| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 引言 | 第10-17页 |
| 一. 病毒感染疾病及其危害性 | 第10-11页 |
| 二. 模式识别与Ⅰ型干扰素的诱导 | 第11-13页 |
| 三. 胞外核苷酸与危险信号 | 第13-15页 |
| 四. 胞外核苷酸受体家族 | 第15-16页 |
| 五. 本研究的目的、内容及意义 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-40页 |
| 一. 主要研究内容 | 第17-19页 |
| 1. 研究流程和技术路线示意图 | 第17-18页 |
| 2. 研究工作内容 | 第18-19页 |
| 二. 实验材料 | 第19-22页 |
| 1. 实验细胞 | 第19页 |
| 2. 主要试剂与试剂盒 | 第19-20页 |
| 3. 主要实验仪器 | 第20页 |
| 4. 主要溶液配制 | 第20-22页 |
| 三. 实验方法 | 第22-40页 |
| 1. 荧光定量PCR和RT-PCR | 第22-25页 |
| 2. 细胞增殖实验(MTS) | 第25-26页 |
| 3. 免疫印迹实验(Western Blotting) | 第26-27页 |
| 4. 脂质体转染与荧光素酶报告基因实验(Luciferase assay) | 第27-29页 |
| 5. 载体构建实验(Vector construct) | 第29-31页 |
| 6. 定点突变实验 | 第31页 |
| 7. 慢病毒包装及稳转株筛选实验 | 第31-33页 |
| 8. 干扰素介导的抗病毒活性测量实验(结晶紫染色法) | 第33-34页 |
| 9. 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第34页 |
| 10. GFP-慢病毒包装及感染实验 | 第34-36页 |
| 11. 流式细胞仪检测细胞凋亡技术(Annexin V/PI双染色法) | 第36页 |
| 12. 荧光偏振实验检测UDP释放(Transcreener UDP~2 FP Assay)实验 | 第36-37页 |
| 13. VSV病毒扩增及滴度测定实验 | 第37-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-64页 |
| 一. VSV感染与UDP释放及P2Y_6表达之间的关系 | 第40-43页 |
| 1.1 VSV感染上调P2Y_6的表达 | 第40-41页 |
| 1.2 VSV感染促进细胞释放UDP | 第41-42页 |
| 1.3 讨论与小结 | 第42-43页 |
| 二. UDP/P2Y_6提高细胞抗病毒感染能力 | 第43-50页 |
| 2.1 P2Y_6特异性性激动剂UDP和抑制剂MRS2578对细胞的增殖无显著影响 | 第43-45页 |
| 2.2 P2Y_6提高细胞抗VSV病毒及GFP-慢病毒感染的能力 | 第45-46页 |
| 2.3 稳定干扰P2Y_6后L929细胞抗VSV感染能力降低 | 第46-49页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第49-50页 |
| 三. P2Y6激动剂UDP促进细胞分泌干扰素β | 第50-53页 |
| 3.1 UDP直接作用可上调RAW264.7中IFN-β的mRNA表达水平 | 第50页 |
| 3.2 UDP可协同VSV提高IFN-β的产生 | 第50-52页 |
| 3.3 讨论与小结 | 第52-53页 |
| 四. UDP/P2Y_6通过IFN-β提高细胞抗病毒感染的分子机制 | 第53-58页 |
| 4.1 UDP可激活AP-1(ATF-2/c-JUN)相关信号通路 | 第53-55页 |
| 4.2 UDP上调IFN-β的表达依赖于MAPKs/AP-1信号通路 | 第55-57页 |
| 4.3 讨论与小结 | 第57-58页 |
| 五. VSV感染后细胞通过Pannexin和Connexin通道释放UDP | 第58-61页 |
| 5.1 VSV感染引起的UDP释放能够被CBX和FFA抑制 | 第58-59页 |
| 5.2 VSV感染引起凋亡蛋白Caspas-3的激活 | 第59-60页 |
| 5.3 讨论与小结 | 第60-61页 |
| 六. 研究小结与展望 | 第61-64页 |
| 第四章 综述 | 第64-71页 |
| 一. 病毒感染与模式受体 | 第64-65页 |
| 二. Ⅰ型干扰素的诱导及其抗病毒机制 | 第65-66页 |
| 三. 胞外核苷酸及其受体 | 第66-71页 |
| 3.1 对核苷酸生理功能的认识过程 | 第66-67页 |
| 3.2 核苷酸释放机制 | 第67-68页 |
| 3.3 胞外核苷酸代谢 | 第68页 |
| 3.4 胞外核苷酸受体 | 第68-69页 |
| 3.5 胞外核苷酸的免疫调控功能 | 第69-71页 |
| 第五章 参考文献 | 第71-75页 |
| 附录Ⅰ 缩略词 | 第75-77页 |
| 附录Ⅱ 攻读硕士学位期间科研工作成果 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
