| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 中英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-31页 |
| 1.1 AGPase 的研究现状 | 第15-21页 |
| 1.1.1 AGPase 的发现和命名 | 第15-16页 |
| 1.1.2 AGPase 的理化性质 | 第16-18页 |
| 1.1.3 AGPase 在淀粉合成中的作用 | 第18-19页 |
| 1.1.4 AGPase 基因的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2 玉米遗传转化的研究进展 | 第21-30页 |
| 1.2.1 植物遗传转化的优越性 | 第21页 |
| 1.2.2 玉米遗传转化受体 | 第21-23页 |
| 1.2.3 玉米遗传转化方法 | 第23-30页 |
| 1.3 本实验研究目的和意义 | 第30-31页 |
| 第二章 植物表达载体的构建 | 第31-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-33页 |
| 2.1.1 载体和菌株 | 第31-32页 |
| 2.1.2 实验药品 | 第32页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第32-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-45页 |
| 2.2.1 试剂配制 | 第33页 |
| 2.2.2 培养基配方 | 第33页 |
| 2.2.3 玉米总 RNA 的提取 | 第33-34页 |
| 2.2.4 cDNA 第一条链的合成 | 第34-35页 |
| 2.2.5 引物设计 | 第35-36页 |
| 2.2.6 目的基因克隆的 PCR 反应 | 第36页 |
| 2.2.7 目的片段的回收 | 第36-37页 |
| 2.2.8 加 A 反应 | 第37页 |
| 2.2.9 目的片段与 pMD18-T 载体的连接 | 第37-38页 |
| 2.2.10 CaCl2法制备大肠杆菌感受态 | 第38页 |
| 2.2.11 重组质粒的大肠杆菌转化 | 第38-39页 |
| 2.2.12 质粒 DNA 的提取 | 第39-40页 |
| 2.2.13 重组质粒的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.2.14 定点突变 | 第41-43页 |
| 2.2.15 植物表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 2.2.16 农杆菌感受态细胞的制备 | 第44页 |
| 2.2.17 农杆菌的转化及分子鉴定 | 第44-45页 |
| 2.3 结果与分析 | 第45-49页 |
| 2.3.1 胚乳总 RNA 的提取 | 第45-46页 |
| 2.3.2 Sh2 基因的克隆 | 第46页 |
| 2.3.3 定点突变获得 HS33/Rev6 Sh2 基因 | 第46-47页 |
| 2.3.4 中间载体 pMD18-T-HS33/Rev6 Sh2 的鉴定 | 第47-48页 |
| 2.3.5 植物表达载体的鉴定 | 第48-49页 |
| 2.4 小结 | 第49页 |
| 2.5 讨论 | 第49-52页 |
| 2.5.1 启动子及目的基因的选择 | 第49-50页 |
| 2.5.2 载体的选择 | 第50页 |
| 2.5.3 载体构建过程中需要注意的一些问题 | 第50-52页 |
| 第三章 转 HS33/Rev6 Sh2 基因拟南芥的表型分析 | 第52-64页 |
| 3.1 实验材料 | 第52页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第52页 |
| 3.1.2 人工土 | 第52页 |
| 3.1.3 表达载体及菌株 | 第52页 |
| 3.2 实验方法 | 第52-57页 |
| 3.2.1 培养基配制 | 第52-53页 |
| 3.2.2 拟南芥的种植方法 | 第53页 |
| 3.2.3 拟南芥的遗传转化 | 第53-54页 |
| 3.2.4 转化子的抗性筛选 | 第54页 |
| 3.2.5 野生型拟南芥对双丙氨膦的敏感度试验 | 第54页 |
| 3.2.6 转基因拟南芥植株的 PCR 检测 | 第54-56页 |
| 3.2.7 转基因拟南芥植株的 RT-PCR 检测 | 第56页 |
| 3.2.8 拟南芥实验材料的培养及处理 | 第56-57页 |
| 3.3 结果与分析 | 第57-62页 |
| 3.3.1 拟南芥的抗性筛选 | 第57页 |
| 3.3.2 双丙氨膦对拟南芥的致死率 | 第57-58页 |
| 3.3.3 转基因拟南芥植株的 PCR 检测 | 第58-59页 |
| 3.3.4 转基因拟南芥植株的 RT-PCR 检测 | 第59-60页 |
| 3.3.5 HS33/Rev6 Sh2 基因对拟南芥抽薹时间的影响 | 第60页 |
| 3.3.6 HS33/Rev6 Sh2 基因对拟南芥果荚籽粒数的影响 | 第60-61页 |
| 3.3.7 HS33/Rev6 Sh2 基因对拟南芥千粒重的影响 | 第61-62页 |
| 3.4 小结 | 第62页 |
| 3.5 讨论 | 第62-64页 |
| 3.5.1 拟南芥的抗性筛选问题 | 第62页 |
| 3.5.2 转基因拟南芥的表型变化分析 | 第62-64页 |
| 第四章 根癌农杆菌介导的玉米遗传转化 | 第64-73页 |
| 4.1 实验材料 | 第64-65页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第64页 |
| 4.1.2 表达载体及菌株 | 第64页 |
| 4.1.3 试剂配制 | 第64页 |
| 4.1.4 实验所需培养基 | 第64-65页 |
| 4.2 以幼胚为受体材料的遗传转化 | 第65-69页 |
| 4.2.1 实验方法 | 第65-67页 |
| 4.2.2 结果与分析 | 第67-69页 |
| 4.3 以体细胞胚胎为受体材料的遗传转化 | 第69-71页 |
| 4.3.1 实验方法 | 第69-70页 |
| 4.3.2 结果与分析 | 第70-71页 |
| 4.4 小结 | 第71页 |
| 4.5 讨论 | 第71-73页 |
| 4.5.1 幼胚转化经体胚诱导间接分化成苗 | 第71页 |
| 4.5.2 转化初期双丙氨膦的添加 | 第71-72页 |
| 4.5.3 转基因植株的授粉结实问题 | 第72页 |
| 4.5.4 展望 | 第72-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-85页 |
| 附录 | 第85-86页 |
| 作者简介 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
