摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 引言 | 第9-17页 |
1.1 背景介绍 | 第9页 |
1.2 理论基础 | 第9-13页 |
1.2.1 PRL3 在细胞中结合蛋白的研究 | 第10-11页 |
1.2.2 PRL3 基因过表达和沉默对胶质瘤细胞增殖和迁移能力的影响 | 第11-13页 |
1.3 研究目的与内容 | 第13-15页 |
1.3.1 PRL3 蛋白在细胞中结合蛋白的研究 | 第14页 |
1.3.2 PRL3 基因过表达和沉默对胶质瘤细胞增殖和迁移能力的影响 | 第14-15页 |
1.4 预期结果与意义 | 第15-17页 |
1.4.1 PRL3 蛋白在细胞中结合蛋白的预期结果和研究意义 | 第15页 |
1.4.2 PRL3 基因过表达和沉默对胶质瘤细胞增殖和迁移能力影响的预期结果和研究意义 | 第15-17页 |
2 PRL3 蛋白在细胞中结合蛋白的筛选 | 第17-33页 |
2.1 实验材料 | 第17-20页 |
2.1.1 试剂与仪器 | 第17-19页 |
2.1.2 菌种及质粒 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-27页 |
2.2.1 获得 PRL3 基因片段 | 第20-21页 |
2.2.2 连接目的基因片段 PRL3 与 T 载体 | 第21页 |
2.2.3 构建 pGEX-6P-1-PRL3 重组质粒并鉴定 | 第21-25页 |
2.2.4 GST-PRL3 融合蛋白的诱导表达、分离纯化 | 第25-26页 |
2.2.5 融合蛋白 GST-PRL3 进行 pull-down、未知蛋白质谱分析并验证 | 第26-27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-33页 |
2.3.1 重组质粒 pGEX-6P-1-PRL3 的构建 | 第27-29页 |
2.3.2 融合蛋白 GST-PRL3 的诱导表达和分离纯化 | 第29-30页 |
2.3.3 GST-PRL3 融合蛋白、未知蛋白质谱并验证 | 第30-33页 |
3 PRL3 过表达和沉默对胶质瘤细胞增殖和迁移的影响 | 第33-43页 |
3.1 实验材料 | 第33-34页 |
3.1.1 试剂与仪器 | 第33-34页 |
3.1.2 菌种及质粒 | 第34页 |
3.2 实验方法 | 第34-38页 |
3.2.1 重组质粒 pcDAN3.1-PRL3 的构建 | 第34-35页 |
3.2.2 小干扰 RNA 载体的构建 | 第35-37页 |
3.2.3 重组质粒的转染 | 第37页 |
3.2.4 转染细胞的增殖和迁移检测 | 第37-38页 |
3.3 结果与分析 | 第38-43页 |
3.3.1 真核表达载体 pcDNA3.1-PRL3 的构建 | 第38页 |
3.3.2 PRL3 基因沉默载体 siRNA-pSilencer3.1 的构建 | 第38-39页 |
3.3.3 PRL3 对 U251 细胞增殖的影响 | 第39-40页 |
3.3.4 PRL3 对 U251 细胞迁移能力的影响 | 第40-43页 |
4 结论 | 第43-45页 |
4.1 PRL3 蛋白在细胞中结合蛋白的筛选 | 第43页 |
4.2 PRL3 过表达和沉默对肿瘤细胞增殖和迁移能力的研究 | 第43-45页 |
5 讨论 | 第45-47页 |
5.1 PRL3 蛋白在细胞中结合蛋白的筛选 | 第45页 |
5.2 PRL3 过表达和沉默对肿瘤细胞增殖和迁移能力的影响 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
文献综述 | 第51-65页 |
参考文献 | 第60-65页 |
致谢 | 第65-66页 |