| 缩略语表 | 第7-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 文献回顾 | 第18-27页 |
| 一、骨稳态与成骨成血管偶联 | 第18-21页 |
| 二、GSK-3B与骨稳态调节 | 第21-23页 |
| 三、GSK-3B与成血管调节 | 第23-25页 |
| 1、与Hif1α相关 | 第23-24页 |
| 2、与Wnt/b-catenin/PI3K/AKT/GSK-3β axis相关 | 第24页 |
| 3、与其他通路相关 | 第24-25页 |
| 四、GSK-3B与破骨调节 | 第25-27页 |
| 实验一 GSK-3B~(+/-)小鼠的培育纯化及基因型鉴定 | 第27-32页 |
| 1 材料 | 第27-28页 |
| 1.1 动物 | 第27-28页 |
| 1.2 试剂 | 第28页 |
| 1.3 引物 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-30页 |
| 2.1 基因型鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2 转基因小鼠的培育与纯化 | 第29页 |
| 2.3 小鼠的血糖检测 | 第29页 |
| 2.4 杂合子小鼠的骨组织GSK-3β活性表达检测 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30页 |
| 3.1 转基因小鼠的培育及基因型鉴定 | 第30页 |
| 3.2 杂合子小鼠的骨组织GSK-3β活性表达检测 | 第30页 |
| 4 讨论 | 第30-31页 |
| 5 小结 | 第31-32页 |
| 实验二 GSK-3B对小鼠骨稳态调节的影响 | 第32-39页 |
| 1 材料 | 第32-34页 |
| 1.1 动物 | 第32页 |
| 1.2 试剂 | 第32-33页 |
| 1.3 抗体 | 第33-34页 |
| 2 方法 | 第34-36页 |
| 2.1 OVX骨质疏松模型 | 第34页 |
| 2.2 骨密度检测 | 第34页 |
| 2.3 免疫荧光检测 | 第34-35页 |
| 2.4 蛋白免疫印迹Western Blot | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-37页 |
| 3.1 OVX对野生型小鼠骨稳态的影响 | 第36页 |
| 3.2 高活性GSK-3β对小鼠骨稳态的影响 | 第36-37页 |
| 3.3 高活性GSK-3β对骨稳态破坏的小鼠的影响 | 第37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 5 小结 | 第38-39页 |
| 实验三 GSK-3B对小鼠破骨的影响 | 第39-47页 |
| 1 材料 | 第39-40页 |
| 1.1 动物 | 第39页 |
| 1.2 试剂 | 第39-40页 |
| 1.3 抗体 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-43页 |
| 2.1 ELISA | 第40-41页 |
| 2.2 免疫荧光 | 第41页 |
| 2.3 破骨前体细胞的诱导与培养 | 第41-42页 |
| 2.4 TRAP染色 | 第42-43页 |
| 2.5 蛋白免疫印迹Western Blot | 第43页 |
| 2.6 GSK-3β组织活性试剂盒检测 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-45页 |
| 3.1 GSK-3β~(+/-)小鼠体内破骨成骨成血管标志物的筛查 | 第43-44页 |
| 3.2 高活性GSK-3β对PDGF-BB分泌的影响 | 第44页 |
| 3.3 高活性GSK-3β对破骨前体细胞的影响 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-46页 |
| 5 小结 | 第46-47页 |
| 实验四 GSK-3B对小鼠成血管的影响 | 第47-53页 |
| 1 材料 | 第47-48页 |
| 1.1 动物 | 第47-48页 |
| 1.2 细胞 | 第48页 |
| 1.3 试剂 | 第48页 |
| 1.4 抗体 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-49页 |
| 2.1 BMSCs的培养、传代与条件培养液收集 | 第48-49页 |
| 2.2 破骨前体细胞的诱导与培养及条件培养液收集 | 第49页 |
| 2.3 管腔形成实验 | 第49页 |
| 2.4 ELISA | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-51页 |
| 3.1 PDGF-BB对VEGF分泌的影响 | 第49-50页 |
| 3.2 验证GSK-3β通过破骨前体细胞对成血管的调控作用 | 第50页 |
| 3.3 验证PDGF-BB在GSK-3β调节成血管中的关键作用 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51页 |
| 5 小结 | 第51-53页 |
| 实验五 GSK-3B通过调控PDGF-BB影响成骨成血管偶联对小鼠骨稳态调节作用 | 第53-58页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| 1.1 动物 | 第53页 |
| 1.2 试剂 | 第53页 |
| 1.3 抗体 | 第53-54页 |
| 2 方法 | 第54-55页 |
| 2.1 鼠尾静脉注射中和抗体实验 | 第54页 |
| 2.2 骨密度检测 | 第54页 |
| 2.3 ELISA | 第54页 |
| 2.4 免疫荧光 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-56页 |
| 3.1 PDGF-BB中和抗体的中和效力验证 | 第55页 |
| 3.2 PDGF-BB中和抗体对GSK-3β~(+/-)小鼠骨稳态的影响 | 第55-56页 |
| 3.3 PDGF-BB中和抗体对GSK-3β~(+/-)小鼠成骨成血管偶联的影响 | 第56页 |
| 4 讨论 | 第56页 |
| 5 小结 | 第56-58页 |
| 全文总结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-87页 |
| 个人简历和研究成果 | 第87-88页 |
| 个人简历 | 第87页 |
| 研究生期间研究成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
