| 中文摘要 | 第5-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 英文缩写词表 | 第18-21页 |
| 引言 | 第21-23页 |
| 第1章 文献综述 | 第23-39页 |
| 1.1 肝细胞癌的发生与发展 | 第23-32页 |
| 1.1.1 肝细胞癌 | 第23-24页 |
| 1.1.2 抑癌基因失活 | 第24-27页 |
| 1.1.3 原癌基因激活 | 第27-28页 |
| 1.1.4 信号通路持续激活 | 第28-31页 |
| 1.1.5 生长因子和其受体 | 第31-32页 |
| 1.2 GRIM-19 基因与肿瘤研究进展 | 第32-39页 |
| 1.2.1 GRIM-19 基因的发现、结构及分布 | 第32-33页 |
| 1.2.2 GRIM-19 基因在恶性肿瘤中突变或表达减少 | 第33页 |
| 1.2.3 GRIM-19 基因抑制肿瘤生长、转移及其机制 | 第33-39页 |
| 第2章 材料和方法 | 第39-55页 |
| 2.1 GRIM-19 蛋白在人原发肝细胞癌中的表达及临床意义 | 第39-41页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第39页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 2.1.3 组织标本来源 | 第39-40页 |
| 2.1.4 免疫组织化学染色原位检测 GRIM-19 蛋白表达 | 第40-41页 |
| 2.1.5 统计学分析 | 第41页 |
| 2.2 过表达 GRIM-19 对人肝癌细胞增殖及转移的影响 | 第41-51页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第41-42页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第42-44页 |
| 2.2.3 细胞株、质粒及慢病毒包装系统 | 第44页 |
| 2.2.4 实验分组 | 第44页 |
| 2.2.5 稳定表达 GRIM-19 的 SMMC-7721 细胞株建立 | 第44-45页 |
| 2.2.6 GRIM-19 基因引物设计 | 第45页 |
| 2.2.7 RT-PCR 检测 mRNA 表达 | 第45-47页 |
| 2.2.8 Western blot 检测蛋白表达 | 第47-49页 |
| 2.2.9 免疫荧光细胞化学染色检测蛋白表达 | 第49-50页 |
| 2.2.10 MTT 法检测细胞增殖 | 第50页 |
| 2.2.11 流式细胞术检测细胞周期 | 第50页 |
| 2.2.12 JC-1 染色检测线粒体膜电位（ψm） | 第50页 |
| 2.2.13 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第50-51页 |
| 2.2.14 统计学分析 | 第51页 |
| 2.3 过表达 GRIM-19 对肝细胞癌原位移植瘤增殖及转移的影响 | 第51-55页 |
| 2.3.1 主要仪器 | 第51页 |
| 2.3.2 主要试剂 | 第51页 |
| 2.3.3 细胞及实验动物 | 第51页 |
| 2.3.4 菌株与质粒 | 第51-52页 |
| 2.3.5 实验分组 | 第52页 |
| 2.3.6 H22 肝细胞癌原位移植瘤模型的建立及给药处理 | 第52-53页 |
| 2.3.7 原位移植瘤标本的处理 | 第53页 |
| 2.3.8 Western blot 检测蛋白表达 | 第53页 |
| 2.3.9 流式细胞术检测移植瘤的细胞周期 | 第53-54页 |
| 2.3.10 免疫组织化学染色原位检测移植瘤组织中蛋白表达 | 第54页 |
| 2.3.11 Annexin V-FITC/PI 流式细胞术检测移植瘤细胞凋亡 | 第54页 |
| 2.3.12 TUNEL 染色检测移植瘤细胞凋亡 | 第54页 |
| 2.3.13 统计分析 | 第54-55页 |
| 第3章 实验结果 | 第55-79页 |
| 3.1 GRIM-19 蛋白在人肝细胞癌中的表达及临床意义 | 第55-57页 |
| 3.1.1 人肝细胞癌和癌旁组织中 GRIM-19 蛋白表达水平比较 | 第55-56页 |
| 3.1.2 GRIM-19 蛋白在肝细胞癌中表达水平与临床病理指标的相关性 | 第56-57页 |
| 3.2 过表达 GRIM-19 对人肝癌细胞增殖及转移影响的体外研究 | 第57-66页 |
| 3.2.1 建立稳定表达 GRIM-19 的肝癌细胞株 | 第57页 |
| 3.2.2 过表达 GRIM-19 对肝癌细胞增殖的影响 | 第57-58页 |
| 3.2.3 过表达 GRIM-19 对肝癌细胞周期的影响 | 第58-59页 |
| 3.2.4 过表达 GRIM-19 对肝癌细胞周期相关蛋白表达的影响 | 第59-60页 |
| 3.2.5 过表达 GRIM-19 对肝癌细胞线粒体膜电位的影响 | 第60-61页 |
| 3.2.6 过表达 GRIM-19 对肝癌细胞凋亡的影响 | 第61-62页 |
| 3.2.7 过表达 GRIM-19 对肝癌细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第62-64页 |
| 3.2.8 过表达 GRIM-19 对肝癌细胞转移相关蛋白表达的影响 | 第64-65页 |
| 3.2.9 过表达 GRIM-19 对肝细胞癌相关信号通路的影响 | 第65-66页 |
| 3.3 过表达 GRIM-19 对肝细胞癌原位移植瘤增殖及转移影响的体内研究 | 第66-79页 |
| 3.3.1 过表达 GRIM-19 对移植瘤增殖及腹腔转移的影响 | 第66-70页 |
| 3.3.2 过表达 GRIM-19 对移植瘤细胞周期的影响 | 第70-71页 |
| 3.3.3 过表达 GRIM-19 对移植瘤细胞周期相关蛋白表达的影响 | 第71-72页 |
| 3.3.4 过表达 GRIM-19 对移植瘤细胞凋亡的影响 | 第72-74页 |
| 3.3.5 过表达 GRIM-19 对移植瘤凋亡相关蛋白表达的影响 | 第74-75页 |
| 3.3.6 过表达 GRIM-19 对移植瘤转移相关蛋白表达的影响 | 第75-76页 |
| 3.3.7 过表达 GRIM-19 对移植瘤相关信号通路的影响 | 第76-79页 |
| 第4章 讨论 | 第79-85页 |
| 第5章 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-109页 |
| 作者简介 | 第109-111页 |
| 博士期间所取得的科研成果 | 第111-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
