摘要 | 第6-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词索引表 | 第18-20页 |
第一章 绪论 | 第20-48页 |
1.1 环境内分泌干扰物概述 | 第20-22页 |
1.1.1 环境内分泌干扰物的定义 | 第20页 |
1.1.2 环境内分泌干扰物的来源和分类 | 第20页 |
1.1.3 环境内分泌干扰物的危害 | 第20-22页 |
1.2 甲状腺干扰物的干扰效应 | 第22-29页 |
1.2.1 甲状腺及甲状腺激素的生理功能 | 第22-24页 |
1.2.2 甲状腺干扰物作用机制 | 第24-25页 |
1.2.3 甲状腺干扰物的种类 | 第25-29页 |
1.3 农药类甲状腺干扰物使用状况及危害的特殊性 | 第29-32页 |
1.4 农药类甲状腺干扰物研究进展 | 第32-38页 |
1.4.1 人群流行病学调查 | 第32-35页 |
1.4.2 动物试验研究 | 第35-36页 |
1.4.3 体外细胞试验研究 | 第36-38页 |
1.4.4 野生动物研究 | 第38页 |
1.5 农药类内分泌干扰物分析方法研究进展 | 第38-46页 |
1.5.1 检测意义 | 第38页 |
1.5.2 样品前处理技术 | 第38-44页 |
1.5.3 分析方法 | 第44-46页 |
1.6 论文的研究思路和主要内容 | 第46-48页 |
第二章 超声辅助-分散液液微萃取-气相色谱法检测水样中有机磷农药残留的研究 | 第48-59页 |
2.1 引言 | 第48-49页 |
2.2 实验部分 | 第49-50页 |
2.2.1 仪器与试剂 | 第49-50页 |
2.2.2 溶液的配制 | 第50页 |
2.2.3 色谱条件 | 第50页 |
2.2.4 样品的采集与制备 | 第50页 |
2.2.5 UA-DLLME过程 | 第50页 |
2.3 结果与讨论 | 第50-58页 |
2.3.1 DLLME条件的优化 | 第50-54页 |
2.3.1.1 萃取剂的选择 | 第50-51页 |
2.3.1.2 分散剂的的选择 | 第51-52页 |
2.3.1.3 萃取剂和分散剂体积的选择 | 第52-53页 |
2.3.1.4 超声时间的选择 | 第53-54页 |
2.3.1.5 pH的选择 | 第54页 |
2.3.2 方法评价 | 第54-58页 |
2.3.2.1 线性范围、检出限和定量限 | 第54-55页 |
2.3.2.2 实际样品的分析 | 第55-57页 |
2.3.2.3 方法的比较 | 第57-58页 |
2.4 本章小结 | 第58-59页 |
第三章 超声辅助-分散固相萃取-轻质溶剂-分散液液微萃取-气相色谱法检测土壤中有机磷农药残留的研究 | 第59-71页 |
3.1 引言 | 第59-60页 |
3.2 实验部分 | 第60-61页 |
3.2.1 仪器与试剂 | 第60页 |
3.2.2 溶液的配制 | 第60页 |
3.2.3 色谱条件 | 第60页 |
3.2.4 样品采集与制备 | 第60页 |
3.2.5 UA-DSPE-DLLME过程 | 第60-61页 |
3.3 结果与讨论 | 第61-70页 |
3.3.1 样品提取过程优化 | 第62页 |
3.3.1.1 提取溶剂的选择 | 第62页 |
3.3.1.2 超声时间的选择 | 第62页 |
3.3.2 DSPE过程优化 | 第62-63页 |
3.3.3 DLLME过程优化 | 第63-67页 |
3.3.3.1 萃取剂和分散剂的选择 | 第63-64页 |
3.3.3.2 萃取剂体积的选择 | 第64页 |
3.3.3.3 水体积的选择 | 第64-65页 |
3.3.3.4 超声时间的选择 | 第65页 |
3.3.3.5 pH的选择 | 第65-66页 |
3.3.3.6 盐NaCl的选择 | 第66-67页 |
3.3.4 方法评价 | 第67-70页 |
3.3.4.1 线性范围、检测限和定量限 | 第67页 |
3.3.4.2 实际样品的分析 | 第67-69页 |
3.3.4.3 方法的比较 | 第69-70页 |
3.4 本章小结 | 第70-71页 |
第四章 固相萃取-气相色谱法检测血清有机氯农药残留的研究 | 第71-81页 |
4.1 引言 | 第71-72页 |
4.2 实验部分 | 第72-73页 |
4.2.1 仪器与试剂 | 第72页 |
4.2.2 溶液的配制 | 第72页 |
4.2.3 色谱条件 | 第72页 |
4.2.4 样品采集与制备 | 第72-73页 |
4.2.5 样品前处理过程 | 第73页 |
4.3 结果与讨论 | 第73-80页 |
4.3.1 色谱条件的优化 | 第73-74页 |
4.3.1.1 色谱柱的选择 | 第73页 |
4.3.1.2 载气流速的选择 | 第73-74页 |
4.3.1.3 衬管硅烷化处理 | 第74页 |
4.3.2 沉淀蛋白 | 第74页 |
4.3.3 提取条件的优化 | 第74-76页 |
4.3.3.1 固相萃取柱的选择 | 第74页 |
4.3.3.2 洗脱溶剂的选择 | 第74-76页 |
4.3.4 净化条件的优化 | 第76-78页 |
4.3.4.1 固相萃取柱的选择 | 第76-77页 |
4.3.4.2 洗脱溶剂体积的选择 | 第77-78页 |
4.3.5 方法评价 | 第78-80页 |
4.3.5.1 线性范围、检测限和定量限 | 第78页 |
4.3.5.2 回收率和精密度 | 第78-79页 |
4.3.5.3 实际样品的分析 | 第79-80页 |
4.4 本章小结 | 第80-81页 |
第五章 昆明市呈贡区农村居民血清有机氯农药暴露对甲状腺激素的影响 | 第81-98页 |
5.1 引言 | 第81页 |
5.2 材料与方法 | 第81-85页 |
5.2.1 调查对象 | 第81-82页 |
5.2.2 调查方法 | 第82页 |
5.2.2.1 抽样方法 | 第82页 |
5.2.2.2 调查方式 | 第82页 |
5.2.3 调查内容 | 第82页 |
5.2.3.1 人口学基本资料 | 第82页 |
5.2.3.2 体格检查 | 第82页 |
5.2.4 血清样本的采集和保存 | 第82页 |
5.2.5 调查质量控制 | 第82-83页 |
5.2.6 知情同意 | 第83页 |
5.2.7 血清有机氯农药的测定 | 第83页 |
5.2.8 甲状腺激素的测定 | 第83-84页 |
5.2.9 甘油三酯和总胆固醇测定 | 第84-85页 |
5.2.10 数据校正 | 第85页 |
5.2.11 数据录入和处理 | 第85页 |
5.3 结果 | 第85-92页 |
5.3.1 调查对象人口学特征 | 第85页 |
5.3.2 调查对象血清有机氯农药残留水平 | 第85-89页 |
5.3.3 调查对象血清甲状腺激素、胆固醇、甘油三酯水平 | 第89页 |
5.3.4 血清有机氯农药含量影响因素分析 | 第89-91页 |
5.3.5 血清有机氯农药含量与甲状腺激素水平相关性分析 | 第91-92页 |
5.4 讨论 | 第92-96页 |
5.4.1 调查对象有机氯农药暴露状况及其影响因素 | 第92-95页 |
5.4.2 有机氯农药暴露对甲状腺激素水平的影响 | 第95-96页 |
5.5 本章小结 | 第96-98页 |
第六章 马拉硫磷和p,p’-DDE对人甲状腺Nthy-ori-3-1细胞全基因组表达的影响 | 第98-131页 |
6.1 引言 | 第98-99页 |
6.2 实验材料 | 第99-100页 |
6.2.1 实验药品和试剂 | 第99页 |
6.2.2 主要实验仪器和耗材 | 第99-100页 |
6.2.3 细胞株 | 第100页 |
6.3 实验方法 | 第100-109页 |
6.3.1 细胞培养及MTT法检测细胞增殖影响 | 第100-101页 |
6.3.1.1 玻璃仪器和胶塞的处理 | 第100页 |
6.3.1.2 培养基的配制 | 第100页 |
6.3.1.3 人甲状腺Nthy-ori-3细胞株的培养 | 第100-101页 |
6.3.1.4 受试物的配制 | 第101页 |
6.3.1.5 细胞毒性试验(MTT比色试验) | 第101页 |
6.3.1.6 数据处理与统计学分析 | 第101页 |
6.3.2 基因芯片技术检测 | 第101-105页 |
6.3.2.1 细胞处理 | 第101-102页 |
6.3.2.2 总RNA提取(Trizol法) | 第102页 |
6.3.2.3 总RNA的纯化 | 第102页 |
6.3.2.4 荧光标记 | 第102-104页 |
6.3.2.5 芯片杂交 | 第104页 |
6.3.2.6 芯片洗涤和扫描 | 第104-105页 |
6.3.2.7 数据分析 | 第105页 |
6.3.3 实时定量PCR(qPCR)验证 | 第105-109页 |
6.3.3.1 细胞处理 | 第105页 |
6.3.3.2 总RNA提取(试剂盒) | 第105-106页 |
6.3.3.3 RNA浓度测定 | 第106页 |
6.3.3.4 RNA凝胶成像 | 第106页 |
6.3.3.5 反转录RNA | 第106-107页 |
6.3.3.6 实时定量PCR | 第107-108页 |
6.3.3.7 数据处理 | 第108-109页 |
6.4 结果 | 第109-124页 |
6.4.1 细胞毒性实验 | 第109-111页 |
6.4.2 基因表达谱芯片结果 | 第111-118页 |
6.4.2.1 RNA质检结果 | 第111-112页 |
6.4.2.2 差异表达基因筛选 | 第112-113页 |
6.4.2.3 Gene Ontology功能分析 | 第113-115页 |
6.4.2.4 基因Pathway分析 | 第115-118页 |
6.4.3 实时定量PCR技术验证差异基因结果 | 第118-124页 |
6.4.3.1 总RNA浓度 | 第118页 |
6.4.3.2 总RNA凝胶成像结果 | 第118页 |
6.4.3.3 基因标准曲线及扩增曲线图 | 第118-122页 |
6.4.3.4 验证差异基因表达水平统计学分析 | 第122-124页 |
6.5 讨论 | 第124-129页 |
6.5.1 马拉硫磷组 | 第124-127页 |
6.5.2 p,p’-DDE组 | 第127-129页 |
6.6 本章小结 | 第129-131页 |
第七章 结论与展望 | 第131-134页 |
7.1 结论 | 第131-132页 |
7.2 创新点 | 第132页 |
7.3 展望 | 第132-134页 |
致谢 | 第134-135页 |
参考文献 | 第135-152页 |
附录A 攻读博士期间发表论文情况 | 第152页 |