缩略语表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
前言 | 第15-17页 |
文献回顾 | 第17-39页 |
正文 | 第39-87页 |
实验一 雌激素促进肺癌骨转移的发生 | 第39-57页 |
前言 | 第39-40页 |
1 材料 | 第40-42页 |
1.1 细胞株 | 第40页 |
1.2 组织标本 | 第40页 |
1.3 主要仪器 | 第40-42页 |
2 方法 | 第42-47页 |
2.1 临床标本获取 | 第42页 |
2.2 免疫组织化学 | 第42-43页 |
2.3 细胞培养 | 第43页 |
2.4 体外侵袭实验 | 第43-44页 |
2.5 体内实验 | 第44-45页 |
2.6 ELISA检测PTHrP的表达 | 第45-46页 |
2.7 统计学分析 | 第46-47页 |
3 结果 | 第47-54页 |
3.1 雌激素在肺癌骨转移组织中的表达 | 第47-49页 |
3.2 雌激素促进肺癌侵袭能力的增加 | 第49页 |
3.3 雌激素促进肺癌骨转移的体内试验研究 | 第49-50页 |
3.4 ELISA检测雌激素对骨相关分子的影响 | 第50-51页 |
3.5 雌激素受体拮抗剂ICI能够抑制肺癌细胞侵袭能力的增加 | 第51-52页 |
3.6 雌激素受体ICI能够降低雌激素诱导的肺癌骨转移的发生 | 第52-53页 |
3.7 ELISA检测雌激素受体拮抗剂对雌激素诱导的骨相关分子的影响 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
实验二 雌激素促进肺癌细胞EMT的发生 | 第57-70页 |
前言 | 第57-58页 |
1 材料 | 第58-59页 |
1.1 细胞株 | 第58页 |
1.2 主要仪器 | 第58页 |
1.3 主要试剂及抗体 | 第58-59页 |
2 方法 | 第59-65页 |
2.1 细胞培养 | 第59页 |
2.2 细胞形态学观察 | 第59页 |
2.3 质粒的提取 | 第59-60页 |
2.4 Western Blot方法检测目的蛋白在肺癌细胞中的表达 | 第60-63页 |
2.5 RT-PCR | 第63-65页 |
2.6 统计学分析 | 第65页 |
3 结果 | 第65-68页 |
3.1 雌激素促进肺癌细胞EMT发生的形态学改变 | 第65-66页 |
3.2 Western blot检测雌激素对上皮及间质标记物的表达的影响 | 第66页 |
3.3 雌激素受体拮抗剂ICI 逆转EMT发生的形态学改变 | 第66-67页 |
3.4 Western blot检测雌激素受体拮抗剂对雌激素诱导的EMT的影响 | 第67-68页 |
4 讨论 | 第68-70页 |
实验三 雌激素促进EMT及肺癌骨转移发生的机制研究 | 第70-87页 |
前言 | 第70页 |
1 材料 | 第70-71页 |
1.1 细胞株 | 第70-71页 |
1.2 主要仪器 | 第71页 |
1.3 主要试剂及抗体 | 第71页 |
2 方法 | 第71-78页 |
2.1 RT-PCR | 第71-73页 |
2.2 细胞形态学观察 | 第73页 |
2.3 细细胞总蛋白样品制备 | 第73页 |
2.4 Western Blot方法检测目的蛋白在肺癌细胞中的表达 | 第73页 |
2.5 构建ZEB-1 小干扰RNA的慢病毒载体 | 第73-74页 |
2.6 慢病毒包装载体和细胞感染 | 第74-76页 |
2.7 体内实验 | 第76-77页 |
2.8 ELISA检测PTHrP的表达 | 第77-78页 |
2.9 统计学分析 | 第78页 |
3 结果 | 第78-85页 |
3.1 RT-PCR筛选雌激素促进EMT发生的转录因子 | 第78-79页 |
3.2 Western blot检测雌激素对ZEB-1 表达的影响 | 第79-80页 |
3.3 雌激素受体拮抗剂ICI对雌激素诱导的ZEB-1 表达的影响 | 第80页 |
3.4 沉默ZEB-1 的表达,对雌激素诱导的EMT的影响 | 第80-83页 |
3.5 沉默ZEB-1 的表达,对雌激素诱导的肺癌骨转移的影响 | 第83-85页 |
4 讨论 | 第85-87页 |
小结 | 第87-90页 |
参考文献 | 第90-102页 |
个人简历和研究成果 | 第102-104页 |
致谢 | 第104-105页 |