| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语 | 第11-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 柱状黄杆菌的发现与鉴定 | 第13-15页 |
| 1.2 柱状黄杆菌的生理生化特征与基因组型 | 第15-18页 |
| 1.3 柱状黄杆菌的致病性和致病机理 | 第18-19页 |
| 1.4 柱形病的临床症状和流行 | 第19-20页 |
| 1.5 柱形病的防治 | 第20-22页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第2章 柱状黄杆菌外膜蛋白中免疫原性蛋白的筛选和鉴定 | 第23-45页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 材料和方法 | 第23-32页 |
| 2.2.1 主要实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.2.2 主要耗材与试剂 | 第24页 |
| 2.2.3 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.2.4 实验所用溶液的配制 | 第25-28页 |
| 2.2.5 柱状黄杆菌的培养 | 第28-29页 |
| 2.2.6 抗体的制备 | 第29页 |
| 2.2.7 柱状黄杆菌外膜蛋白的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.8 双向电泳分离柱状黄杆菌外膜蛋白 | 第30-31页 |
| 2.2.9 柱状黄杆菌外膜蛋白中免疫原性蛋白的筛选 | 第31页 |
| 2.2.10 考马斯亮蓝G-250 染色 | 第31-32页 |
| 2.2.11 图像的扫描及分析 | 第32页 |
| 2.2.12 免疫原性蛋白的鉴定 | 第32页 |
| 2.3 结果 | 第32-36页 |
| 2.3.1 3种单克隆抗体的有效性检测 | 第32页 |
| 2.3.2 柱状黄杆菌外膜蛋白双向凝胶电泳图谱 | 第32页 |
| 2.3.3 柱状黄杆菌外膜蛋白中免疫原性蛋白的筛选和鉴定 | 第32-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-45页 |
| 第3章 柱状黄杆菌5个免疫原性蛋白的免疫保护效果研究 | 第45-72页 |
| 3.1 前言 | 第45页 |
| 3.2 材料和方法 | 第45-55页 |
| 3.2.1 主要实验仪器 | 第45页 |
| 3.2.2 主要耗材与试剂 | 第45页 |
| 3.2.3 实验材料 | 第45页 |
| 3.2.4 柱状黄杆菌G4基因组DNA的提取 | 第45-46页 |
| 3.2.5 感受态细胞的制备 | 第46页 |
| 3.2.6 5个免疫原性蛋白基因的克隆和原核表达载体的构建 | 第46-50页 |
| 3.2.7 5个免疫原性蛋白的诱导表达 | 第50页 |
| 3.2.8 5个免疫原性蛋白的纯化 | 第50页 |
| 3.2.9 5个免疫原性蛋白对草鱼的免疫保护实验 | 第50-51页 |
| 3.2.10 免疫印迹实验 | 第51页 |
| 3.2.11 抗体效价的测定 | 第51-52页 |
| 3.2.12 免疫相关基因的表达分析 | 第52-55页 |
| 3.2.13 血清抑菌实验 | 第55页 |
| 3.3 结果 | 第55-68页 |
| 3.3.1 5个免疫原性蛋白成熟肽段的PCR扩增 | 第55-57页 |
| 3.3.2 5个免疫原性蛋白的表达和纯化 | 第57-58页 |
| 3.3.3 免疫保护效果研究 | 第58-59页 |
| 3.3.4 免疫印迹实验 | 第59-60页 |
| 3.3.5 抗体效价测定 | 第60页 |
| 3.3.6 免疫相关基因的表达分析 | 第60-68页 |
| 3.3.7 血清抑菌实验 | 第68页 |
| 3.4 讨论 | 第68-72页 |
| 第4章 柱状黄杆菌5个可能的毒力因子基因融合体的构建及其表达产物的免疫保护效果分析 | 第72-84页 |
| 4.1 前言 | 第72页 |
| 4.2 材料和方法 | 第72-77页 |
| 4.2.1 主要实验仪器 | 第72页 |
| 4.2.2 主要耗材与试剂 | 第72页 |
| 4.2.3 实验材料 | 第72页 |
| 4.2.4 实验所用溶液的配制 | 第72页 |
| 4.2.5 5个可能的毒力因子基因抗原区的融合及原核表达载体的构建 | 第72-74页 |
| 4.2.6 5个基因融合体原核表达蛋白的诱导和纯化 | 第74页 |
| 4.2.7 免疫保护实验 | 第74页 |
| 4.2.8 抗体效价的测定 | 第74页 |
| 4.2.9 免疫相关基因表达量分析 | 第74-75页 |
| 4.2.10 免疫印迹实验 | 第75-77页 |
| 4.3 结果 | 第77-81页 |
| 4.3.1 柱状黄杆菌5个可能毒力因子基因融合体的构建 | 第77页 |
| 4.3.2 重组质粒的双酶切鉴定 | 第77页 |
| 4.3.3 融合重组蛋白的表达和纯化 | 第77-78页 |
| 4.3.4 免疫保护实验 | 第78页 |
| 4.3.5 抗体效价测定及免疫印迹检测 | 第78-80页 |
| 4.3.6 免疫相关基因的表达情况 | 第80-81页 |
| 4.4 讨论 | 第81-84页 |
| 参考文献 | 第84-97页 |
| 附录 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
