摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
1 引言 | 第9-20页 |
·绵羊肺腺瘤病(SPA)概述 | 第9-15页 |
·绵羊肺腺瘤病的病原学和流行病学 | 第9-10页 |
·绵羊肺腺瘤病的临床症状与病理变化 | 第10-11页 |
·绵羊肺腺瘤病的诊断及防制 | 第11页 |
·绵羊肺腺瘤病的发病机理 | 第11-12页 |
·内源性绵羊肺腺瘤病毒的研究进展 | 第12-14页 |
·enJSRV 和exJSRV 的关系 | 第14-15页 |
·组织结构 | 第15-16页 |
·胸腺的组织结构 | 第15-16页 |
·脾脏的组织结构 | 第16页 |
·肠系膜淋巴结的组织结构 | 第16页 |
·肺脏的组织结构 | 第16页 |
·荧光定量PCR | 第16-20页 |
·Real-Time PCR 原理 | 第16-18页 |
·Real-Time PCR 的化学原理 | 第18-19页 |
·数据处理方法 | 第19-20页 |
·本研究的目的及意义 | 第20页 |
2 试验一 RT-PCR 反应与探针的制备 | 第20-29页 |
·材料 | 第20-22页 |
·材料来源 | 第20页 |
·主要仪器和设备 | 第20-21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·引物的设计与合成 | 第22页 |
·方法 | 第22-26页 |
·总RNA 提取方法 | 第22-23页 |
·RT-PCR 扩增 | 第23-24页 |
·PCR 产物的回收纯化 | 第24页 |
·DNA 序列测定 | 第24-25页 |
·探针标记 | 第25页 |
·探针灵敏度检测 | 第25-26页 |
·结果 | 第26-29页 |
·总RNA 提取结果 | 第26页 |
·RT-PCR 扩增结果 | 第26-27页 |
·测序结果 | 第27页 |
·同源性比较结果 | 第27-28页 |
·PCR 产物纯化结果 | 第28页 |
·探针灵敏度检测结果 | 第28-29页 |
3 试验二组织原位杂交法检测enJSRV mRNA 及Hyal-2 mRNA 胎儿和初生羔羊免疫器官的表达部位 | 第29-35页 |
·材料 | 第29-30页 |
·材料来源 | 第29页 |
·主要仪器和设备 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29-30页 |
·方法 | 第30-31页 |
·组织切片的制备 | 第30页 |
·杂交前预处理 | 第30-31页 |
·杂交 | 第31页 |
·杂交后检测 | 第31页 |
·结果 | 第31-35页 |
·enJSRV 和Hyal-2 mRNAs 在70d 胎儿免疫器官的表达 | 第32页 |
·enJSRV 和Hyal-2 mRNAs 在130d 胎儿免疫器官的表达 | 第32-33页 |
·enJSRV 和Hyal-2 mRNAs 在出生后3d 羔羊免疫器官的表达 | 第33-35页 |
4 试验三 Real-Time PCR 检测enJSRV 和 Hyal-2 mRNAs 在胎儿和初生羔羊免疫器管的表达水平 | 第35-40页 |
·材料 | 第35页 |
·引物和 TaqMan 探针 | 第35页 |
·主要仪器和设备 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·方法 | 第35-36页 |
·Real-Time PCR 反应 | 第35-36页 |
·Real-Time PCR 反应数据处理方法 | 第36页 |
·结果 | 第36-40页 |
·Real-Time RT-PCR 扩增结果 | 第36页 |
·Real-Time PCR 扩增曲线和标准曲线 | 第36-38页 |
·Real-Time RT-PCR 定量结果 | 第38-40页 |
5 总体讨论 | 第40-43页 |
6 总体结论 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
作者简介 | 第49页 |