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萘酰亚胺衍生物TZY2抑制肝癌的分子机制研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第1章 文献综述第11-17页
    1.1 引言第11页
    1.2 萘酰亚胺的研究进展第11-12页
    1.3 多胺的研究进展第12-13页
    1.4 细胞凋亡的信号通路第13-17页
        1.4.1 死亡受体凋亡途径第13-14页
        1.4.2 线粒体凋亡途径第14-15页
        1.4.3 内质网凋亡途径第15-17页
第2章 实验材料,试剂,仪器第17-23页
    2.1 实验材料第17页
        2.1.1 实验细胞株第17页
        2.1.2 实验器材第17页
        2.1.3 实验动物第17页
    2.2 主要试剂的配制第17-20页
        2.2.1 细胞培养相关试剂的配制第17-18页
        2.2.2 荧光染料试剂的配制第18页
        2.2.3 Western blot实验试剂的配制第18-19页
        2.2.4 动物实验试剂第19-20页
    2.4 主要实验试剂和仪器第20-23页
第3章 实验方法第23-33页
    3.1 细胞培养第23页
    3.2 MTT法检测TZY2对细胞增殖的影响第23-24页
    3.3 高内涵细胞成像系统第24-25页
        3.3.1 AO/EB/Hoechst 33342 染色观察细胞形态第24页
        3.3.2 Rh123/Hoechst 33342 染色检测线粒体膜电位第24-25页
        3.3.3 DCFH-DA/Hoechst 33342 染色检测细胞内活性氧的水平第25页
    3.4 FACSort流式细胞仪第25-27页
        3.4.1 Annexin V/PI双染检测TZY2对肝癌细胞凋亡的影响第25-26页
        3.4.2 PI单染检测TZY2对细胞周期的影响第26页
        3.4.3 Rh123染色检测TZY2对线粒体膜电位的影响第26-27页
    3.5 细胞划痕实验第27页
    3.6 Western Blot第27-30页
        3.6.1 收集细胞第27页
        3.6.2 提取总蛋白第27-28页
        3.6.3 Western Blot实验具体操作第28-30页
    3.7 统计学方法第30页
    3.8 TZY2体内抗肿瘤作用的研究第30-33页
        3.8.1 TZY2对H22实体瘤的影响第30-31页
        3.8.2 TZY2对H22肺转移的影响第31页
        3.8.3 TZY2对CT-26 肺转移的影响第31-33页
第4章 实验结果第33-59页
    4.1 TZY2对肝癌细胞Hep G2和SMMC-7721 增殖的影响第33页
    4.2 TZY2对Hep G2和SMMC-7721 细胞凋亡的影响第33-40页
        4.2.1 AO/EB染色观察TZY2对肝癌细胞形态的影响第33-36页
        4.2.2 Annexin V/PI双染流式仪检测TZY2对肝癌细胞凋亡的影响第36-40页
    4.3 PI单染流式仪检测TZY2对肝癌细胞周期的影响第40-41页
    4.4 TZY2对Hep G2和SMMC-7721 细胞线粒体跨膜电位的影响第41-45页
        4.4.1 Rh123/Hoechst 33342 染色观察TZY2对线粒体膜电位的影响第41-43页
        4.4.2 Rh123染色流式仪检测TZY2对线粒体膜电位的影响第43-45页
    4.5 TZY2对Hep G2和SMMC-7721 细胞活性氧的影响第45-47页
    4.6 TZY2对PARP-1、p53、Caspase-8、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响第47-50页
    4.7 TZY2对Hep G2和SMMC-7721 细胞迁移的影响第50-53页
    4.8 TZY2体内抗肿瘤活性的研究第53-59页
        4.8.1 TZY2对H22实体瘤各项指标的影响第53-54页
        4.8.2 TZY2对H22肺转移各项指标的影响第54-55页
        4.8.3 TZY2对CT-26 肺转移各项指标的影响第55-59页
第5章 实验讨论第59-63页
第6章 实验结论第63-65页
参考文献第65-69页
附录第69-71页
致谢第71-72页

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