| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略词表 | 第12-14页 |
| 1 绪论 | 第14-29页 |
| 1.1 引言 | 第14页 |
| 1.2 细胞凋亡 | 第14-15页 |
| 1.3 自噬 | 第15-18页 |
| 1.3.1 自噬的机制 | 第15-17页 |
| 1.3.2 自噬调节器P | 第17-18页 |
| 1.4 程序性坏死 | 第18-23页 |
| 1.4.1 程序性坏死的机制 | 第18-20页 |
| 1.4.2 受体相互作用蛋白RIP | 第20-23页 |
| 1.5 细胞凋亡与坏死的相互作用 | 第23-24页 |
| 1.6 细胞坏死与自噬的相互作用 | 第24-25页 |
| 1.7 JaspineB衍生物CY | 第25-26页 |
| 1.8 本课题研究的目的和意义 | 第26-29页 |
| 2 材料和方法 | 第29-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-36页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第29页 |
| 2.1.2 实验主要试剂 | 第29-32页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第32-33页 |
| 2.1.4 试剂的配制 | 第33-36页 |
| 2.2 细胞培养 | 第36-38页 |
| 2.2.1 贴壁细胞培养 | 第36-37页 |
| 2.2.2 传代 | 第37页 |
| 2.2.3 计数 | 第37-38页 |
| 2.3 细胞死亡率检测(MTT法) | 第38-39页 |
| 2.4 细胞形态变化检测 | 第39-40页 |
| 2.4.1 Hoechst33342/PI细胞凋亡与坏死双染法 | 第39页 |
| 2.4.2 LC3免疫荧光 | 第39-40页 |
| 2.5 细胞全蛋白抽提 | 第40页 |
| 2.6 BCA法测定蛋白浓度 | 第40-41页 |
| 2.7 蛋白免疫印迹实验 | 第41-42页 |
| 2.8 蛋白免疫共沉淀实验 | 第42页 |
| 2.9 RIP3敲除细胞系构建 | 第42-44页 |
| 2.9.1 引物 | 第42页 |
| 2.9.2 质粒转化及筛选 | 第42-43页 |
| 2.9.3 慢病毒包装 | 第43-44页 |
| 2.9.4 筛选RIP3-/-胃癌MGC803细胞株 | 第44页 |
| 2.10 动物实验 | 第44-45页 |
| 2.11 统计学分析 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-59页 |
| 3.1 JaspineB衍生物CY6对胃癌细胞的增值抑制作用 | 第46-47页 |
| 3.2 CY6诱导胃癌细胞程序性坏死 | 第47-49页 |
| 3.2.1 Hoechst33342/PI荧光双染色检测CY6作用后MGC803细胞的形态变化 | 第47-48页 |
| 3.2.2 CY6上调程序性坏死相关蛋白的表达 | 第48页 |
| 3.2.3 CY6诱导MGC803细胞坏死体的形成 | 第48-49页 |
| 3.3 CY6诱导胃癌细胞自噬作用 | 第49-52页 |
| 3.3.1 显微镜观察细胞形态 | 第49页 |
| 3.3.2 CY6调控自噬相关蛋白的表达 | 第49-50页 |
| 3.3.3 CY6抑制Beclin-1与Bcl-2/Bcl-xl复合体的形成 | 第50-51页 |
| 3.3.4 自噬抑制剂Baf-A1有效阻断CY6诱导的胃癌细胞死亡 | 第51-52页 |
| 3.4 CY6诱导胃癌细胞发生缺陷型自噬 | 第52-53页 |
| 3.5 CY6促进RIP3与P62的结合 | 第53-54页 |
| 3.6 RIP3是CY6诱导胃癌细胞死亡的主要靶点 | 第54-56页 |
| 3.6.1 RIP1抑制剂Nec-1对CY6诱导的胃癌细胞死亡的影响 | 第54-55页 |
| 3.6.2 RIP3KD完全阻断CY6诱导的胃癌细胞死亡 | 第55页 |
| 3.6.3 RIP3调节CY6诱导的胃癌细胞自噬 | 第55-56页 |
| 3.7 CY6在体内诱导程序性坏死和自噬 | 第56-59页 |
| 3.7.1 CY6在体内抑制肿瘤的生长 | 第56-57页 |
| 3.7.2 CY6在体内诱导程序性坏死和自噬 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-63页 |
| 4.1 RIP3参与CY6作用于胃癌细胞的动态过程 | 第59-60页 |
| 4.2 CY6诱导胃癌细胞程序性坏死 | 第60页 |
| 4.3 P62参与CY6作用于胃癌细胞的过程 | 第60-61页 |
| 4.4 CY6诱导胃癌细胞自噬 | 第61-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-76页 |
| 个人简历 | 第76-77页 |
| 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
