| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 目录 | 第13-15页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 1 前言 | 第16-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-42页 |
| 2.1 材料 | 第19-29页 |
| 2.1.1 临床肝脏组织样本收集 | 第19页 |
| 2.1.2 实验所用细胞株 | 第19-20页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.1.4 引物 | 第20-21页 |
| 2.1.5 试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.7 主要试剂的配置 | 第23-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-42页 |
| 2.2.1 肝脏组织病理切片制作及阅片 | 第29-31页 |
| 2.2.2 免疫组化 | 第31-33页 |
| 2.2.3 qRT-PCR检测目的基因表达 | 第33-35页 |
| 2.2.4 蛋白免疫印迹(Western blot) | 第35-37页 |
| 2.2.5 miRNA表达水平检测 | 第37-38页 |
| 2.2.6 荧光素酶报告质粒的构建 | 第38-40页 |
| 2.2.7 Transwell细胞侵袭实验 | 第40-41页 |
| 2.2.8 统计分析方法 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-59页 |
| 3.1 MIR-217抑制肝癌细胞侵袭转移 | 第42-50页 |
| 3.1.1 不同肝癌细胞侵袭转移能力的测定 | 第42-44页 |
| 3.1.2 miR-217在不同侵袭转移能力的肝癌细胞系中的表达模式 | 第44-45页 |
| 3.1.3 miR-217在肝癌组织中的表达模式及其与临床病理特征的相关性 | 第45-47页 |
| 3.1.4 miR-217对肝癌细胞侵袭转移能力的影响 | 第47-50页 |
| 3.2 MIR-217直接靶向调节E2F3的表达 | 第50-55页 |
| 3.2.1 生物信息学预测miR-217可能调控的靶基因 | 第50-51页 |
| 3.2.2 miR-217与E2F3在不同肝癌细胞系中的表达模式的相关性 | 第51-52页 |
| 3.2.3 miR-217表达水平的变化对E2F3表达的影响 | 第52-53页 |
| 3.2.4 miR-217可直接靶向调控E2F3基因的表达 | 第53-55页 |
| 3.3 E2F3基因敲除可抑制肝癌细胞的侵袭转移能力 | 第55-59页 |
| 3.3.1 利用siRNA敲除E2F3基因可显著降低肝癌细胞的侵袭转移能力 | 第55-57页 |
| 3.3.2 肝癌组织样本中验证E2F3的表达与肝癌转移的相关性 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-75页 |
| 4.1 MICRORNA分子的发现及其研究进展 | 第59-62页 |
| 4.2 MICRORNA分子和肝癌的相关性 | 第62-66页 |
| 4.2.1 microRNA分子与肝癌致病因素的相关性 | 第62-63页 |
| 4.2.2 microRNA分子与肝癌细胞的凋亡及增殖密切相关 | 第63页 |
| 4.2.3 microRNA分子参与形成肝癌发生发展的信号网络 | 第63-64页 |
| 4.2.4 microRNA分子与肝癌转移密切相关 | 第64-65页 |
| 4.2.5 microRNA分子对肝癌诊断、化疗敏感性和预后的影响 | 第65-66页 |
| 4.3 MIR-217的表达水平与肝癌细胞侵袭转移能力密切相关 | 第66-69页 |
| 4.3.1 miR-217的表达水平与肝癌细胞侵袭能力呈负相关 | 第66-67页 |
| 4.3.2 miR-217在发生转移的肝癌组织中表达下调 | 第67-68页 |
| 4.3.3 功能缺失及功能获得实验证实miR-217负调控肝癌细胞侵袭能力 | 第68-69页 |
| 4.4 肝癌细胞中,E2F3是MIR-217直接调控的靶基因 | 第69-72页 |
| 4.5 E2F3基因与肝癌侵袭转移的相关性 | 第72-75页 |
| 5 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-85页 |
| 综述 | 第85-106页 |
| 参考文献 | 第95-106页 |
| 攻读博士学位期间的主要成果 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
