| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 糖尿病与人体葡萄糖代谢 | 第11-14页 |
| 1.1.1 人体葡萄糖代谢 | 第11-13页 |
| 1.1.2 植物中常见α-葡萄糖苷酶抑制剂 | 第13页 |
| 1.1.3 常见的天然葡萄糖吸收抑制剂 | 第13-14页 |
| 1.2 杜仲 | 第14-16页 |
| 1.2.1 杜仲主要化学组分 | 第14-15页 |
| 1.2.2 杜仲叶降血糖作用 | 第15-16页 |
| 1.2.2.1 杜仲叶甲醇提取物降血糖作用 | 第15页 |
| 1.2.2.2 杜仲多糖降血糖作用 | 第15页 |
| 1.2.2.3 本实验室关于杜仲叶降血糖的已有的研究 | 第15-16页 |
| 1.3 Caco-2细胞模型 | 第16-17页 |
| 1.3.1 Caco-2细胞应用于二糖酶活性测定 | 第16页 |
| 1.3.2 Caco-2细胞应用于葡萄糖吸收转运 | 第16-17页 |
| 1.4 本论文的研究目的和意义 | 第17-19页 |
| 2 杜仲叶乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的酶促动力学研究 | 第19-27页 |
| 2.1 材料与设备 | 第19页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-22页 |
| 2.2.1 杜仲叶乙醇提取物的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 大孔树脂纯化 | 第20页 |
| 2.2.2.1 大孔树脂的预处理 | 第20页 |
| 2.2.2.2 动态吸附 | 第20页 |
| 2.2.3 α-葡萄糖苷酶的抑制活性测定 | 第20页 |
| 2.2.4 α-葡萄糖苷酶抑制动力学试验 | 第20-22页 |
| 2.2.4.1 α-葡萄糖苷酶的酶促反应动力学 | 第20-21页 |
| 2.2.4.2 EEB的抑制动力学实验 | 第21-22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-24页 |
| 2.3.1 杜仲叶乙醇提取物的洗脱 | 第22-23页 |
| 2.3.2 杜仲叶乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用 | 第23页 |
| 2.3.3 α-葡萄糖苷酶的抑制动力学实验 | 第23-24页 |
| 2.3.4 EEB的抑制动力学实验 | 第24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-27页 |
| 3 杜仲叶乙醇提取物对Caco-2细胞中二糖酶及葡萄糖吸收的抑制作用 | 第27-37页 |
| 3.1 材料与设备 | 第27-28页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 3.1.2 仪器设备 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-32页 |
| 3.2.1 Caco-2细胞的培养方法 | 第28页 |
| 3.2.1.1 完全培养基的配制 | 第28页 |
| 3.2.1.2 Caco-2细胞的培养 | 第28页 |
| 3.2.2 EEB的细胞毒性实验-MTT法 | 第28-29页 |
| 3.2.3 EEB对Caco-2细胞模型上二糖酶的抑制活性 | 第29页 |
| 3.2.4 Caco-2细胞葡萄糖吸收的测定 | 第29-30页 |
| 3.2.5 反复冻融法裂解Caco-2细胞 | 第30页 |
| 3.2.6 考马斯亮蓝法测定Caco-2细胞中细胞蛋白质 | 第30-31页 |
| 3.2.7 氧化酶法测定葡萄糖含量 | 第31-32页 |
| 3.3 结果与分析 | 第32-36页 |
| 3.3.1 EEB的细胞毒性实验 | 第32页 |
| 3.3.2 细胞蛋白质标准曲线 | 第32页 |
| 3.3.3 葡萄糖标准曲线 | 第32-33页 |
| 3.3.4 EEB对Caco-2细胞模型的二糖酶抑制作用 | 第33-34页 |
| 3.3.5 EEB对Caco-2细胞模型上葡萄糖吸收的影响 | 第34-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-37页 |
| 4 杜仲叶中的酚酸可抑制Caco-2细胞中二糖酶和葡萄糖的吸收 | 第37-53页 |
| 4.1 材料与设备 | 第38页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第38页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38-42页 |
| 4.2.1 酚酸及单糖类物质α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定 | 第38-40页 |
| 4.2.1.1 没食子酸、水杨酸、儿茶素、咖啡酸、对香豆酸、左旋葡萄糖、D-岩藻糖和鼠李糖的前处理 | 第39页 |
| 4.2.1.2 α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定 | 第39-40页 |
| 4.2.2 Caco-2细胞的毒性实验-MTT法 | 第40页 |
| 4.2.3 Caco-2细胞中二糖酶活性的测定 | 第40-41页 |
| 4.2.4 Caco-2细胞中葡萄糖吸收的测定 | 第41页 |
| 4.2.5 分子模拟和计算机对接分析研究 | 第41-42页 |
| 4.2.6 统计方法与数据处理 | 第42页 |
| 4.3 结果与分析 | 第42-49页 |
| 4.3.1 没食子酸、水杨酸、儿茶素、咖啡酸和对香豆酸对α-葡萄糖苷酶的抑制作用 | 第42页 |
| 4.3.2 鼠李糖、D-岩藻糖和左旋葡萄糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用 | 第42-43页 |
| 4.3.3 没食子酸、水杨酸、儿茶素和咖啡酸对Caco-2细胞生长的影响 | 第43-45页 |
| 4.3.4 儿茶素、咖啡酸、没食子酸及水杨酸对麦芽糖酶的抑制作用 | 第45页 |
| 4.3.5 儿茶素、咖啡酸、没食子酸以及水杨酸对蔗糖酶的抑制作用 | 第45-48页 |
| 4.3.6 儿茶素、咖啡酸、没食子酸及水杨酸对葡萄糖吸收的抑制 | 第48页 |
| 4.3.7 儿茶素通过与蔗糖酶活性位点结合抑制酶活性 | 第48-49页 |
| 4.4 讨论 | 第49-53页 |
| 5 结论与展望 | 第53-55页 |
| 5.1 结论 | 第53页 |
| 5.1.1 杜仲叶乙醇提取物的酶促动力学 | 第53页 |
| 5.1.2 EEB可抑制Caco-2细胞中二糖酶活性及葡萄糖吸收 | 第53页 |
| 5.1.3 杜仲叶中的酚酸可抑制Caco-2细胞中二糖酶和葡萄糖的吸收 | 第53页 |
| 5.2 本研究的创新点 | 第53-54页 |
| 5.3 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 个人简介 | 第61-63页 |
| 导师简介 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
