| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 符号说明 | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-28页 |
| 1.1 肥胖流行程度的严重性 | 第14页 |
| 1.2 与肥胖发生相关的假说 | 第14-19页 |
| 1.2.1 肠道微生物与肥胖 | 第14-15页 |
| 1.2.2 环境与肥胖的关系 | 第15-17页 |
| 1.2.3 遗传与肥胖的关系 | 第17-18页 |
| 1.2.4 能量稳态与肥胖 | 第18-19页 |
| 1.3 能量稳态存在的疑问 | 第19-22页 |
| 1.3.1 瘦素抵抗 | 第19-20页 |
| 1.3.2 能量消耗数据疑问 | 第20-21页 |
| 1.3.3 能量消耗作用被夸大 | 第21-22页 |
| 1.4 Rcan2基因背景 | 第22-24页 |
| 1.4.1 RCAN2基因基本介绍 | 第22-23页 |
| 1.4.2 RCAN2基因的功能 | 第23页 |
| 1.4.3 RCAN2基因在体重调节中的功能 | 第23-24页 |
| 1.5 Rps6kb1基因背景 | 第24-28页 |
| 2 实验材料、试剂与仪器 | 第28-32页 |
| 2.1 实验模式动物 | 第28页 |
| 2.2 实验所用主要试剂 | 第28-30页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第28-30页 |
| 2.3 实验耗材与仪器 | 第30-32页 |
| 2.3.1 动物饲料 | 第30页 |
| 2.3.2 实验耗材 | 第30页 |
| 2.3.3 实验仪器 | 第30-32页 |
| 3 实验方法 | 第32-40页 |
| 3.1 实验小鼠基因型的鉴定 | 第32-33页 |
| 3.1.1 小鼠基因组的提取 | 第32页 |
| 3.1.2 PCR鉴定小鼠的基因型 | 第32页 |
| 3.1.3 PCR鉴定Rcan2和Rps6kb1两基因敲除小鼠的基因型 | 第32-33页 |
| 3.2 Rcan2~(-/-)Rps6kb1~(-/-)双基因敲除小鼠的获得 | 第33页 |
| 3.3 体重统计实验 | 第33页 |
| 3.4 小鼠摄食量的测量实验 | 第33-34页 |
| 3.5 高脂肪食物配对喂养实验 | 第34页 |
| 3.6 Western Blot检测 | 第34-35页 |
| 3.6.1 提取组织总蛋白 | 第34页 |
| 3.6.2 紫外分光光度计测蛋白浓度 | 第34页 |
| 3.6.3 Western Blot | 第34-35页 |
| 3.7 Real-Time PCR | 第35-37页 |
| 3.7.1 小鼠组织RNA的提取 | 第35-36页 |
| 3.7.2 将RNA反转录为cDNA | 第36页 |
| 3.7.3 荧光实时定量PCR | 第36-37页 |
| 3.8 动物组织石蜡切片 | 第37-38页 |
| 3.9 石蜡切片HE染色 | 第38-39页 |
| 3.10 脂肪细胞大小的统计 | 第39页 |
| 3.11 统计学分析 | 第39-40页 |
| 4 结果与分析 | 第40-56页 |
| 4.1 分子水平上鉴定Rcan2和Rps6kb1两种基因之间的关系 | 第40-41页 |
| 4.1.1 Rcan2敲除对Rps6kb1蛋白表达水平的影响 | 第40-41页 |
| 4.2 Rcan2和Rps6kb1两基因的敲除对小鼠胚胎发育的影响 | 第41-42页 |
| 4.3 普通饮食条件下,Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)两种突变对小鼠生长和体重的影响 | 第42-44页 |
| 4.3.1 普通饮食条件下,正常小鼠、Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)三种小鼠的生长模式 | 第42-43页 |
| 4.3.2 普通饮食条件下,正常小鼠、Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)三种小鼠中胫骨长度和附睾脂肪重量的统计 | 第43-44页 |
| 4.4 高脂肪食物喂养条件下,Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)两种突变对小鼠生长和体重的影响 | 第44-46页 |
| 4.4.1 高脂肪食物喂养条件下,正常小鼠、Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)三种小鼠的生长模式 | 第44-45页 |
| 4.4.2 高脂肪食物喂养条件下,正常小鼠、Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)三种小鼠中胫骨长度和相关组织器官重量的统计 | 第45-46页 |
| 4.5 不同饮食条件下,正常小鼠、Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)三种小鼠中与脂质相关组织的形态学分析 | 第46-50页 |
| 4.5.1 正常小鼠,Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)三种小鼠的脂肪组织的形态学分析 | 第46-48页 |
| 4.5.2 正常小鼠、Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)三种小鼠肝脏组织的形态学分析 | 第48-49页 |
| 4.5.3 正常小鼠、Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)三种小鼠的褐色脂肪组织的形态学分析 | 第49-50页 |
| 4.6 正常小鼠、Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)三种小鼠的摄食量的统计 | 第50-51页 |
| 4.7 高脂肪饲料喂养条件下,正常小鼠和Rcan2~(-/-)小鼠之间的配对喂养实验 | 第51-53页 |
| 4.7.1 高脂肪饲料喂养条件下,配对喂养实验中小鼠的生长模式 | 第51-52页 |
| 4.7.2 高脂肪饲料喂养条件下,配对喂养实验中小鼠与脂肪代谢相关的组织器官重量的统计 | 第52-53页 |
| 4.8 普通饲料喂养条件下,Rcan2~(-/-)Rps6kb1~(-/-)双基因敲除小鼠的表型 | 第53-54页 |
| 4.8.1 普通饲料喂养条件下,Rcan2~(-/-)Rps6kb1~(-/-)双基因敲除小鼠体重及体长表型 | 第53-54页 |
| 4.8.2 普通饲料喂养条件下,Rcan2~(-/-)Rps6kb1~(-/-)双基因敲除小鼠与肥胖相关的组织器官的重量的统计 | 第54页 |
| 4.9 普通饲料喂养条件下,Rcan2~(-/-)和Rps6kb1~(-/-)小鼠体内与能量代谢相关的基因的mRNA表达水平 | 第54-56页 |
| 5 讨论 | 第56-64页 |
| 5.1 Rcan2及Rps6kb1两种基因的缺失对小鼠生长和体重的影响 | 第57-59页 |
| 5.2 Rcan2基因敲除的研究 | 第59页 |
| 5.3 Rps6kb1基因敲除的研究 | 第59-61页 |
| 5.4 Rcan2和Rps6kb1两基因与肥胖发生的关系 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第71页 |
