| 个人简历 | 第3-7页 |
| 摘要 | 第7-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一部分：抗人胃癌干细胞功能性单抗的筛选 | 第17-45页 |
| 一、实验材料与方法 | 第17-26页 |
| 二、研究设计与技术路线 | 第26-27页 |
| 三、实验结果 | 第27-44页 |
| (一) 人胃癌干细胞细胞系模型的筛选 | 第27-31页 |
| 1. 4种人胃癌细胞系无血清培养成球率分析 | 第27页 |
| 2. 流式细胞术检测胃癌干细胞标志物 | 第27-29页 |
| 3 PKH26染色确认人胃癌细胞系中存在肿瘤干细胞 | 第29-31页 |
| (二) 人胃癌单抗库的制备及筛选 | 第31-44页 |
| 1 人胃癌单抗库的制备 | 第31页 |
| 2 人胃癌单抗库的初筛 | 第31-32页 |
| 2.1 SNU-5活细胞ELISA筛选胃癌细胞阳性单抗 | 第31页 |
| 2.2 BGC-823活细胞ELISA筛选胃癌细胞阳性单抗 | 第31-32页 |
| 3 人胃癌干细胞阳性单抗的筛选 | 第32-33页 |
| 3.1 Sphere细胞筛选胃癌干细胞单抗 | 第32页 |
| 3.2 成球抑制实验筛选胃癌干细胞功能性单抗 | 第32-33页 |
| 4 10株胃癌干细胞功能性单抗的进一步鉴定 | 第33-44页 |
| 4.1 10株单抗类和亚类及分泌表达量的测定 | 第33-34页 |
| 4.2 活细胞ELISA检测10株单抗与胃癌细胞系中结合反应 | 第34-35页 |
| 4.3 流式检测单抗阳性细胞在SNU-5Sphere细胞中富集 | 第35-36页 |
| 4.4 流式检测单抗阳性细胞BGC-823Sphere细胞中富集 | 第36-38页 |
| 4.5 10株单抗与胃癌干细胞标志物CD90的共染分析 | 第38-40页 |
| 4.6 10株单抗与胃癌干细胞标志物CD44共染分析 | 第40-41页 |
| 4.7 10株单抗对胃癌干细胞成球生长的抑制作用 | 第41-43页 |
| 4.8 WB分析10株单抗与胃癌干细胞中抗原结合的特异性 | 第43-44页 |
| 第一部分小结 | 第44-45页 |
| 第二部分：抗人胃癌干细胞单抗25G5的研究 | 第45-76页 |
| 一、实验材料与方法 | 第45-57页 |
| 二、研究设计与技术路线 | 第57-58页 |
| 三、实验结果 | 第58-75页 |
| (一) 25G5单抗杂交瘤的培养及抗体纯化 | 第58-59页 |
| 1 单抗杂交瘤细胞的无血清扩大培养及上清收集 | 第58页 |
| 2 25G5单抗的纯化、纯度及活性鉴定 | 第58-59页 |
| (二) 25G5单抗识别细胞的肿瘤干细胞特性的鉴定 | 第59-65页 |
| 1 25G5单抗与标志物在胃癌干细胞膜上共定位分析 | 第59-60页 |
| 2 25G5单抗识别的阳性细胞具有肿瘤噶细胞自我更新能力 | 第60-62页 |
| 3 25G5单抗识别的阳性细胞具有更强的侵袭能力 | 第62-63页 |
| 4 25G5单抗识别的阳性细胞具有肿瘤干细胞高耐药性特征 | 第63-64页 |
| 5 25G5单抗识别的阳性细胞具有在体内的高致瘤性特征 | 第64-65页 |
| (三) 单抗25G5体外功能的研究 | 第65-70页 |
| 1 单抗25G5对胃癌干细胞自我更新能力的影响 | 第65-66页 |
| 2 单抗25G5对胃癌干细胞细胞侵袭能力的影响 | 第66-68页 |
| 3 单抗25G5降低胃癌干细胞对顺铂化疗药的耐药性 | 第68-70页 |
| (四) 单抗25G5靶向胃癌干细胞治疗胃癌的动物体内试验研究 | 第70-75页 |
| 1 靶向胃癌干细胞治疗胃癌体内试验动物模型的研究 | 第70-74页 |
| 1.1 流式细胞术检测SNU-5-V13中25G5~+干细胞的存在 | 第70-71页 |
| 1.2 单抗25G5对SNU-5-V13体外自我更新能力的影响 | 第71-72页 |
| 1.3 SNU-5-V13细胞系裸鼠移植瘤模型的建立 | 第72-74页 |
| 2 单抗25G5靶向胃癌干细胞治疗胃癌的动物体内试验 | 第74-75页 |
| 第二部分小结 | 第75-76页 |
| 讨论 | 第76-80页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 中英文缩略表 | 第83-84页 |
| 综述 | 第84-91页 |
| 参考文献 | 第88-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第93页 |
