| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第11-17页 |
| 第一节 镉及重金属污染概况 | 第11-12页 |
| 1.1 重金属污染现状 | 第11页 |
| 1.2 镉污染研究概况 | 第11-12页 |
| 第二节 藻类处理重金属污染的研究进展 | 第12-14页 |
| 2.1 藻类重金属污染处理概述 | 第12-13页 |
| 2.2 衣藻处理镉污染研究 | 第13-14页 |
| 第三节 重金属代谢机制研究 | 第14-16页 |
| 3.1 衣藻重金属代谢机制 | 第14-15页 |
| 3.2 不同生物的镉代谢机制 | 第15-16页 |
| 第四节 研究课题意义 | 第16-17页 |
| 第二章 筛选衣藻镉调控相关突变体 | 第17-25页 |
| 第一节 材料与方法 | 第17-20页 |
| 1.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 1.1.1 实验藻株 | 第17页 |
| 1.1.2 菌株、载体 | 第17页 |
| 1.1.3 培养基 | 第17-18页 |
| 1.1.4 主要试剂耗材 | 第18页 |
| 1.1.5 主要仪器设备 | 第18页 |
| 1.2 实验方法 | 第18-20页 |
| 1.2.1 氯化镉筛选浓度的确定 | 第18-19页 |
| 1.2.2 筛选衣藻镉代谢突变体 | 第19-20页 |
| 第二节 实验结果与分析 | 第20-24页 |
| 2.1 确定筛选莱茵衣藻重金属镉抗型突变体和敏感型突变体的最佳筛选浓度 | 第20页 |
| 2.2 酶切获得插入片段aphⅧ | 第20-21页 |
| 2.3 筛选获得氯化镉抗型以及敏感型突变藻株 | 第21-24页 |
| 2.3.1 筛选获得氯化镉抗型突变藻株CB14和TC | 第21-22页 |
| 2.3.2 筛选获得氯化镉敏感型突变藻株CB27和CB | 第22-24页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 确定突变体突变基因 | 第25-31页 |
| 第一节 材料与方法 | 第25-28页 |
| 1.1 材料与仪器 | 第25-26页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 1.1.2 主要试剂耗材 | 第25页 |
| 1.1.3 主要仪器与网站 | 第25-26页 |
| 1.2 实验方法 | 第26-28页 |
| 1.2.1 突变体基因组DNA的提取 | 第26页 |
| 1.2.2 RESDA-PCR | 第26-27页 |
| 1.2.3 插入突变位点的鉴定 | 第27-28页 |
| 第二节 实验结果与分析 | 第28-30页 |
| 2.1 TC4RESDA-PCR电泳及其侧翼序列 | 第28页 |
| 2.2 CB14RESDA-PCR电泳及其侧翼序列 | 第28-29页 |
| 2.3 CB27RESDA-PCR电泳及其侧翼序列 | 第29-30页 |
| 2.4 CB30RESDA-PCR电泳及其侧翼序列 | 第30页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第30-31页 |
| 第四章 TC4突变体以及蛋白的研究 | 第31-46页 |
| 第一节 材料与方法 | 第32-40页 |
| 1.1 材料与仪器 | 第32-34页 |
| 1.1.1 实验藻株 | 第32页 |
| 1.1.2 菌株、载体 | 第32页 |
| 1.1.3 培养基 | 第32-33页 |
| 1.1.4 主要试剂耗材 | 第33页 |
| 1.1.5 主要仪器与网站 | 第33-34页 |
| 1.2 实验方法 | 第34-40页 |
| 1.2.1 蛋白结构域 | 第34页 |
| 1.2.2 衣藻总RNA的提取与反转录 | 第34页 |
| 1.2.3 衣藻突变基因的克隆 | 第34-35页 |
| 1.2.4 构建互补表达载体 | 第35-36页 |
| 1.2.5 蛋白质免疫印迹 | 第36-37页 |
| 1.2.6 SDS-PAGE考马斯亮蓝染色与脱色 | 第37-38页 |
| 1.2.7 互补藻株的获取 | 第38页 |
| 1.2.8 野生型藻株21gr、突变体藻株TC4以及互补藻株TC4-6的性状鉴定 | 第38页 |
| 1.2.9 氯化镉液体培养基中筛选浓度的确定 | 第38-39页 |
| 1.2.10 衣藻细胞镉含量测定 | 第39页 |
| 1.2.11 互补藻株在一定浓度的氯化镉TAP液体培养基中的蛋白表达量检测 | 第39-40页 |
| 第二节 实验结果与分析 | 第40-44页 |
| 2.1 SF56-ABT基因的插入突变位点鉴定 | 第40页 |
| 2.2 SF56-ABT的蛋白结构域分析 | 第40页 |
| 2.3 获得镉抗型突变藻株TC4的互补藻株TC4- | 第40-41页 |
| 2.4 野生型藻株21gr、突变体藻株TC4以及互补藻株TC4-6性状对照 | 第41-42页 |
| 2.5 确定0.1mM氯化镉液体培养基作为藻株筛选浓度 | 第42-43页 |
| 2.6 野生型(21gr)、突变体(TC4)和互补藻株(TC4-6)中镉吸附含量测量.. | 第43-44页 |
| 2.7 HA抗体检测在0.1mM氯化镉中TC4-6藻株中的SF56-ABT蛋白表达变化 | 第44页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 其他突变体以及基因分析研究 | 第46-55页 |
| 第一节 材料与方法 | 第46-50页 |
| 1.1 实验材料 | 第46-48页 |
| 1.1.1 实验藻株 | 第46-47页 |
| 1.1.2 菌株、载体 | 第47页 |
| 1.1.3 培养基 | 第47页 |
| 1.1.4 主要试剂耗材 | 第47-48页 |
| 1.1.5 主要仪器与网站 | 第48页 |
| 1.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 1.2.1 蛋白结构域分析 | 第48页 |
| 1.2.2 衣藻总RNA的提取与反转录 | 第48-49页 |
| 1.2.3 衣藻突变基因的克隆 | 第49页 |
| 1.2.4 构建互补表达载体 | 第49-50页 |
| 第二节 结果与分析 | 第50-54页 |
| 2.1 衣藻镉抗型突变体CB14的实验结果与分析 | 第50-51页 |
| 2.1.1 SRrG基因的插入突变位点鉴定 | 第50页 |
| 2.1.2 SRrG的蛋白结构域分析 | 第50-51页 |
| 2.1.3 SRrG基因的cDNA克隆及互补表达载体构建 | 第51页 |
| 2.2 衣藻镉抗型突变体CB27的实验结果与分析 | 第51-53页 |
| 2.2.1 FAP基因的插入突变位点鉴定 | 第51-52页 |
| 2.2.2 FAP的蛋白结构域分析 | 第52页 |
| 2.2.3 FAP基因的cDNA克隆及互补表达载体构建 | 第52-53页 |
| 2.3 衣藻镉抗型突变体CB30的实验结果与分析 | 第53-54页 |
| 2.3.1 MhABC基因的插入突变位点鉴定 | 第53页 |
| 2.3.2 MhABC的蛋白结构域分析 | 第53-54页 |
| 第三节 讨论与小结 | 第54-55页 |
| 第六章 讨论与展望 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果 | 第66-67页 |
