| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 绪论 | 第13-19页 |
| 1.1 蛋白错误折叠与ERAD | 第13-14页 |
| 1.2 ERAD 的机制 | 第14-15页 |
| 1.3 自噬 | 第15-17页 |
| 1.4 蛋白质泛素化与泛素化蛋白识别 | 第17-19页 |
| 第2章 泛素连接酶RNF167 性质鉴定 | 第19-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-21页 |
| 2.1.1 质粒构建与定点突变 | 第19页 |
| 2.1.2 细胞培养与转染 | 第19-20页 |
| 2.1.3 PNGase F 处理 | 第20页 |
| 2.1.4 CHX chase | 第20页 |
| 2.1.5 HaloTag Chase | 第20页 |
| 2.1.6 免疫染色 | 第20页 |
| 2.1.7 免疫印迹 | 第20-21页 |
| 2.1.8 免疫沉淀 | 第21页 |
| 2.2 实验结果 | 第21-37页 |
| 2.2.1 RNF167 的细胞定位及在小鼠各器官的表达水平 | 第21-22页 |
| 2.2.2 RNF167 与各种突变体的性质鉴定 | 第22-27页 |
| 2.2.3 RNF167 与CFTRΔF508 有共同定位 | 第27-29页 |
| 2.2.4 RNF167 促进CFTRΔF508 降解 | 第29-31页 |
| 2.2.5 RNF167 过表达对两种ERAD 底物CD3Δ和NHK 的影响 | 第31-34页 |
| 2.2.6 RNF167 与CFTRΔF508, gp78 和其他ERAD组分的相互作用 | 第34-37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-38页 |
| 本章小结 | 第38-39页 |
| 第3章 SVIP 调节自噬 | 第39-62页 |
| 3.1 材料与方法 | 第39-40页 |
| 3.1.1 试剂 | 第39页 |
| 3.1.2 细胞培养与转染 | 第39页 |
| 3.1.3 免疫染色 | 第39-40页 |
| 3.1.4 免疫印迹 | 第40页 |
| 3.1.5 RT-PCR | 第40页 |
| 3.2 实验结果 | 第40-59页 |
| 3.2.1 SVIP 在中枢神经系统有高表达 | 第40-42页 |
| 3.2.2 SVIP 使 VCP 定位于细胞膜和细胞内的颗粒或囊泡结构（intracellular foci and vacuoles）上 | 第42-43页 |
| 3.2.3 SVIP 使 VCP 与 LC3 和 Lamp1 共同定位于细胞核周边的溶酶体 | 第43-46页 |
| 3.2.4 SVIP 调节自噬 | 第46-47页 |
| 3.2.5 SVIP 促进LC3 酯化并诱导自噬 | 第47-50页 |
| 3.2.6 SVIP 调节p62 表达并改变p62 在细胞中分布 | 第50-52页 |
| 3.2.7 SVIP 增强了饥饿诱导的自噬（starvation-induced autophagy） | 第52-55页 |
| 3.2.8 VCP knockdown使p62水平降低，SVIP调节自噬依赖于VCP | 第55-59页 |
| 3.3 讨论 | 第59-61页 |
| 本章小结 | 第61-62页 |
| 第4章 活细胞K48 泛素链成像 | 第62-78页 |
| 4.1 材料与方法 | 第62-64页 |
| 4.1.1 质粒与抗体 | 第62页 |
| 4.1.2 细胞培养与转染 | 第62页 |
| 4.1.3 显微镜观察及成像分析 | 第62-64页 |
| 4.2 实验结果 | 第64-73页 |
| 4.2.1 UCS 特异性识别K48 泛素链 | 第64-65页 |
| 4.2.2 UCS 与K63 泛素链聚集的p62 体没有共同定位 | 第65-67页 |
| 4.2.3 UCS 实时检测蛋白酶体抑制剂和ER 压力对活细胞中K48 泛素链的影响 | 第67-70页 |
| 4.2.4 UCS 用于检测Parkin 催化的线粒体外膜蛋白的泛素化 | 第70-73页 |
| 4.3 讨论 | 第73-75页 |
| 4.4 附图 | 第75-77页 |
| 本章小结 | 第77-78页 |
| 全文结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 博士期间发表的学术论文 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
