| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 上篇 文献综述 | 第11-26页 |
| 第一章 产酶溶杆菌的研究进展 | 第12-22页 |
| 1 产酶溶杆菌的分类地位 | 第12-14页 |
| 2 产酶溶杆菌的生物学特征 | 第14-15页 |
| 3 产酶溶杆菌在植物病害防治中的应用 | 第15-16页 |
| 4 产酶溶杆菌对植物病害的生防机制 | 第16-22页 |
| 4.1 胞外酶 | 第17页 |
| 4.2 热稳定抗真菌因子HSAF(Heat-Stable Antifungal Factor) | 第17-19页 |
| 4.3 滑行能力(Twitching motility,TM) | 第19-22页 |
| 第二章 Sigma(σ)家族基因的研究进展 | 第22-26页 |
| 1 σ家族基因的主要功能 | 第22-23页 |
| 2 σ家族基因的主要分类 | 第23-26页 |
| 下篇 研究内容 | 第26-76页 |
| 第一章 产酶溶杆菌sigma因子的鉴定及功能研究 | 第28-76页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第31-41页 |
| 1.1 实验所用菌株、质粒及其培养条件 | 第31-35页 |
| 1.2 引物设计 | 第35-40页 |
| 1.3 试验中所用培养基 | 第40页 |
| 1.4 酶、抗生素、试剂盒和化学试剂 | 第40-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-57页 |
| 2.1 DNA操作方法和体系 | 第41-44页 |
| 2.2 产酶溶杆菌sigma家族相关基因克隆和序列分析 | 第44页 |
| 2.3 产酶溶杆菌sigma家族相关基因突变体构建 | 第44页 |
| 2.4 连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第44-45页 |
| 2.5 重组载体的验证 | 第45页 |
| 2.6 质粒的提取与双酶切验证 | 第45-46页 |
| 2.7 产酶溶杆菌OH11电转感受态的制备以及突变体的筛选 | 第46-48页 |
| 2.8 互补和过表达菌株的构建 | 第48页 |
| 2.9 HSAF的提取、HPLC检测 | 第48-49页 |
| 2.10 Twitching Motility检测 | 第49页 |
| 2.11 菌落形态的观察 | 第49页 |
| 2.12 电镜显微镜对菌毛的观察 | 第49页 |
| 2.13 Twitching Motility组装关键基因pilA表达量的实时定量PCR | 第49-52页 |
| 2.14 凝胶阻滞实验 | 第52-56页 |
| 2.15 细菌单杂交(Bacterial one-hybrid)系统 | 第56-57页 |
| 2.16 生物信息学预测 | 第57页 |
| 2.17 数据分析 | 第57页 |
| 3 结果分析 | 第57-73页 |
| 3.1 产酶溶杆菌含有28个σ因子 | 第57-59页 |
| 3.2 σ因子敲除突变体的构建 | 第59-63页 |
| 3.3 σ因子不参与HSAF的生物合成 | 第63-64页 |
| 3.4 RpoN调控Twitching motility(TM) | 第64-65页 |
| 3.5 部分sigma因子影响菌落形态的形成 | 第65页 |
| 3.6 rpoN可互补△rpoN的表型改变 | 第65-66页 |
| 3.7 RpoN在产酶溶杆菌C3菌株中也参与调控TM | 第66-67页 |
| 3.8 RpoN控制T4P的形成 | 第67-68页 |
| 3.9 RopN控制pilA的转录 | 第68-69页 |
| 3.10 细菌单杂交实验结果 | 第69-70页 |
| 3.11 电泳迁移率实验(EMSA)结果 | 第70-71页 |
| 3.12 RpoN直接调控子的生物信息学鉴定 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
