| 缩略语 | 第7-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一部分 稳定过表达突变型/野生型SH3BP2的RAW264.7细胞系建立 | 第14-41页 |
| 1. 前言 | 第14-16页 |
| 2. 材料和方法 | 第16-32页 |
| 2.1 材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 试剂及动物 | 第16-17页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第17页 |
| 2.2 方法 | 第17-32页 |
| 2.2.1 主要溶液的配置 | 第17-19页 |
| 2.2.2 p3XFLAG-CMV~(TM)-14-SH3BP2突变真核表达(c.1256A>G)载体的构建及鉴定 | 第19-22页 |
| 2.2.3 转化反应 | 第22-23页 |
| 2.2.4 小量抽提质粒 | 第23-24页 |
| 2.2.5 中量提取质粒 | 第24-25页 |
| 2.2.6 小鼠单核巨噬细胞系Raw264.7的复苏、培养、传代以及冻存 | 第25-26页 |
| 2.2.7 转染 | 第26页 |
| 2.2.8 细胞总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.9 逆转录反应 | 第27-28页 |
| 2.2.10 Realtime-PCR鉴定过表达稳定株 | 第28-30页 |
| 2.2.11 Western Blot检测SH3BP2蛋白表达水平 | 第30-31页 |
| 2.2.12 统计学分析 | 第31-32页 |
| 3. 结果 | 第32-38页 |
| 3.1 测序及突变载体构建 | 第32-33页 |
| 3.2 G418筛选 | 第33-34页 |
| 3.3 过表达稳定株RAW264.7细胞的总RNA提取 | 第34-35页 |
| 3.4 过表达野生型/突变型-SH3BP2的RAW264.7稳定株各克隆的REALTIMEPCR检测 | 第35-37页 |
| 3.5 过表达野生型/突变型-SH3BP2稳定株各克隆的WESTERN检测 | 第37-38页 |
| 4. 讨论 | 第38-41页 |
| 第二部分 条件培养基对颌骨和长骨成纤维细胞增殖抑制的影响 | 第41-54页 |
| 1. 前言 | 第41-44页 |
| 2. 材料和方法 | 第44-47页 |
| 2.1 材料 | 第44页 |
| 2.1.1 试剂及动物 | 第44页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第44页 |
| 2.2 方法 | 第44-47页 |
| 2.2.1 4w雄性BALB/C小鼠颌骨/长骨来源成纤维样细胞的分离 | 第44-45页 |
| 2.2.2 条件培养基的制备及共培养 | 第45页 |
| 2.2.3 CCK-8检测细胞增殖曲线 | 第45-47页 |
| 3. 结果 | 第47-51页 |
| 3.1 4周雄性BALB/c小鼠颌骨及长骨来源成纤维样细胞培养 | 第47-48页 |
| 3.2 成纤维细胞样细胞增殖曲线检测 | 第48-49页 |
| 3.3 统计成纤维细胞死亡速率 | 第49-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-54页 |
| 全文总结 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间公开发表的论文 | 第60-61页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第61页 |
