摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
前言 | 第9-11页 |
材料 | 第11-14页 |
1 实验药品及细胞株 | 第11页 |
2 主要试剂 | 第11-12页 |
3 主要实验仪器 | 第12页 |
4 培养液与相关试剂的配制 | 第12-14页 |
4.1 胎牛血清的分装 | 第12页 |
4.2 RPMI 1640培养基的配制 | 第12-13页 |
4.3 人多发性骨髓瘤细胞培养液的制备 | 第13页 |
4.4 PBS平衡盐溶液的制备 | 第13-14页 |
方法 | 第14-22页 |
1 人多发性骨髓瘤细胞株U266的培养 | 第14页 |
2 冻存与复苏细胞 | 第14页 |
3 MTT检测细胞增值抑制率 | 第14-15页 |
4 应用流式细胞仪检测索拉非尼处理后的多发性骨髓瘤细胞的凋亡率 | 第15页 |
5 Q-PCR检测目的基因表达 | 第15-19页 |
5.1 RNA提取 | 第15-16页 |
5.2 RNA反转录 | 第16-17页 |
5.3 QRT-PCR引物序列 | 第17-18页 |
5.4 扩增曲线的建立 | 第18页 |
5.5 熔解曲线的建立 | 第18页 |
5.6 Q-PCR相对表达量结果统计 | 第18-19页 |
6 Western-blot检测目的蛋白表达 | 第19-20页 |
6.1 第一步:样品制备 | 第19页 |
6.2 蛋白浓度检测 | 第19页 |
6.3 western blot | 第19-20页 |
7 实验技术路线图的设计 | 第20-21页 |
7.1 索拉非尼对人多发性骨髓瘤细胞系U266细胞生物学特性的影响 | 第20-21页 |
7.2 检测索拉非尼影响人多发性骨髓瘤系U266细胞的差异靶基因 | 第21页 |
8 统计学分析 | 第21-22页 |
结果 | 第22-33页 |
1 索拉非尼处理MM细胞系U266后 24h、48h、72h倒置显微镜下细胞形态图 | 第22-25页 |
2 应用MTT法检测索拉非尼对MM细胞系U266增殖影响 | 第25-26页 |
3 用流式细胞仪检测索拉非尼对MM细胞系U266凋亡的影响 | 第26-27页 |
4 索拉非尼对多发性骨髓瘤(MM)细胞U266 VEGFR-2、VEGFR-3、PDGFR-β 及c-Kit基因表达的影响 | 第27-31页 |
4.1 扩增曲线 | 第27-28页 |
4.2 熔解曲线 | 第28-29页 |
4.3 Q-PCR相对表达量 | 第29-31页 |
5 索拉非尼对多发性骨髓瘤(MM)细胞U266 VEGFR-3、PDGFR-β 蛋白表达的影响 | 第31-33页 |
讨论 | 第33-37页 |
1 靶向药物索拉非尼目前研究的现状 | 第33页 |
2 索拉非尼作为新型的肿瘤靶向治疗药物潜在机制 | 第33-34页 |
3 索拉非尼与Raf-MEK-ERK信号传导通路的关系 | 第34-35页 |
4 索拉非尼对VEGFR/PDGFR的作用 | 第35页 |
5 索拉非尼作用MM细胞株U266研究结果及分析 | 第35-37页 |
结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
综述 | 第42-52页 |
参考文献 | 第47-52页 |
主要缩写词表 | 第52-53页 |
在读期间发表的主要学术论文 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |