| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 赤拟谷盗危害及防治 | 第12页 |
| 1.2 热处理杀虫技术概述 | 第12-13页 |
| 1.3 高温对昆虫的影响 | 第13-14页 |
| 1.3.1 高温对昆虫生理的影响 | 第13页 |
| 1.3.2 高温对昆虫生长发育的影响 | 第13-14页 |
| 1.3.3 高温对昆虫生殖能力的影响 | 第14页 |
| 1.4 亚致死高温热胁迫对昆虫耐热性的影响 | 第14-15页 |
| 1.5 昆虫对亚致死高温胁迫的分子机制研究进展 | 第15-18页 |
| 1.5.1 昆虫体内糖类物质的累积 | 第15页 |
| 1.5.2 昆虫体内抗氧化系统 | 第15-16页 |
| 1.5.3 昆虫体内热激蛋白 | 第16-18页 |
| 1.6 高通量转录组测序技术在昆虫研究中的应用 | 第18页 |
| 1.7 RNAi技术的作用机制及应用 | 第18-20页 |
| 1.7.1 RNAi技术的作用机制 | 第18-20页 |
| 1.7.2 RNAi技术的应用 | 第20页 |
| 1.8 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 1.9 本文的总体研究思路、主要内容 | 第21-23页 |
| 第二章 亚致死高温胁迫对赤拟谷盗耐热性的影响 | 第23-27页 |
| 2.1 试验材料 | 第23页 |
| 2.1.1 试虫 | 第23页 |
| 2.1.2 试验仪器 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-24页 |
| 2.2.1 亚致死高温胁迫 | 第23-24页 |
| 2.2.2 赤拟谷盗死亡率测定 | 第24页 |
| 2.2.3 数据处理 | 第24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-25页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 赤拟谷盗在热胁迫下的转录组差异研究 | 第27-52页 |
| 3.1 试验材料 | 第27页 |
| 3.1.1 试虫 | 第27页 |
| 3.1.2 试验试剂及仪器 | 第27页 |
| 3.2 试验方法 | 第27-31页 |
| 3.2.1 赤拟谷盗虫体总RNA提取 | 第27-28页 |
| 3.2.2 cDNA文库的构建及测序 | 第28-29页 |
| 3.2.3 标准化信息分析流程 | 第29-30页 |
| 3.2.4 基因表达水平统计 | 第30-31页 |
| 3.2.5 差异表达分析 | 第31页 |
| 3.2.6 基因功能注释 | 第31页 |
| 3.2.7 数据统计分析 | 第31页 |
| 3.3 结果与分析 | 第31-49页 |
| 3.3.1 测序数据及质量控制 | 第31-32页 |
| 3.3.2 差异表达基因数目统计 | 第32-34页 |
| 3.3.3 差异表达基因功能注释统计 | 第34页 |
| 3.3.4 赤拟谷盗热胁迫后转录组功能注释分析 | 第34-41页 |
| 3.3.5 赤拟谷盗三种虫态与耐热相关基因 | 第41-49页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第49-52页 |
| 第四章 赤拟谷盗转录组测序结果验证 | 第52-65页 |
| 4.1 试验材料 | 第52-53页 |
| 4.1.1 试虫 | 第52页 |
| 4.1.2 试验试剂及仪器 | 第52-53页 |
| 4.2 试验方法 | 第53-56页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第53-54页 |
| 4.2.2 RNA提取 | 第54页 |
| 4.2.3 RNA反转录cDNA | 第54-55页 |
| 4.2.4 Real-timePCR检测 | 第55-56页 |
| 4.2.5 数据分析 | 第56页 |
| 4.3 结果与分析 | 第56-64页 |
| 4.3.1 RNA样品质量控制 | 第56-58页 |
| 4.3.2 赤拟谷盗热逆境下耐热相关基因实时荧光定量PCR分析 | 第58-60页 |
| 4.3.3 转录组数据DEGs的RT-qPCR检测 | 第60-64页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第64-65页 |
| 第五章 赤拟谷盗耐热相关基因的功能验证 | 第65-76页 |
| 5.1 试验材料 | 第65页 |
| 5.1.1 试虫 | 第65页 |
| 5.1.2 试验试剂及仪器 | 第65页 |
| 5.2 试验方法 | 第65-70页 |
| 5.2.1 总RNA提取 | 第65页 |
| 5.2.2 cDNA合成 | 第65-66页 |
| 5.2.3 目的基因PCR扩增 | 第66-67页 |
| 5.2.4 PCR产物回收 | 第67-68页 |
| 5.2.5 体外转录合成dsRNA | 第68-69页 |
| 5.2.6 dsRNA注射 | 第69-70页 |
| 5.2.7 赤拟谷盗经历热胁迫后耐热性的变化 | 第70页 |
| 5.2.8 赤拟谷盗死亡率判定 | 第70页 |
| 5.3 结果与分析 | 第70-74页 |
| 5.3.1 dsRNA的合成 | 第70-71页 |
| 5.3.2 dsRNA介导的HSP68a、LOC656546基因沉默对赤拟谷盗幼虫36℃胁迫后耐热性的影响 | 第71-72页 |
| 5.3.3 dsRNA介导的HSP68a、LOC656546基因沉默对赤拟谷盗幼虫42℃胁迫后耐热性的影响 | 第72页 |
| 5.3.4 dsRNA介导的HSP68a、LOC656546基因沉默对赤拟谷盗蛹36℃胁迫后耐热性的影响 | 第72-73页 |
| 5.3.5 dsRNA介导的HSP68a、LOC656546基因沉默对赤拟谷盗蛹42℃胁迫后耐热性的影响 | 第73-74页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第74-76页 |
| 结论与展望 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 附表 | 第88-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 作者简介、攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第114页 |
