| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-24页 |
| 1.1 课题的提出 | 第13-14页 |
| 1.2 滞绿的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 滞绿的定义及类型 | 第14-15页 |
| 1.2.2 典型的滞绿突变体 | 第15-17页 |
| 1.2.2.1 水稻nyc1突变体 | 第15-16页 |
| 1.2.2.2 柑橘nan突变体 | 第16页 |
| 1.2.2.3 拟南芥pph突变体 | 第16-17页 |
| 1.3 叶绿素降解研究进展 | 第17-21页 |
| 1.3.1 叶绿素的结构和性质 | 第17页 |
| 1.3.2 叶绿素的降解途径 | 第17-21页 |
| 1.3.2.1 叶绿素b到叶绿素a的还原反应 | 第18页 |
| 1.3.2.2 脱植基和脱镁反应 | 第18-19页 |
| 1.3.2.3 开环反应及pFCC的修饰 | 第19-21页 |
| 1.4 PAO的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4.1 PAO的结构和功能 | 第21页 |
| 1.4.2 PAO的克隆及调控 | 第21-22页 |
| 1.5 植物启动子的研究 | 第22-23页 |
| 1.5.1 植物启动子的结构和特征 | 第22-23页 |
| 1.5.2 植物启动子的类型 | 第23页 |
| 1.6 本研究的目的和内容 | 第23-24页 |
| 2 实验材料和方法 | 第24-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.2 主要试剂及仪器设备 | 第25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.3.1 叶绿素及其代谢产物的提取和测定 | 第25-27页 |
| 2.3.1.1 叶绿素及其代谢产物的提取步骤 | 第25-26页 |
| 2.3.1.2 叶绿素及其代谢产物的检测方法 | 第26-27页 |
| 2.3.2 柑橘PAO基因序列分析 | 第27页 |
| 2.3.3 基因克隆 | 第27-29页 |
| 2.3.3.1 总RNA、DNA提取 | 第27页 |
| 2.3.3.2 cDNA合成 | 第27-28页 |
| 2.3.3.3 PCR扩增 | 第28页 |
| 2.3.3.4 回收、转化和测序 | 第28-29页 |
| 2.3.4 实时荧光定量PCR分析 | 第29-31页 |
| 2.3.4.1 实时荧光定量PCR引物设计 | 第29-30页 |
| 2.3.4.2 实时荧光定量PCR检测基因表达 | 第30-31页 |
| 2.3.5 Western杂交 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-48页 |
| 3.1 瓯柑果皮叶绿素含量的变化 | 第31-33页 |
| 3.2 PAO的克隆及序列分析 | 第33-37页 |
| 3.3 PAO及叶绿素降解其他相关基因表达分析 | 第37-39页 |
| 3.4 PAO蛋白表达模式分析 | 第39页 |
| 3.5 PAO启动子的克隆 | 第39-42页 |
| 3.6 生物信息学分析所克隆的启动子序列 | 第42-44页 |
| 3.6.1 序列比对与TSS预测 | 第42页 |
| 3.6.2 顺式作用元件预测 | 第42-44页 |
| 3.6.2.1 PAO启动子顺式作用元件预测 | 第42-43页 |
| 3.6.2.2 叶绿素降解相关基因启动子顺式作用元件预测 | 第43-44页 |
| 3.7 相关转录因子表达分析 | 第44-45页 |
| 3.8 外源激素处理 | 第45-48页 |
| 3.8.1 外源乙烯处理对叶绿素降解相关基因表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.8.2 外源ABA处理对叶绿素降解相关基因表达的影响 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 4.1 PAO在青瓯柑叶绿素降解中的作用 | 第48页 |
| 4.2 温度对叶绿素降解的影响 | 第48-49页 |
| 4.3 ABA对叶绿素降解的影响 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
