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IL-24基因靶向杀伤卵巢癌细胞及其影响化疗药物敏感性的体外实验研究

前言第4-6页
摘要第6-10页
Abstract第10-14页
第1章 综述第20-46页
    第1节 恶性肿瘤的基因靶向治疗第20-34页
        1 目的基因靶向转移的研究第20-27页
        2 目的基因靶向表达的研究第27-31页
        3 RNA干扰第31-33页
        4 小结第33-34页
    第2节 Mda-7/IL-24在肿瘤治疗中的研究进展第34-46页
        1 Mda-7/IL-24概述第34-35页
        2 IL-24在人体内的表达第35-36页
        3 Mda-7/IL-24的抗肿瘤作用第36-41页
        4 增强Mda-7/IL-24的抗肿瘤活性和治疗能力第41-43页
        5 INGN241(Ad.Mda-7)临床研究进展第43-46页
第2章 实验研究第46-91页
    第1节 靶向卵巢癌细胞基因特异性表达载体的建立第46-61页
        1 主要材料与仪器第46-47页
        2 实验方法第47-54页
            2.1 OSP-1启动子基因片段的合成第47-48页
            2.2 pcDNA3.0-OSP-1载体的构建第48-51页
            2.3 重组表达载体pcDNA3.0-OSP-1-β-gal的构建第51-53页
            2.4 OSP-1启动子调控β-gal基因在各组细胞内的表达第53-54页
        3 实验结果第54-58页
            3.1 重组质粒pcDNA3.0-OSP-1的酶切鉴定第54-55页
            3.2 pcDNA3.0-OSP-1载体的测序第55-56页
            3.3 重组质粒pcDNA3.0-OSP-1-β-gal的酶切鉴定第56页
            3.4 构建的表达载体框架第56-57页
            3.5 基因转染细胞的β-gal原位染色第57-58页
        4 讨论第58-61页
    第2节 IL-24靶向特异性杀伤卵巢癌细胞的体外研究第61-83页
        1 主要材料与仪器第61-62页
        2 实验方法第62-72页
            2.1 IL-24基因的RT-PCR扩增第62-64页
            2.2 IL-24基因PCR产物的T载体克隆第64-65页
            2.3 IL-24基因真核表达载体的构建第65-66页
            2.4 OSP-1启动子调控IL-24基因表达载体的构建第66-68页
            2.5 质粒载体的细胞转染第68页
            2.6 细胞生长曲线的测定第68-69页
            2.7 IL-24基因在各组细胞内mRNA水平表达的检测第69-70页
            2.8 细胞培养上清中IL-24含量的检测第70-71页
            2.9 细胞周期的检测第71页
            2.10 IL-24基因转染SKOV3细胞培养上清对SKOV3细胞生长影响的检测第71-72页
            2.11 统计数分析第72页
        3 实验结果第72-80页
            3.1 IL-24基因cDNA的PCR扩增第72页
            3.2 pMD-18T-IL-24载体的酶切鉴定第72-73页
            3.3 pMD-18T-IL-24载体的测序第73页
            3.4 重组质粒pcDNA3.0-IL-24的酶切鉴定第73-74页
            3.5 重组质粒pcDNA3.0-OSP-1-IL-24的酶切鉴定第74-75页
            3.6 构建的表达载体框架第75页
            3.7 基因转染细胞的生长曲线第75-76页
            3.8 IL-24基因在各组细胞内mRNA水平表达的检测第76-77页
            3.9 基因转染细胞培养上清IL-24蛋白的ELISA检测第77-78页
            3.10 基因转染SKOV3细胞周期的检测第78-80页
            3.11 IL-24基因转染SKOV3细胞的培养上清对于SKOV3细胞的生长抑制第80页
        4 讨论第80-83页
    第3节 IL-24对SKOV3细胞化疗药物敏感性影响的研究第83-91页
        1 主要材料与仪器第83-84页
        2 实验方法第84-86页
            2.1 MTT方法检测化疗药物对细胞的杀伤作用第84页
            2.2 基因表达的实时荧光定量PCR检测第84-86页
            2.3 统计分析第86页
        3 实验结果第86-88页
            3.1 两种化疗药物对各组SKOV3细胞的生长抑制作用第86-87页
            3.2 两种化疗药物抑制细胞增殖的IC50%计算第87页
            3.3 实时荧光定量PCR基因检测ERCC1基因、TUBB3基因在细胞中的mRNA水平表达第87-88页
        4 讨论第88-91页
第3章 结论第91-92页
参考文献第92-113页
附图第113-115页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第115-116页
致谢第116页

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