摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 绪论 | 第10-17页 |
1.1 引言 | 第10-11页 |
1.2 立题依据 | 第11-15页 |
1.2.1 昆虫的生物防御系统 | 第11-12页 |
1.2.2 莱氏野村菌研究进展 | 第12-13页 |
1.2.3 14-3-3ζ基因的研究进展 | 第13-15页 |
1.3 研究目的 | 第15页 |
1.4 研究内容和技术路线 | 第15-16页 |
1.4.1 研究内容 | 第15-16页 |
1.4.2 技术路线 | 第16页 |
1.5 本研究创新之处 | 第16-17页 |
2 斜纹夜蛾 14-3-3ζ基因全长克隆以及序列分析 | 第17-34页 |
2.1 主要材料 | 第17-18页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第17页 |
2.1.2 主要试验试剂和试剂盒 | 第17页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第17-18页 |
2.1.4 主要培养基及溶液的配制 | 第18页 |
2.1.5 所用生物信息学分析网址及软件 | 第18页 |
2.2 主要试验方法 | 第18-25页 |
2.2.1 SpL14-3-3ζ基因的 cDNA 克隆测序 | 第18-23页 |
2.2.2 SpL14-3-3ζ基因的测通 | 第23-24页 |
2.2.3 SpL14-3-3ζ基因的生物信息学分析 | 第24页 |
2.2.4 SpL14-3-3ζ基因组扩增 | 第24-25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-34页 |
2.3.1 SpL14-3-3ζ基因 3’/5’RACE 的扩增 | 第25页 |
2.3.2 SpL14-3-3ζ基因组克隆和序列分析 | 第25-27页 |
2.3.3 14-3-3ζ蛋白生物信息学分析 | 第27-34页 |
3 斜纹夜蛾 14-3-3ζ基因表达谱分析 | 第34-42页 |
3.1 主要材料 | 第34页 |
3.1.1 供试昆虫和试验菌株 | 第34页 |
3.1.2 主要试验试剂及试剂盒 | 第34页 |
3.1.3 主要设备及仪器 | 第34页 |
3.1.4 主要培养基及溶液的配制 | 第34页 |
3.2 主要试验方法 | 第34-38页 |
3.2.1 qPCR 引物设计 | 第34-35页 |
3.2.2 SpL14-3-3ζ基因表达谱取材 | 第35-36页 |
3.2.3 SpL14-3-3ζ基因表达谱分析总 RNA 提取以及 cDNA 制备 | 第36页 |
3.2.4 qPCR 在 mRNA 水平检测 SpL14-3-3ζ的表达量 | 第36-37页 |
3.2.5 qPCR 数据处理 | 第37-38页 |
3.3 结果与分析 | 第38-42页 |
3.3.1 mRNA 水平不同发育时期 SpL14-3-3ζ基因的表达谱分析 | 第38页 |
3.3.2 mRNA 水平不同组织器官中 SpL14-3-3ζ基因的表达谱分析 | 第38-39页 |
3.3.3 SpL14-3-3ζ基因在莱氏野村菌侵染后各组织器官的诱导表达 | 第39-40页 |
3.3.4 SpL14-3-3ζ基因经莱氏野村菌侵染后特定组织不同时期的诱导表达 | 第40-42页 |
4 斜纹夜蛾 14-3-3ζ基因 RNA 干扰 | 第42-49页 |
4.1 试验材料 | 第42页 |
4.1.1 供试昆虫及试验菌株 | 第42页 |
4.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第42页 |
4.1.3 主要设备仪器 | 第42页 |
4.1.4 主要培养溶液及的配制 | 第42页 |
4.2 主要试验方法 | 第42-45页 |
4.2.1 dsRNA 的合成 | 第42-44页 |
4.2.2 注射 | 第44-45页 |
4.2.3 qPCR 检验 RNA 干扰效率 | 第45页 |
4.2.4 生测试验 | 第45页 |
4.2.5 数据处理 | 第45页 |
4.3 结果与分析 | 第45-49页 |
4.3.1 SpL14-3-3ζ基因 RNA 干扰效率检测 | 第45-46页 |
4.3.2 表型观察 | 第46-47页 |
4.3.3 生测 | 第47-49页 |
5 讨论 | 第49-52页 |
5.1 SpL14-3-3ζ基因的克隆 | 第49页 |
5.2 SpL14-3-3ζ基因表达模式 | 第49-50页 |
5.3 SpL14-3-3ζ基因 RNA 干扰 | 第50-52页 |
6 结论与展望 | 第52-53页 |
6.1 主要研究结论 | 第52页 |
6.2 后续试验建议 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录 | 第61页 |
A. 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第61页 |
B. 作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第61页 |