摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11页 |
中英文缩略词表 | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-19页 |
1.1 镉的雄性生殖毒性研究 | 第13-14页 |
1.2 拮抗镉生殖毒性的研究 | 第14-15页 |
1.3 莱菔硫烷的抗癌作用 | 第15页 |
1.4 莱菔硫烷对神经的保护作用 | 第15页 |
1.5 莱菔硫烷的抗氧化损伤作用 | 第15-16页 |
1.6 莱菔硫烷与镉的相互作用研究 | 第16页 |
1.7 Nrf2-Keap1/ARE信号通路 | 第16-17页 |
1.8 试验目的和意义 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-32页 |
2.1 主要仪器与试剂 | 第19-21页 |
2.1.1 主要仪器 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19-21页 |
2.1.3 实验动物 | 第21页 |
2.2 生精细胞的分离培养与鉴定 | 第21-22页 |
2.2.1 生精细胞的分离与培养 | 第21页 |
2.2.2 生精细胞的鉴定 | 第21-22页 |
2.3 试验模型的建立 | 第22-23页 |
2.3.1 镉对生精细胞相对存活率的检测 | 第22页 |
2.3.2 莱菔硫烷对生精细胞相对存活率的检测 | 第22页 |
2.3.3 镉与莱菔硫烷联合作用对生精细胞相对存活率的检测 | 第22-23页 |
2.4 生精细胞活性检测 | 第23页 |
2.5 生精细胞凋亡率的检测 | 第23-24页 |
2.5.1 AO/EB双染法检测生精细胞凋亡 | 第23-24页 |
2.5.2 FITC-Annexen-V/PI双染法检测生精细胞凋亡 | 第24页 |
2.6 抗氧化功能的检测 | 第24页 |
2.7 生精细胞Nrf2、NQO1、HO-1、γ-GCS的mRNA表达量检测 | 第24-28页 |
2.7.1 引物设计与合成 | 第24-25页 |
2.7.2 小鼠生精细胞RNA的提取 | 第25页 |
2.7.3 RNA的检测 | 第25页 |
2.7.4 RNA反转录反应 | 第25-26页 |
2.7.5 确定PCR反应条件及验证引物的特异性 | 第26页 |
2.7.6 qPCR反应 | 第26-28页 |
2.8 生精细胞Nrf2、HO-1、γ-GCS、NQO1蛋白表达量检测 | 第28-31页 |
2.8.1 蛋白的提取及定量 | 第28页 |
2.8.2 SDS-PAGE电泳 | 第28-31页 |
2.9 数据的统计与分析 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-42页 |
3.1 小鼠生精细胞体外培养及鉴定结果 | 第32-33页 |
3.2 试验模型建立结果 | 第33-35页 |
3.2.1 镉对生精细胞相对存活率的检测结果 | 第33页 |
3.2.2 莱菔硫烷对生精细胞相对存活率的检测结果 | 第33-34页 |
3.2.3 Cd与Sfn对生精细胞相对存活率的检测结果 | 第34-35页 |
3.3 乳酸脱氢酶活性的检测结果 | 第35页 |
3.4 生精细胞凋亡的检测结果 | 第35-37页 |
3.4.1 AO/EB双染法检测生精细胞凋亡结果 | 第35-36页 |
3.4.2 FITC-Annexen-V/PI双染法检测生精细胞凋亡结果 | 第36-37页 |
3.5 生精细胞抗氧化功能的检测结果 | 第37页 |
3.5.1 生精细胞SOD活性检测结果 | 第37页 |
3.5.2 生精细胞MDA含量检测结果 | 第37页 |
3.6 生精细胞Nrf2、HO-1、γ-GCS、NQO1mRNA和蛋白表达检测结果 | 第37-42页 |
3.6.1 Nrf2、HO-1、γ-GCS、NQO1及内参引物的特异性检测结果 | 第37页 |
3.6.2 Nrf2、HO-1、γ-GCS、NQO1及内参qPCR引物特异性及标准曲线结果. | 第37-38页 |
3.6.3 生精细胞Nrf2的mRNA及蛋白表达结果 | 第38-39页 |
3.6.4 生精细胞HO-1的mRNA及蛋白表达结果 | 第39页 |
3.6.5 生精细胞γ-GCS的mRNA及蛋白表达结果 | 第39-40页 |
3.6.6 生精细胞NQO1的mRNA及蛋白表达结果 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
附录 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读硕士研究生期间发表的文章 | 第58-59页 |