摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
缩写词 | 第11-12页 |
1. 前言 | 第12-20页 |
·ABA 感受、信号转导和生物学功能 | 第12-14页 |
·ABA 应答的转录调控 | 第14-15页 |
·DREB 转录因子 | 第15-17页 |
·DREB2 转录因子在 ABA 应答的转录调控中的作用 | 第17-20页 |
2 研究意义 | 第20-21页 |
3 材料与方法 | 第21-30页 |
·实验材料 | 第21页 |
·植物材料 | 第21页 |
·质粒载体和菌株 | 第21页 |
·实验试剂 | 第21页 |
·实验常用溶液 | 第21-22页 |
·抗生素 | 第22页 |
·培养基 | 第22-23页 |
·实验所用的引物 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-30页 |
·拟南芥种植方法 | 第23-24页 |
·总 RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第24页 |
·实时定量 PCR 检测基因表达 | 第24-25页 |
·半定量 RT-PCR 检测基因表达 | 第25页 |
·表皮条生物学分析 | 第25页 |
·测定植株失水率 | 第25页 |
·远红外热图分析叶面温度实验 | 第25-26页 |
·ABA 和 H_2O_2对拟南芥种子萌发及幼苗生长的影响 | 第26页 |
·重组质粒载体的构建 | 第26-27页 |
·PCR 产物的回收和纯化 | 第27页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第28页 |
·重组质粒的鉴定 | 第28页 |
·农杆菌介导的植株转化 | 第28页 |
·拟南芥转基因超表达植株的筛选 | 第28-29页 |
·DREB2E-RNAi 阳性植株的筛选 | 第29页 |
·β-葡糖苷酸酶(GUS)的组织化学鉴定 | 第29-30页 |
4 实验结果与分析 | 第30-48页 |
·DREB2E-OE 转基因植株和 RNAi 转基因植株的鉴定 | 第30-32页 |
·DREB2E-OE 转基因植株中 DREB2E 基因水平表达的检测 | 第30页 |
·DREB2E-RNAi 转基因植株的筛选和鉴定 | 第30-31页 |
·DREB2E 基因关于 ABA 和 H_2O_2浓度时间依赖性检测 | 第31-32页 |
·DREB2E-OE 转基因植株和 RNAi 转基因植株的表型分析 | 第32-45页 |
·ABA 和 H_2O_2对超表达植株和 RNAi 植株气孔开度的影响 | 第32-33页 |
·超表达植株和 RNAi 植株与 WT 失水率的测定 | 第33-34页 |
·超表达植株和 RNAi 植株与 WT 远红外分析 | 第34-35页 |
·ABA 对超表达植株和 RNAi 植株幼苗及根生长的影响 | 第35-37页 |
·H_2O_2对超表达植株和 RNAi 植株幼苗及根生长的影响 | 第37-40页 |
·NaCl 对超表达植株和 RNAi 植株幼苗及根生长的影响 | 第40-42页 |
·甘露醇对超表达植株和 RNAi 植株幼苗及根生长的影响 | 第42-45页 |
·GUS 染色检测 DREB2E 基因表达的组织特异性 | 第45页 |
·DREB2E 关于 ABA 相关基因的半定量 PCR 检测 | 第45-46页 |
·RD29B 基因对于 ABA 和 H_2O_2浓度时间依赖性的检测 | 第46-48页 |
5 讨论 | 第48-50页 |
·DREB2E 基因参与拟南芥对于多种非生物胁迫的应答过程 | 第48-49页 |
·DREB2E 基因与 RD29B 基因发生协同作用 | 第49页 |
·DREB2E 基因在拟南芥植株中普遍表达 | 第49-50页 |
6 结论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
致谢 | 第58-59页 |