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有机磷、有机氯农药分析方法及甲状腺内分泌干扰效应的研究

摘要第6-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词索引表第18-20页
第一章 绪论第20-48页
    1.1 环境内分泌干扰物概述第20-22页
        1.1.1 环境内分泌干扰物的定义第20页
        1.1.2 环境内分泌干扰物的来源和分类第20页
        1.1.3 环境内分泌干扰物的危害第20-22页
    1.2 甲状腺干扰物的干扰效应第22-29页
        1.2.1 甲状腺及甲状腺激素的生理功能第22-24页
        1.2.2 甲状腺干扰物作用机制第24-25页
        1.2.3 甲状腺干扰物的种类第25-29页
    1.3 农药类甲状腺干扰物使用状况及危害的特殊性第29-32页
    1.4 农药类甲状腺干扰物研究进展第32-38页
        1.4.1 人群流行病学调查第32-35页
        1.4.2 动物试验研究第35-36页
        1.4.3 体外细胞试验研究第36-38页
        1.4.4 野生动物研究第38页
    1.5 农药类内分泌干扰物分析方法研究进展第38-46页
        1.5.1 检测意义第38页
        1.5.2 样品前处理技术第38-44页
        1.5.3 分析方法第44-46页
    1.6 论文的研究思路和主要内容第46-48页
第二章 超声辅助-分散液液微萃取-气相色谱法检测水样中有机磷农药残留的研究第48-59页
    2.1 引言第48-49页
    2.2 实验部分第49-50页
        2.2.1 仪器与试剂第49-50页
        2.2.2 溶液的配制第50页
        2.2.3 色谱条件第50页
        2.2.4 样品的采集与制备第50页
        2.2.5 UA-DLLME过程第50页
    2.3 结果与讨论第50-58页
        2.3.1 DLLME条件的优化第50-54页
            2.3.1.1 萃取剂的选择第50-51页
            2.3.1.2 分散剂的的选择第51-52页
            2.3.1.3 萃取剂和分散剂体积的选择第52-53页
            2.3.1.4 超声时间的选择第53-54页
            2.3.1.5 pH的选择第54页
        2.3.2 方法评价第54-58页
            2.3.2.1 线性范围、检出限和定量限第54-55页
            2.3.2.2 实际样品的分析第55-57页
            2.3.2.3 方法的比较第57-58页
    2.4 本章小结第58-59页
第三章 超声辅助-分散固相萃取-轻质溶剂-分散液液微萃取-气相色谱法检测土壤中有机磷农药残留的研究第59-71页
    3.1 引言第59-60页
    3.2 实验部分第60-61页
        3.2.1 仪器与试剂第60页
        3.2.2 溶液的配制第60页
        3.2.3 色谱条件第60页
        3.2.4 样品采集与制备第60页
        3.2.5 UA-DSPE-DLLME过程第60-61页
    3.3 结果与讨论第61-70页
        3.3.1 样品提取过程优化第62页
            3.3.1.1 提取溶剂的选择第62页
            3.3.1.2 超声时间的选择第62页
        3.3.2 DSPE过程优化第62-63页
        3.3.3 DLLME过程优化第63-67页
            3.3.3.1 萃取剂和分散剂的选择第63-64页
            3.3.3.2 萃取剂体积的选择第64页
            3.3.3.3 水体积的选择第64-65页
            3.3.3.4 超声时间的选择第65页
            3.3.3.5 pH的选择第65-66页
            3.3.3.6 盐NaCl的选择第66-67页
        3.3.4 方法评价第67-70页
            3.3.4.1 线性范围、检测限和定量限第67页
            3.3.4.2 实际样品的分析第67-69页
            3.3.4.3 方法的比较第69-70页
    3.4 本章小结第70-71页
第四章 固相萃取-气相色谱法检测血清有机氯农药残留的研究第71-81页
    4.1 引言第71-72页
    4.2 实验部分第72-73页
        4.2.1 仪器与试剂第72页
        4.2.2 溶液的配制第72页
        4.2.3 色谱条件第72页
        4.2.4 样品采集与制备第72-73页
        4.2.5 样品前处理过程第73页
    4.3 结果与讨论第73-80页
        4.3.1 色谱条件的优化第73-74页
            4.3.1.1 色谱柱的选择第73页
            4.3.1.2 载气流速的选择第73-74页
            4.3.1.3 衬管硅烷化处理第74页
        4.3.2 沉淀蛋白第74页
        4.3.3 提取条件的优化第74-76页
            4.3.3.1 固相萃取柱的选择第74页
            4.3.3.2 洗脱溶剂的选择第74-76页
        4.3.4 净化条件的优化第76-78页
            4.3.4.1 固相萃取柱的选择第76-77页
            4.3.4.2 洗脱溶剂体积的选择第77-78页
        4.3.5 方法评价第78-80页
            4.3.5.1 线性范围、检测限和定量限第78页
            4.3.5.2 回收率和精密度第78-79页
            4.3.5.3 实际样品的分析第79-80页
    4.4 本章小结第80-81页
第五章 昆明市呈贡区农村居民血清有机氯农药暴露对甲状腺激素的影响第81-98页
    5.1 引言第81页
    5.2 材料与方法第81-85页
        5.2.1 调查对象第81-82页
        5.2.2 调查方法第82页
            5.2.2.1 抽样方法第82页
            5.2.2.2 调查方式第82页
        5.2.3 调查内容第82页
            5.2.3.1 人口学基本资料第82页
            5.2.3.2 体格检查第82页
        5.2.4 血清样本的采集和保存第82页
        5.2.5 调查质量控制第82-83页
        5.2.6 知情同意第83页
        5.2.7 血清有机氯农药的测定第83页
        5.2.8 甲状腺激素的测定第83-84页
        5.2.9 甘油三酯和总胆固醇测定第84-85页
        5.2.10 数据校正第85页
        5.2.11 数据录入和处理第85页
    5.3 结果第85-92页
        5.3.1 调查对象人口学特征第85页
        5.3.2 调查对象血清有机氯农药残留水平第85-89页
        5.3.3 调查对象血清甲状腺激素、胆固醇、甘油三酯水平第89页
        5.3.4 血清有机氯农药含量影响因素分析第89-91页
        5.3.5 血清有机氯农药含量与甲状腺激素水平相关性分析第91-92页
    5.4 讨论第92-96页
        5.4.1 调查对象有机氯农药暴露状况及其影响因素第92-95页
        5.4.2 有机氯农药暴露对甲状腺激素水平的影响第95-96页
    5.5 本章小结第96-98页
第六章 马拉硫磷和p,p’-DDE对人甲状腺Nthy-ori-3-1细胞全基因组表达的影响第98-131页
    6.1 引言第98-99页
    6.2 实验材料第99-100页
        6.2.1 实验药品和试剂第99页
        6.2.2 主要实验仪器和耗材第99-100页
        6.2.3 细胞株第100页
    6.3 实验方法第100-109页
        6.3.1 细胞培养及MTT法检测细胞增殖影响第100-101页
            6.3.1.1 玻璃仪器和胶塞的处理第100页
            6.3.1.2 培养基的配制第100页
            6.3.1.3 人甲状腺Nthy-ori-3细胞株的培养第100-101页
            6.3.1.4 受试物的配制第101页
            6.3.1.5 细胞毒性试验(MTT比色试验)第101页
            6.3.1.6 数据处理与统计学分析第101页
        6.3.2 基因芯片技术检测第101-105页
            6.3.2.1 细胞处理第101-102页
            6.3.2.2 总RNA提取(Trizol法)第102页
            6.3.2.3 总RNA的纯化第102页
            6.3.2.4 荧光标记第102-104页
            6.3.2.5 芯片杂交第104页
            6.3.2.6 芯片洗涤和扫描第104-105页
            6.3.2.7 数据分析第105页
        6.3.3 实时定量PCR(qPCR)验证第105-109页
            6.3.3.1 细胞处理第105页
            6.3.3.2 总RNA提取(试剂盒)第105-106页
            6.3.3.3 RNA浓度测定第106页
            6.3.3.4 RNA凝胶成像第106页
            6.3.3.5 反转录RNA第106-107页
            6.3.3.6 实时定量PCR第107-108页
            6.3.3.7 数据处理第108-109页
    6.4 结果第109-124页
        6.4.1 细胞毒性实验第109-111页
        6.4.2 基因表达谱芯片结果第111-118页
            6.4.2.1 RNA质检结果第111-112页
            6.4.2.2 差异表达基因筛选第112-113页
            6.4.2.3 Gene Ontology功能分析第113-115页
            6.4.2.4 基因Pathway分析第115-118页
        6.4.3 实时定量PCR技术验证差异基因结果第118-124页
            6.4.3.1 总RNA浓度第118页
            6.4.3.2 总RNA凝胶成像结果第118页
            6.4.3.3 基因标准曲线及扩增曲线图第118-122页
            6.4.3.4 验证差异基因表达水平统计学分析第122-124页
    6.5 讨论第124-129页
        6.5.1 马拉硫磷组第124-127页
        6.5.2 p,p’-DDE组第127-129页
    6.6 本章小结第129-131页
第七章 结论与展望第131-134页
    7.1 结论第131-132页
    7.2 创新点第132页
    7.3 展望第132-134页
致谢第134-135页
参考文献第135-152页
附录A 攻读博士期间发表论文情况第152页

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