| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 中英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-16页 |
| 第二章 携带超抗原SEA基因低免疫原性慢病毒载体的构建 | 第16-30页 |
| 2.1 材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 主要溶液配制 | 第16-19页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-26页 |
| 2.2.1 基因的获取 | 第19页 |
| 2.2.2 目的基因质粒的的构建 | 第19-20页 |
| 2.2.3 慢病毒载体的设计 | 第20页 |
| 2.2.4 pLVX-IRES-Neo-SEA的构建 | 第20-21页 |
| 2.2.5 连接产物鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.6 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2.7 病毒包装 | 第23-24页 |
| 2.2.8 收集与浓缩病毒 | 第24-25页 |
| 2.2.9 测定病毒滴度 | 第25页 |
| 2.2.10 慢病毒的储存与稀释 | 第25页 |
| 2.2.11 统计学分析 | 第25-26页 |
| 2.3 结果 | 第26-27页 |
| 2.3.1 PCR获得目的基因SEA，证实片段大小为 774bp。 | 第26页 |
| 2.3.2 成功构建低免疫原性慢病毒载体 | 第26页 |
| 2.3.3 BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切验证质粒 | 第26-27页 |
| 2.3.4 荧光滴度法检测病毒滴度 | 第27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-30页 |
| 第三章 低免疫原性慢病毒载体表达SEA蛋白对膀胱癌细胞的治疗作用及其机制 | 第30-43页 |
| 3.1 材料 | 第30-33页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第30页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 3.1.3 主要溶液配制 | 第30-32页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第32-33页 |
| 3.2 方法 | 第33-39页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第33页 |
| 3.2.2 RT-PCR检测 | 第33-34页 |
| 3.2.3 反转录 | 第34-35页 |
| 3.2.4 Western blot | 第35-38页 |
| 3.2.5 淋巴细胞的提取 | 第38页 |
| 3.2.6 病毒对肿瘤细胞生长的影响 | 第38-39页 |
| 3.2.7 EILSA方法检测细胞因子分泌情况 | 第39页 |
| 3.2.8 统计学分析 | 第39页 |
| 3.3 结果 | 第39-41页 |
| 3.3.1 病毒转染膀胱肿瘤BIU-87 细胞后SEA基因的转录 | 第39-40页 |
| 3.3.2 病毒转染后BIU-87 细胞可表达SEA蛋白 | 第40页 |
| 3.3.3 转染病毒后BIU-87 对淋巴细胞生长情况的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.4 病毒转染后BIU-87 对淋巴细胞细胞因子分泌的影响 | 第41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 主要结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 硕士期间发表的论文和参与的项目 | 第48页 |
