| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第9-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述新生期母婴分离的研究进展 | 第15-20页 |
| 1. 新生期母婴分离与行为、情绪障碍疾病 | 第15-16页 |
| 1.1 母婴分离与焦虑、抑郁样情绪 | 第15-16页 |
| 1.2 母婴分离与学习记忆能力 | 第16页 |
| 2. 新生期母婴分离与肠道疾病 | 第16-17页 |
| 2.1 母婴分离与肠易激综合征 | 第16-17页 |
| 2.2 母婴分离与消化性溃疡 | 第17页 |
| 3. 新生期母婴分离与代谢性疾病 | 第17-18页 |
| 3.1 母婴分离与肥胖 | 第17-18页 |
| 3.2 母婴分离与2型糖尿病 | 第18页 |
| 4. 新生期母婴分离与哮喘 | 第18-19页 |
| 5. 新生期母婴分离与肿瘤 | 第19页 |
| 6. 结语 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-34页 |
| 1. 动物 | 第20页 |
| 2. 主要试剂 | 第20-21页 |
| 3. 主要实验仪器与设备 | 第21-22页 |
| 4. 技术路线和实验方法 | 第22-34页 |
| 4.1 技术路线 | 第22-23页 |
| 4.1.1 研究新生期母婴分离对仔鼠肠道菌群及短链脂肪酸的影响 | 第22-23页 |
| 4.1.2 研究新生期母婴分离对仔鼠成年后哮喘气道炎症的影响及其机制 | 第23页 |
| 4.2 实验方法 | 第23-33页 |
| 4.2.1 建立新生期母婴分离模型 | 第23页 |
| 4.2.2 新生期母婴分离对仔鼠肠道菌群的影响 | 第23-27页 |
| 4.2.2.1 肠道细菌总DNA的提取 | 第23-24页 |
| 4.2.2.2 细菌16S rDNA V3可变区PCR扩增 | 第24-26页 |
| 4.2.2.3 变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第26-27页 |
| 4.2.2.3.1 DGGE凝胶制备 | 第26-27页 |
| 4.2.2.3.2 DGGE凝胶电泳 | 第27页 |
| 4.2.2.3.3 DGGE图谱分析 | 第27页 |
| 4.2.3 新生期母婴分离对仔鼠短链脂肪酸的影响 | 第27-28页 |
| 4.2.4 建立哮喘模型 | 第28页 |
| 4.2.5 收集肺泡灌洗液 | 第28页 |
| 4.2.6 计数嗜酸性粒细胞 | 第28页 |
| 4.2.7 肺组织病理学改变 | 第28-29页 |
| 4.2.7.1 石蜡切片的制备 | 第28-29页 |
| 4.2.7.2 HE染色 | 第29页 |
| 4.2.8 肺组织炎症因子含量测定 | 第29-31页 |
| 4.2.8.1 雄鼠肺组织匀浆IL-13测定 | 第29-30页 |
| 4.2.8.2 雄鼠肺组织匀浆LL-33测定 | 第30页 |
| 4.2.8.3 雄鼠肺组织匀浆IL-25测定 | 第30-31页 |
| 4.2.9 Western blot检测蛋白表达 | 第31-33页 |
| 4.2.9.1 肺组织中Occludin蛋白的表达 | 第31-32页 |
| 4.2.9.1.1 蛋白的提取 | 第31页 |
| 4.2.9.1.2 蛋白定量 | 第31-32页 |
| 4.2.9.1.3 蛋白样品制备 | 第32页 |
| 4.2.9.1.4 电泳 | 第32页 |
| 4.2.9.1.5 显色 | 第32页 |
| 4.2.9.2 肺组织中E-cadherin蛋白的表达 | 第32-33页 |
| 4.3 统计学方法 | 第33-34页 |
| 第三章 实验结果 | 第34-47页 |
| 1. 新生期母婴分离对仔鼠肠道菌群及短链脂肪酸的影响 | 第34-39页 |
| 1.1 新生期母婴分离后仔鼠肠道菌群分析 | 第34-38页 |
| 1.1.1 细菌总DNA含量测定及V3区PCR扩增 | 第34页 |
| 1.1.2 DGGE图谱分析 | 第34-38页 |
| 1.2 新生期母婴分离后仔鼠短链脂肪酸含量变化 | 第38-39页 |
| 2. 新生期母婴分离对仔鼠成年后哮喘气道炎症的影响及其机制 | 第39-47页 |
| 2.1 临床表现 | 第39页 |
| 2.2 炎症细胞总数及嗜酸性粒细胞计数 | 第39-40页 |
| 2.3 病理学改变 | 第40-41页 |
| 2.4 炎症因子水平的改变 | 第41-44页 |
| 2.4.1 雄鼠肺组织匀浆中IL-13水平变化 | 第41-42页 |
| 2.4.2 雄鼠肺组织匀浆中IL-33水平变化 | 第42-43页 |
| 2.4.3 雄鼠肺组织匀浆中IL-25水平变化 | 第43-44页 |
| 2.5 气道上皮屏障的改变 | 第44-47页 |
| 2.5.1 气道上皮的病理学改变 | 第44-46页 |
| 2.5.2 气道上皮细胞间连接蛋白的变化 | 第46-47页 |
| 2.5.2.1 肺组织中Occludin蛋白的表达 | 第46页 |
| 2.5.2.2 肺组织中E-cadherin蛋白的表达 | 第46-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-50页 |
| 1. 新生期母婴分离对仔鼠肠道菌群及短链脂肪酸的影响 | 第47页 |
| 2. 新生期母婴分离对仔鼠成年后哮喘气道炎症的影响 | 第47-48页 |
| 3. 新生期母婴分离加重仔鼠成年后哮喘气道炎症可能存在的机制 | 第48-50页 |
| 3.1 新生期母婴分离对哮喘气道上皮屏障的影响 | 第48-49页 |
| 3.2 短链脂肪酸对哮喘气道上皮屏障及气道炎症的影响 | 第49-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 第六章 总结与展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
