| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 引言和文献综述 | 第11-23页 |
| 引言 | 第11页 |
| 1.1 果蝇的血液发育 | 第11-19页 |
| 1.1.1 果蝇血细胞来源 | 第12-13页 |
| 1.1.2 血液前体细胞种类 | 第13-14页 |
| 1.1.3 血液发育相关基因 | 第14-15页 |
| 1.1.4 血细胞生成相关信号途径 | 第15-19页 |
| 1.2 锌指蛋白转录因子在血液发育中的调控作用 | 第19-21页 |
| 1.2.1 锌指蛋白家族 | 第19-20页 |
| 1.2.2 血液发育过程中锌指蛋白转录因子的功能 | 第20-21页 |
| 1.3 本文研究意义 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-40页 |
| 2.1 材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 生物信息学软件 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.3 质粒、细胞和菌株 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要实验仪器和耗材 | 第26-27页 |
| 2.2 方法 | 第27-40页 |
| 2.2.1 CG8419、CG9090、mrj基因的生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2.2 引物设计与合成 | 第27-29页 |
| 2.2.3 PCR扩增 | 第29-30页 |
| 2.2.4 PCR产物纯化回收 | 第30-31页 |
| 2.2.5 载体连接实验 | 第31页 |
| 2.2.6 感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| 2.2.7 连接产物的转化 | 第32页 |
| 2.2.8 质粒的小量制备 | 第32-33页 |
| 2.2.9 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.10 测序 | 第34页 |
| 2.2.11 重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.12 常规细胞培养及转染 | 第35-36页 |
| 2.2.13 细胞总RNA提取 | 第36-37页 |
| 2.2.14 反转录 | 第37页 |
| 2.2.15 荧光定量PCR | 第37-38页 |
| 2.2.16 统计学分析 | 第38页 |
| 2.2.17 细胞总蛋白的提取 | 第38页 |
| 2.2.18 Western blot | 第38页 |
| 2.2.19 免疫共沉淀 | 第38-40页 |
| 第三章 实验结果及其分析 | 第40-81页 |
| 3.1 果蝇CG8419基因的生物信息学分析、载体构建及初步表达分析 | 第40-51页 |
| 3.1.1 果蝇CG8419生物信息学分析 | 第40页 |
| 3.1.2 CG8419基因亚克隆及载体构建 | 第40-47页 |
| 3.1.3 Real-Time PCR验证CG8419及亚克隆片段表达 | 第47-50页 |
| 3.1.4 western blot验证CG8419及亚克隆片段表达 | 第50-51页 |
| 3.2 果蝇CG9090基因的生物信息学分析、载体构建及初步表达分析 | 第51-59页 |
| 3.2.1 果蝇CG9090生物信息学分析 | 第51页 |
| 3.2.2 CG9090基因亚克隆及载体构建 | 第51-55页 |
| 3.2.3 Real-Time PCR验证CG9090及亚克隆片段表达 | 第55-58页 |
| 3.2.4 western blot验证CG9090及亚克隆片段表达 | 第58-59页 |
| 3.3 果蝇mrj基因的生物信息学分析、载体构建及初步表达分析 | 第59-65页 |
| 3.3.1 果蝇mrj生物信息学分析 | 第59页 |
| 3.3.2 mrj基因及其亚克隆片段载体构建 | 第59-62页 |
| 3.3.3 Real-Time PCR验证mrj表达 | 第62-65页 |
| 3.3.4 western blot验证mrj及亚克隆片段表达 | 第65页 |
| 3.4 免疫共沉淀验证果蝇CG8419与果蝇CG9090相互作用 | 第65-73页 |
| 3.4.1 果蝇CG8419与果蝇CG9090存在相互作用 | 第65-67页 |
| 3.4.2 果蝇CG8491主要通过B-BOX结构域与果蝇CG909O发生相互作 用 | 第67-71页 |
| 3.4.3 果蝇CG9090通过Pfam:Mito_carr结构域与果蝇CG8419发生相互作用 | 第71-73页 |
| 3.5 免疫共沉淀验证果蝇CG8419与果蝇mrj相互作用 | 第73-77页 |
| 3.5.1 果蝇CG8419与果蝇mrj存在相互作用 | 第73-74页 |
| 3.5.2 果蝇CG8419主要通过B-BOX结构域与果蝇mrj发生相互作用 | 第74-76页 |
| 3.5.3 果蝇mrj通过DnaJ结构域与果蝇CG8419发生相互作用 | 第76-77页 |
| 3.6 讨论 | 第77-81页 |
| 结语 | 第81-83页 |
| 第四章 其它工作 | 第83-90页 |
| 4.1 斑马鱼ANF基因背景资料介绍 | 第83页 |
| 4.2 ANF基因克隆至表达载体 | 第83-85页 |
| 4.3 ANF融合蛋白诱导表达及纯化 | 第85-86页 |
| 4.4 ANF多克隆抗体效价检测 | 第86页 |
| 4.5 ANF多克隆抗体特异性检测 | 第86-87页 |
| 4.6 western blot检测ANF组织表达 | 第87-88页 |
| 4.7 讨论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-97页 |
| 附录 | 第97-99页 |
| 后记 | 第99-100页 |
