摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-19页 |
1.1 SWEETs基因家族研究进展 | 第11-15页 |
1.1.1 SWEETs蛋白的发现 | 第11页 |
1.1.2 植物SWEET蛋白的结构特征 | 第11-12页 |
1.1.3 植物SWEET蛋白的功能 | 第12-15页 |
1.2 高等植物启动子功能的研究进展 | 第15-18页 |
1.2.1 植物启动子的结构特征 | 第15-16页 |
1.2.2 高等植物启动子类型 | 第16页 |
1.2.3 高等植物启动子研究方法 | 第16-18页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-30页 |
2.1 试验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 植物材料与培养 | 第19页 |
2.1.2 菌株及载体 | 第19页 |
2.1.3 主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第20页 |
2.1.5 试剂配制 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-30页 |
2.2.1 引物设计 | 第21-23页 |
2.2.2 基因组DNA的提取 | 第23页 |
2.2.3 PCR扩增目的片段 | 第23-24页 |
2.2.4 DNA片段的回收 | 第24页 |
2.2.5 启动子的GUS表达载体构建 | 第24-25页 |
2.2.6 GFP载体构建 | 第25-27页 |
2.2.7 GUS组织化学染色分析 | 第27-29页 |
2.2.8 洋葱表皮细胞的瞬时表达 | 第29页 |
2.2.9 烟草叶片的瞬时表达 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-49页 |
3.1 番茄果实4个SWEETs基因启动子的序列分析 | 第30-34页 |
3.2 启动子GUS表达载体的构建 | 第34-39页 |
3.2.1 番茄DNA提取与检测 | 第34-35页 |
3.2.2 启动子片段的克隆 | 第35-36页 |
3.2.3 启动子GUS表达载体的构建 | 第36-39页 |
3.3 SlSWEET7a,-11b,-12c及-14基因的GFP融合表达载体的构建 | 第39-41页 |
3.3.1 SlSWEET7a,-11b,-12c及-14基因cDNA全长的获得 | 第39-40页 |
3.3.2 GFP载体构建 | 第40-41页 |
3.4 番茄果实的瞬时表达 | 第41-42页 |
3.5 启动子GUS表达载体在拟南芥中的遗传转化与转基因材料的鉴定 | 第42-46页 |
3.5.1 拟南芥抗性植株的筛选 | 第42-43页 |
3.5.2 转基因拟南芥GUS组织化学染色分析 | 第43-46页 |
3.6 SlSWEET7a,-11b,-12c及-14在洋葱表皮细胞的亚细胞定位分析 | 第46-47页 |
3.7 SlSWEET7a,-11b,-12c,-14在烟草叶片的亚细胞定位分析 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-51页 |
4.1 番茄4个SWEETs基因的组织分布与亚细胞定位特征 | 第49页 |
4.2 SlSWEET7a和SlSWEET14启动子截短对基因表达组织分布的影响 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录 | 第58-61页 |
致谢 | 第61-62页 |