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洋桔梗ACC合酶基因的RNA干扰研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
第一章 前言第8-17页
 1 洋桔梗及其切花采后的保鲜第8-12页
   ·洋桔梗简介第8页
   ·洋桔梗切花保鲜研究第8-9页
   ·植物体内乙烯的生物合成及其相关酶类第9-10页
   ·ACC合酶的研究进展第10-12页
 2 RNA干扰的研究背景及应用第12-16页
   ·研究背景第12-13页
   ·RNAi的分子机理第13-14页
   ·RNAi技术与反义RNA技术的比较第14-15页
   ·RNAi在植物基因工程中的应用第15-16页
 3 本研究的思路、目的和意义第16-17页
第二章 干扰载体pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTⅡ的构建及转化根癌农杆菌第17-32页
 1 材料与方法第17-25页
   ·材料第17-19页
   ·方法第19-25页
     ·洋桔梗基因组DNA的提取第19页
     ·载体pCAMBIA1301-gfp-(GUS+X)i-NPTⅡ的扩增和鉴定第19-20页
     ·PCR引物的设计及PCR扩增目的序列第20-21页
     ·目的序列连接装入pMDTM18-T测序第21-22页
     ·PCR扩增目的序列经SapI酶切后装入载体pCAMBIA1301-gfp-(GUS+X)i-NPTⅡ的T-DNA中并测序第22-23页
     ·pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTⅡ转化农杆菌LBA4404第23-24页
     ·重组菌落的鉴定与保存第24-25页
 2 结果与分析第25-32页
   ·洋桔梗基因组DNA的提取第25-26页
   ·载体pCAMBIA1301-gfp-(GUS+X)i-NPTⅡ的扩增和鉴定第26-27页
   ·PCR扩增目的序列第27-28页
   ·pMD~(TM)18-T-ACSi的构建及测序结果第28-29页
   ·PCR扩增目的序列经SapⅠ酶切后装入载体pCAMBIA1301-gfp-(GUS+X)i-NPTⅡ的T-DNA中并测序第29-31页
   ·pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTⅡ转化根癌农杆菌第31-32页
 3 讨论第32页
第三章 根癌农杆菌侵染洋桔梗及转化植株的筛选第32-39页
 1 材料与方法第33-35页
   ·材料第33页
   ·方法第33-35页
     ·农杆菌的活化第33页
     ·农杆菌的培养第33页
     ·叶盘转化法将含pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTⅡ的农杆菌整合入洋桔梗基因组内第33-34页
     ·抗性苗的生根筛选检测第34页
     ·抗性苗的PCR检测第34-35页
 2 结果与分析第35-38页
   ·抗性苗的生根筛选培养第35-37页
   ·抗性苗的PCR检测第37-38页
 3 讨论第38-39页
第四章 洋桔梗组培苗的炼苗移栽研究第39-45页
 1 材料和方法第39-40页
   ·材料第39页
   ·方法第39-40页
     ·移栽方法第39-40页
     ·组培苗移栽时间选取对成活率的影响第40页
     ·移栽株高对开花的影响第40页
     ·实验数据的统计分析第40页
 2 结果与分析第40-43页
   ·组培苗移栽时间选取对成活率的影响第40-41页
   ·移栽株高对开花的影响第41-43页
 3 讨论第43-45页
全文结论第45-46页
参考文献第46-52页
附录第52-72页
 附录1 肝癌组织中Egr1-PRL3-Ezrin信号通路的表达研究第52-61页
 附录2 主要缩略词表第61-62页
 附录3 MS培养基的贮存液配方第62-63页
 附录4 主要试剂的配制方法第63-64页
 附录5 植物基因组DNA提取试剂盒说明第64-65页
 附录6 普通质粒小提试剂盒说明第65-66页
 附录7 DNA胶回收试剂盒说明第66-67页
 附录8 PCR纯化试剂盒说明第67-68页
 附录9 pMDTM18-T-ACSi测序结果第68-72页
致谢第72页

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