| 致谢 | 第6-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| 1 真菌超氧化物歧化酶与中心发育通路激活蛋白及其上下游转录因子的的研究现状 | 第14-23页 |
| 1.1 生防真菌遭遇的主要环境胁迫 | 第14-15页 |
| 1.1.1 高温 | 第14页 |
| 1.1.2 紫外胁迫 | 第14页 |
| 1.1.3 化学农药胁迫 | 第14-15页 |
| 1.1.4 湿度 | 第15页 |
| 1.1.5 氧化胁迫 | 第15页 |
| 1.2 真菌SOD的结构与功能 | 第15-17页 |
| 1.2.1 SOD的结构及其亚细胞定位 | 第15-16页 |
| 1.2.2 SOD的表达与功能 | 第16-17页 |
| 1.3 丝状真菌无性发育及其调控因子 | 第17-21页 |
| 1.3.1 丝状真菌的无性循环 | 第17-19页 |
| 1.3.2 丝状真菌的中心发育通路 | 第19-21页 |
| 1.4 展望 | 第21-23页 |
| 2 球孢白僵菌Cu/ZnSOD和FeSOD的抗氧化功能解析 | 第23-45页 |
| 2.1 材料 | 第24页 |
| 2.1.1 菌株和载体 | 第24页 |
| 2.1.2 试剂及试剂盒 | 第24页 |
| 2.2 方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 真菌DNA提取 | 第25页 |
| 2.2.2 Sod1,Sod4及Sod5的鉴定与序列分析 | 第25-26页 |
| 2.2.3 Sod4和Sod5的亚细胞定位 | 第26-27页 |
| 2.2.4 sod突变株的构建与鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.5 SOD和过氧化氢酶(CAT)基因转录水平的检测 | 第28-29页 |
| 2.2.6 总SOD的酶活以及总过氧化氢酶的酶活测定 | 第29-30页 |
| 2.2.7 胞内ROS含量的测定 | 第30页 |
| 2.2.8 生长速率、产孢量及萌发速率的检测 | 第30页 |
| 2.2.9 化学及环境胁迫敏感性的测定 | 第30-31页 |
| 2.2.10 分生孢子毒力的生物测定 | 第31页 |
| 2.2.11 数据分析 | 第31-32页 |
| 2.3 结果 | 第32-42页 |
| 2.3.1 球孢白僵菌Sod1、Sod4和Sod5的特征 | 第32-36页 |
| 2.3.2 sod单基因缺失或干扰改变其余sod基因的转录水平 | 第36-37页 |
| 2.3.3 sod单基因缺失或干扰对胞内SOD总酶活及ROS水平的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.4 sod单基因缺失或干扰改变过氧化氢酶(CAT)的总酶活及基因转录水平 | 第38-39页 |
| 2.3.5 sod单基因缺失或干扰对生长和产孢的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.6 sod突变株对化学胁迫的敏感性变化 | 第40页 |
| 2.3.7 sod单基因缺失或干扰对生防潜能的影响 | 第40-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-45页 |
| 3 球孢白僵菌发育激活蛋白对无性发育的调控及机理 | 第45-69页 |
| 3.1 材料 | 第46页 |
| 3.1.1 菌株和培养条件 | 第46页 |
| 3.1.2 试剂和试剂盒 | 第46页 |
| 3.2 方法 | 第46-51页 |
| 3.2.1 真菌核酸的提取 | 第46页 |
| 3.2.2 目标基因序列的克隆和分析 | 第46-47页 |
| 3.2.3 目标基因突变株的构建 | 第47页 |
| 3.2.4 不同营养基质上的生长速率测定 | 第47-49页 |
| 3.2.5 分生孢子产量及活力的测定 | 第49页 |
| 3.2.6 孢子质量的检测 | 第49-50页 |
| 3.2.7 菌丝自噬体、芽生孢子产量及生物量的检测 | 第50页 |
| 3.2.8 胁迫敏感性的测定 | 第50页 |
| 3.2.9 细胞内海藻糖含量的测定 | 第50页 |
| 3.2.10 真菌毒力的生物测定 | 第50页 |
| 3.2.11 发育相关基因的转录表达分析 | 第50-51页 |
| 3.2.12 数据分析 | 第51页 |
| 3.3 结果与分祈 | 第51-66页 |
| 3.3.1 球孢白僵菌Br1A、AbaA、WetA和VosA的特征 | 第51-52页 |
| 3.3.2 brlA、abaA、wetA及vosA单基因缺失或brlA过表达改变同伴基因及其上游转录因子的时空表达 | 第52-55页 |
| 3.3.3 单基因缺失或brlA过表达改变球孢白僵菌生长发育、无性循环及毒力 | 第55-60页 |
| 3.3.4 brlA、abaA、wetA和vosA对细胞自噬的影响 | 第60-62页 |
| 3.3.5 brlA、abaA、wetA和vosA对细胞海藻糖积累及胁迫敏感性的影响 | 第62页 |
| 3.3.6 brlA、wetA和vosA对孢子成熟及孢壁结构的影响 | 第62-65页 |
| 3.3.7 brlA过表达、wetA或vosA缺失对孢子活力及孢子胁迫敏感性的影响 | 第65-66页 |
| 3.4 讨论 | 第66-69页 |
| 4 球孢白僵菌中心发育通路上游Flb族转录因子的功能解析 | 第69-83页 |
| 4.1 材料 | 第69-70页 |
| 4.1.1 菌株和培养条件 | 第69-70页 |
| 4.1.2 试剂和试剂盒 | 第70页 |
| 4.2 方法 | 第70-72页 |
| 4.2.1 真菌核酸提取 | 第70页 |
| 4.2.2 球孢白僵菌flb基因的克隆和分析 | 第70页 |
| 4.2.3 flb单基因敲除及回补菌株的构建 | 第70页 |
| 4.2.4 不同碳氮培养基上生长速率的测定 | 第70页 |
| 4.2.5 分生孢子产量的测定 | 第70页 |
| 4.2.6 分生孢子活力的测定 | 第70-71页 |
| 4.2.7 分生孢子大小、复杂度及表面糖分子抗原表位变化的检测 | 第71页 |
| 4.2.8 化学及环境胁迫敏感性的测定 | 第71-72页 |
| 4.2.9 真菌毒力的生物测定 | 第72页 |
| 4.2.10 发育相关基因的转录分析 | 第72页 |
| 4.2.11 数据分析 | 第72页 |
| 4.3 结果与分析 | 第72-80页 |
| 4.3.1 球孢白僵菌FlbB-E的序列结构、同源性及转录表达特征 | 第72-74页 |
| 4.3.2 球孢白僵菌flb单基因缺失对brlA及同伴基因转录表达的影响 | 第74-76页 |
| 4.3.3 flb单基因缺失影响球孢白僵菌对不同碳氮源的利用 | 第76-78页 |
| 4.3.4 flb单基因缺失对球孢白僵菌菌落形态、分生孢子产量及特征的影响 | 第78-79页 |
| 4.3.5 flb单基因缺失对球孢白僵菌胁迫敏感性及毒力的影响 | 第79-80页 |
| 4.4 讨论 | 第80-83页 |
| 5 结语 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| Summary | 第94-96页 |
| 附录：攻读博士学位期间的主要成果 | 第97页 |
