的检测结果 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-47页 |
| 4.1 王鸽LC3的克隆、表达及多克隆抗体的制备 | 第41-42页 |
| 4.2 阿维菌素亚慢性中毒后对王鸽脑组织自噬形态超微结构的影响 | 第42页 |
| 4.3 阿维菌素亚慢性中毒后对王鸽脑组织中自噬相关基因的影响 | 第42-47页 |
| 4.3.1 阿维菌素亚慢性中毒后对王鸽脑组织中自噬相关基因TOR的影响 | 第43页 |
| 4.3.2 阿维菌素亚慢性中毒后对王鸽脑组织中自噬相关基因Beclin 1的影响 | 第43-44页 |
| 4.3.3 阿维菌素亚慢性中毒后对王鸽脑组织中自噬相关基因LC3、ATG4B和ATG 的影响 | 第44-45页 |
| 4.3.4 阿维菌素亚慢性暴露后对王鸽脑组织中自噬相关基因Dynein的影响 | 第45-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录 | 第54-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第64页 |
