| 英文缩略词表 | 第8-10页 |
| 中文摘要 | 第10-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 1.前言 | 第19-20页 |
| 2.材料与方法 | 第20-25页 |
| 2.1 细胞株 | 第20页 |
| 2.2 质粒 | 第20-21页 |
| 2.3 标本的收集 | 第21页 |
| 2.4 抗体 | 第21页 |
| 2.5 引物合成 | 第21页 |
| 2.6 其他主要试剂耗材 | 第21-22页 |
| 2.7 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.8 主要试剂和溶液的配制 | 第23-25页 |
| 3.实验方法 | 第25-38页 |
| 3.1 石蜡切片免疫组织化学染色 | 第25-26页 |
| 3.2 细胞免疫荧光染色 | 第26-27页 |
| 3.3 组织切片免疫荧光双标 | 第27-28页 |
| 3.4 细胞转染 | 第28-29页 |
| 3.5 软琼脂克隆形成实验 | 第29页 |
| 3.6 荷瘤鼠模型的建立 | 第29-30页 |
| 3.7 免疫共沉淀 | 第30-31页 |
| 3.7.1 偶联抗体 | 第30页 |
| 3.7.2 裂解细胞 | 第30-31页 |
| 3.7.3 Co-IP | 第31页 |
| 3.8 蛋白免疫印迹 | 第31-33页 |
| 3.8.1 全细胞裂解液蛋白样品的制备 | 第31页 |
| 3.8.2 SDS-PAGE凝胶制备 | 第31-32页 |
| 3.8.3 蛋白上样和电泳 | 第32页 |
| 3.8.4 转膜 | 第32页 |
| 3.8.5 蛋白检测 | 第32-33页 |
| 3.9 质粒的构建 | 第33-38页 |
| 3.9.1 酶切 | 第33页 |
| 3.9.2 凝胶回收 | 第33-34页 |
| 3.9.3 连接 | 第34页 |
| 3.9.4 转化 | 第34-35页 |
| 3.9.5 质粒小抽 | 第35-36页 |
| 3.9.6 酶切鉴定以及测序 | 第36页 |
| 3.9.7 质粒的大抽 | 第36-38页 |
| 4.实验结果 | 第38-55页 |
| 4.1 SUMO1在肝癌组织及肝癌细胞中高表达 | 第38-40页 |
| 4.1.1 在HCC患者肝癌组织中SUMO1表达高于癌旁组织 | 第38页 |
| 4.1.2 SUMO1在肝癌细胞株SMMC-7721 中表达高于肝细胞株L02 | 第38-39页 |
| 4.1.3 SUMO1在肝癌细胞核中的定位 | 第39-40页 |
| 4.2 SUMO1促进肝癌细胞增殖 | 第40-42页 |
| 4.2.1 HCC病人肝癌组织中SUMO1与Ki-67 存在共定位 | 第40-41页 |
| 4.2.2 SUMO1促进肝癌细胞株SMMC-7721 的增殖 | 第41-42页 |
| 4.3 SUMO1与磷酸化p65蛋白呈正相关 | 第42-45页 |
| 4.3.1 p-p65 (S276) 在肝癌组织中的表达高于癌旁组织且主要定位于细胞核 | 第42-43页 |
| 4.3.2 p-p65（S536）在肝癌组织中的表达高于癌旁组织且主要定位于细胞核 | 第43-44页 |
| 4.3.3 HCC病人组织中SUMO1与磷酸化p65蛋白表达呈正相关 | 第44-45页 |
| 4.4 在肝癌细胞SMMC-7721 中，SUMO1促进p65蛋白发生磷酸化 | 第45-47页 |
| 4.4.1 过表达SUMO1后，磷酸化p65蛋白表达增加 | 第45-46页 |
| 4.4.2 敲低SUMO1后，磷酸化p65蛋白表达减少 | 第46-47页 |
| 4.5 在MANF敲低的荷瘤鼠模型中，SUMO1与磷酸化p65蛋白相关 | 第47-49页 |
| 4.6 在肝癌细胞SMMC-7721 中，SUMO1可以对MANF蛋白进行SUMO化修饰 | 第49-50页 |
| 4.7 在HCC病人的肝癌组织中，磷酸化p65蛋白与MANF蛋白存在共定位 | 第50-51页 |
| 4.8 FLAG-p65-wt及FLAG-p65-mutants质粒的构建 | 第51-55页 |
| 4.8.1 酶切后获得p65野生型以及p65突变体的CDS区 | 第51-52页 |
| 4.8.2 pFlag-CMV-6a载体的酶切 | 第52页 |
| 4.8.3 pFlag-CMV-6a载体与p65野生型及p65突变体胶回收、连接以及连接后转化 | 第52-53页 |
| 4.8.4 FLAG-p65野生型及FLAG-p65突变体质粒的测序 | 第53-55页 |
| 5.讨论 | 第55-57页 |
| 6.结论 | 第57-58页 |
| 7.参考文献 | 第58-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 综述 | 第65-85页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
