| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 中英文缩略词表 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 第1章 肾细胞癌组织和细胞中Rock2的表达及其与临床病理特点之间的关系 | 第18-37页 |
| 引言 | 第18-19页 |
| 材料和方法 | 第19-31页 |
| 1.材料 | 第19-23页 |
| 2.细胞培养 | 第23-25页 |
| 3.免疫组织化学（IHC） | 第25-26页 |
| 4 蛋白免疫印迹反应（Western blot） | 第26-29页 |
| 5 RNA的提取及聚合酶链反应（PCR） | 第29-30页 |
| 6 统计学分析 | 第30-31页 |
| 结果 | 第31-35页 |
| 1.检测肾癌及癌旁组织中ROCK2的表达 | 第31-33页 |
| 2.Rock2的表达与肾癌患者临床病理特征及患者生存率之间的关系 | 第33-35页 |
| 3.正常肾小管上皮细胞株HK-2 和肾癌细胞株中ROCK2的表达情况 | 第35页 |
| 讨论 | 第35-36页 |
| 结论 | 第36-37页 |
| 第2章 Rock2通过调控SCARA5的表达影响肾癌细胞增殖 | 第37-88页 |
| 引言 | 第37-38页 |
| 第一节 联合体内、体外实验证实ROCK2的表达降低后会抑制肾癌细胞的增殖 | 第38-60页 |
| 1.材料 | 第38-43页 |
| 2 细胞培养 | 第43-45页 |
| 3. shRock2质粒的构建 | 第45-53页 |
| 4.平板克隆形成实验步骤 | 第53-54页 |
| 5.EDU实验步骤 | 第54页 |
| 6.构建稳定转染肾癌细胞系 | 第54-55页 |
| 7.动物实验 | 第55-56页 |
| 8.统计学分析 | 第56页 |
| 结果 | 第56-60页 |
| 1.筛选最佳Rock2稳转干扰质粒 | 第56-57页 |
| 2.降低肾癌细胞中Rock2的表达，观察肾癌细胞增殖的变化 | 第57-58页 |
| 3.体内动物实验研究干扰Rock2表达对肾癌细胞增殖能力的影响 | 第58-60页 |
| 第二节 ROCK2通过调节SCARA5表达来抑制肾癌细胞的增殖 | 第60-76页 |
| 材料与方法 | 第60-72页 |
| 1.材料 | 第60-64页 |
| 2 细胞培养 | 第64页 |
| 3.shRock2质粒的构建 | 第64-65页 |
| 4.pcDNA3.1（+）-Rock2重组质粒的构建 | 第65-71页 |
| 5.肾癌稳转细胞系构建 | 第71-72页 |
| 6. 统计学分析 | 第72页 |
| 结果 | 第72-76页 |
| 1.筛选最佳过表达pcDNA3.1（+）-Rock2过表达质粒，见图 5 | 第72-73页 |
| 2.改变肾癌细胞中Rock2的表达，观察SCARA5的表达变化 | 第73-75页 |
| 3.检测体内动物实验中裸鼠臀下注射肾癌细胞 786-O及sh Rock2转染的786-O细胞成瘤后肿块中ROCK2、SCARA5的表达情况 | 第75-76页 |
| 第三节 SCARA5在ROCK2介导的肾癌细胞生长中起重要作用 | 第76-86页 |
| 1 材料 | 第76页 |
| 2 细胞培养 | 第76-77页 |
| 3.shSCARA5质粒的构建 | 第77-80页 |
| 4.pcDNA3.1（+）- SCARA5重组质粒的构建 | 第80-82页 |
| 5.平板克隆形成实验步骤 | 第82页 |
| 6.EDU实验步骤 | 第82-83页 |
| 7.统计学分析 | 第83页 |
| 结果 | 第83-86页 |
| 1.筛选最佳SCARA5干扰质粒 | 第83-84页 |
| 2.pcDNA3.1-（+）-SCARA5质粒的表达 | 第84页 |
| 3.SCARA5是Rock2介导的肾癌细胞增殖的关键分子 | 第84-86页 |
| 讨论 | 第86-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 第三章 Rock2调控SCARA5表达的机制研究 | 第88-112页 |
| 引言 | 第88-99页 |
| 1 材料 | 第88-90页 |
| 2 细胞培养 | 第90页 |
| 3. shTCF4、shβ-catenin质粒的构建 | 第90-92页 |
| 4. pcDNA3.1（+）-TCF4及pc DNA3.1（+）-β-catenin重组质粒的构建 | 第92-94页 |
| 5、报告基因实验 | 第94-97页 |
| 6.蛋白质免疫共沉淀（CO-IP） | 第97-99页 |
| 7.统计学分析 | 第99页 |
| 结果 | 第99页 |
| 第一节 ROCK2通过影响 β-catenin调控SCARA5的表达从而影响肾癌细胞的生长 | 第99-104页 |
| 1.筛选 β-catenin最佳干扰质粒 | 第99-100页 |
| 2.pc DNA3.1-（+）-β-catenin质粒的表达 | 第100-101页 |
| 3.ROCK2通过作用SCARA5调节肾癌细胞增殖过程中与SCARA5不直接结合 | 第101页 |
| 4.ROCK2通过 β-catenin调控SCARA5的表达 | 第101-104页 |
| 第二节 ROCK2通过 β-catenin/TCF4轴调控SCARA5从而影响肾癌细胞生长 | 第104-110页 |
| 1.TCF4最佳干扰质粒的筛选 | 第104-105页 |
| 2.pc DNA3.1-（+）-TCF4质粒的表达 | 第105-106页 |
| 3.Rock2通过 β-catenin/TCF4轴调控SCARA5的表达 | 第106-110页 |
| 讨论 | 第110-111页 |
| 结论 | 第111-112页 |
| 全文总结 | 第112-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-120页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第120-121页 |
| 综述 | 第121-128页 |
| 参考文献 | 第125-128页 |
