| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 中英文缩略词 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-14页 |
| 第2章 材料与方法 | 第14-24页 |
| 2.1 研究所需材料 | 第14-17页 |
| 2.1.1 筛选所需细胞株 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.3 主要实验设备 | 第15页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第15-17页 |
| 2.2 基本实验方法 | 第17-19页 |
| 2.2.1 BMPR-Ⅱ高表达肝癌细胞株的筛选 | 第17-19页 |
| 2.3 siRNA-BMPR-II 的设计与合成及转染 | 第19-20页 |
| 2.3.1 siRNA-BMPR-II 的设计与合成 | 第19-20页 |
| 2.3.2 实验分组及转染 | 第20页 |
| 2.4 RT-PCR、Western blot 分别检测转染后各组 BMPR-II mRNA 和蛋白水平水平的表达，筛选最佳沉默序列 | 第20页 |
| 2.5 肿瘤生物活性实验 | 第20-21页 |
| 2.5.1 MTT 比色法检测定 BMPR-II 对肝癌细胞的增殖作用 | 第20-21页 |
| 2.5.2 Transwell 侵袭实验检测高表达肝癌细胞的侵袭 | 第21页 |
| 2.5.3 流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期 | 第21页 |
| 2.6 MAPKs 信号通路 | 第21-23页 |
| 2.6.1 沉默 BMPR-II 对 MAPKs 信号通路各蛋白及 VEGF-C 蛋白表达的影响 | 第21-22页 |
| 2.6.2 抑制 MAPKs 各信号通路对 VEGF-C 蛋白表达的影响 | 第22页 |
| 2.6.3 沉默 BMPR-II，并且抑制 MAPKs 各信号通路对 VEGF-C 蛋白表达的影响 | 第22-23页 |
| 2.7 统计学方法 | 第23-24页 |
| 第3章 结果 | 第24-36页 |
| 3.1 BMPR-II 高表达细胞株筛选 | 第24-25页 |
| 3.2 转染 | 第25-27页 |
| 3.2.1 转染效果 | 第25页 |
| 3.2.2 沉默 BMPR-II 基因对 HepG2 细胞 BMPR-II mRNA 和蛋白表达的影响 | 第25-27页 |
| 3.3 siRNA 抑制 BMPR-Ⅱ后对肝癌细胞生物活性的影响 | 第27-31页 |
| 3.3.1 对 HepG2 细胞贴壁生长和细胞形态的影响 | 第27-28页 |
| 3.3.2 对肝癌肝癌细胞生长增殖的影响 | 第28页 |
| 3.3.3 对肝癌细胞侵袭能力的影响 | 第28-29页 |
| 3.3.4 BMPR-II 基因沉默对肝癌细胞 HepG2 细胞凋亡的影响 | 第29-30页 |
| 3.3.5 BMPR-II 基因沉默对肝癌细胞 HepG2 细胞周期的影响 | 第30-31页 |
| 3.4 BMPR-II 的信号通路机制研究 | 第31-36页 |
| 3.4.1 沉默 BMPR-II 对 MAPKs 信号通路蛋白及 VEGF-C 蛋白表达的影响 | 第31-32页 |
| 3.4.2 抑制 MAPKs 各信号通路对 VEGF-C 蛋白表达的影响 | 第32页 |
| 3.4.3 特异性抑制剂抑制效果的验证 | 第32-33页 |
| 3.4.4 抑制 MAPKs 各信号通路后 VEGF-C 蛋白表达 | 第33-34页 |
| 3.4.5 沉默 BMPR-II，并且抑制 MAPKs 各信号通路对 VEGF-C 蛋白表达的影响 | 第34-36页 |
| 第4章 讨论 | 第36-40页 |
| 第6章 结论及展望 | 第40-42页 |
| 6.1 结论 | 第40页 |
| 6.2 展望 | 第40-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第46-47页 |
| 综述 | 第47-57页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
