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斜纹夜蛾SpL14-3-3ζ基因的克隆、表达及其对莱氏野村菌侵染相关功能的研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
1 绪论第10-17页
    1.1 引言第10-11页
    1.2 立题依据第11-15页
        1.2.1 昆虫的生物防御系统第11-12页
        1.2.2 莱氏野村菌研究进展第12-13页
        1.2.3 14-3-3ζ基因的研究进展第13-15页
    1.3 研究目的第15页
    1.4 研究内容和技术路线第15-16页
        1.4.1 研究内容第15-16页
        1.4.2 技术路线第16页
    1.5 本研究创新之处第16-17页
2 斜纹夜蛾 14-3-3ζ基因全长克隆以及序列分析第17-34页
    2.1 主要材料第17-18页
        2.1.1 供试昆虫第17页
        2.1.2 主要试验试剂和试剂盒第17页
        2.1.3 主要仪器设备第17-18页
        2.1.4 主要培养基及溶液的配制第18页
        2.1.5 所用生物信息学分析网址及软件第18页
    2.2 主要试验方法第18-25页
        2.2.1 SpL14-3-3ζ基因的 cDNA 克隆测序第18-23页
        2.2.2 SpL14-3-3ζ基因的测通第23-24页
        2.2.3 SpL14-3-3ζ基因的生物信息学分析第24页
        2.2.4 SpL14-3-3ζ基因组扩增第24-25页
    2.3 结果与分析第25-34页
        2.3.1 SpL14-3-3ζ基因 3’/5’RACE 的扩增第25页
        2.3.2 SpL14-3-3ζ基因组克隆和序列分析第25-27页
        2.3.3 14-3-3ζ蛋白生物信息学分析第27-34页
3 斜纹夜蛾 14-3-3ζ基因表达谱分析第34-42页
    3.1 主要材料第34页
        3.1.1 供试昆虫和试验菌株第34页
        3.1.2 主要试验试剂及试剂盒第34页
        3.1.3 主要设备及仪器第34页
        3.1.4 主要培养基及溶液的配制第34页
    3.2 主要试验方法第34-38页
        3.2.1 qPCR 引物设计第34-35页
        3.2.2 SpL14-3-3ζ基因表达谱取材第35-36页
        3.2.3 SpL14-3-3ζ基因表达谱分析总 RNA 提取以及 cDNA 制备第36页
        3.2.4 qPCR 在 mRNA 水平检测 SpL14-3-3ζ的表达量第36-37页
        3.2.5 qPCR 数据处理第37-38页
    3.3 结果与分析第38-42页
        3.3.1 mRNA 水平不同发育时期 SpL14-3-3ζ基因的表达谱分析第38页
        3.3.2 mRNA 水平不同组织器官中 SpL14-3-3ζ基因的表达谱分析第38-39页
        3.3.3 SpL14-3-3ζ基因在莱氏野村菌侵染后各组织器官的诱导表达第39-40页
        3.3.4 SpL14-3-3ζ基因经莱氏野村菌侵染后特定组织不同时期的诱导表达第40-42页
4 斜纹夜蛾 14-3-3ζ基因 RNA 干扰第42-49页
    4.1 试验材料第42页
        4.1.1 供试昆虫及试验菌株第42页
        4.1.2 主要试剂及试剂盒第42页
        4.1.3 主要设备仪器第42页
        4.1.4 主要培养溶液及的配制第42页
    4.2 主要试验方法第42-45页
        4.2.1 dsRNA 的合成第42-44页
        4.2.2 注射第44-45页
        4.2.3 qPCR 检验 RNA 干扰效率第45页
        4.2.4 生测试验第45页
        4.2.5 数据处理第45页
    4.3 结果与分析第45-49页
        4.3.1 SpL14-3-3ζ基因 RNA 干扰效率检测第45-46页
        4.3.2 表型观察第46-47页
        4.3.3 生测第47-49页
5 讨论第49-52页
    5.1 SpL14-3-3ζ基因的克隆第49页
    5.2 SpL14-3-3ζ基因表达模式第49-50页
    5.3 SpL14-3-3ζ基因 RNA 干扰第50-52页
6 结论与展望第52-53页
    6.1 主要研究结论第52页
    6.2 后续试验建议第52-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-61页
附录第61页
    A. 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第61页
    B. 作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目第61页

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