| 中文摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 英文缩略词（Abbreviation） | 第17-20页 |
| 前言 | 第20-25页 |
| 第一部分 新藤黄酸诱导人鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡的研究 | 第25-34页 |
| 1 实验材料及仪器 | 第25-27页 |
| 1.1 细胞株 | 第25页 |
| 1.2 药物 | 第25页 |
| 1.3 主要试剂 | 第25页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| 1.5 主要仪器 | 第26-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.1 细胞培养和传代 | 第27页 |
| 2.2 细胞冻存和复苏 | 第27页 |
| 2.2.1 细胞冻存 | 第27页 |
| 2.2.2 细胞复苏 | 第27页 |
| 2.3 细胞分组与计数 | 第27-28页 |
| 2.4 GNA对CNE-2Z细胞的敏感性实验（MTT法） | 第28页 |
| 2.5 倒置显微镜观察GNA作用CNE-2Z细胞后形态的变化 | 第28页 |
| 2.6 细胞凋亡的形态学检测 | 第28页 |
| 2.6.1 DAPI荧光染色 | 第28页 |
| 2.6.2 Annexin V-FITC/PI荧光染色 | 第28页 |
| 2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡率（Annexin V-FITC/PI） | 第28-29页 |
| 2.8 统计处理方法 | 第29页 |
| 3 实验结果 | 第29-32页 |
| 3.1 GNA对CNE-2Z细胞敏感性的影响 | 第29页 |
| 3.2 GNA对CNE-2Z细胞形态的影响 | 第29-30页 |
| 3.3 DAPI荧光染色后观察CNE-2Z细胞凋亡的变化 | 第30-31页 |
| 3.4 AV/PI荧光染色后观察CNE-2Z细胞凋亡的变化 | 第31页 |
| 3.5 流式细胞仪检测CNE-2Z细胞凋亡率的变化 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 5 小结 | 第33-34页 |
| 第二部分 新藤黄酸对CNE-2Z细胞VSOR Cl-电流的影响 | 第34-43页 |
| 1 实验材料及仪器 | 第34-35页 |
| 1.1 细胞株 | 第34页 |
| 1.2 药物 | 第34页 |
| 1.3 主要试剂 | 第34页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第34-35页 |
| 1.5 主要仪器 | 第35页 |
| 2 实验方法 | 第35-37页 |
| 2.1 细胞复苏、冻存、培养、传代 | 第35页 |
| 2.2 细胞分组与计数 | 第35-36页 |
| 2.2.1 细胞分组 | 第35-36页 |
| 2.2.2 细胞计数 | 第36页 |
| 2.3 膜片钳实验 | 第36-37页 |
| 2.3.1 检测GNA作用CNE-2Z细胞后的电流 | 第36页 |
| 2.3.2 检测非特异氯离子通道阻滞剂（DIDS）作用CNE-2Z细胞后的电流 | 第36页 |
| 2.3.3 检测特异性VSOR Cl-通道阻滞剂（DCPIB）作用CNE-2Z细胞后的电流 | 第36-37页 |
| 2.4 氯离子荧光探针实验（MQAE） | 第37页 |
| 2.5 统计处理方法 | 第37页 |
| 3 实验结果 | 第37-41页 |
| 3.1GNA对CNE-2Z细胞电流的影响 | 第37-38页 |
| 3.2 非特异氯离子通道阻滞剂（DIDS）对GNA作用后电流的影响 | 第38-39页 |
| 3.3 特异性VSOR Cl-通道阻滞剂（DCPIB）对GNA作用后电流的影响 | 第39页 |
| 3.4 GNA对CNE-2Z细胞内氯离子浓度的影响 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41页 |
| 5 小结 | 第41-43页 |
| 第三部分VSOR Cl- 通道对GNA诱导的CNE-2Z细胞凋亡的作用及分子机制研究 | 第43-60页 |
| 1 实验材料及仪器 | 第43-45页 |
| 1.1 细胞株 | 第43页 |
| 1.2 药物 | 第43页 |
| 1.3 主要试剂 | 第43-44页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第44页 |
| 1.5 主要仪器 | 第44-45页 |
| 2 实验方法 | 第45-49页 |
| 2.1 细胞复苏、冻存、培养、传代 | 第45页 |
| 2.2 细胞分组与计数 | 第45页 |
| 2.2.1 细胞分组 | 第45页 |
| 2.2.2 细胞计数 | 第45页 |
| 2.3 MTT法检测DIDS、DCPIB对CNE-2Z细胞的敏感性 | 第45-46页 |
| 2.4 细胞凋亡的形态学检测 | 第46页 |
| 2.4.1 DAPI荧光染色 | 第46页 |
| 2.4.2 Annexin V-FITC/PI荧光染色 | 第46页 |
| 2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡率（Annexin V-FITC/PI） | 第46页 |
| 2.6 ClC-3 siRNA实验 | 第46-47页 |
| 2.6.1 细胞转染 | 第46-47页 |
| 2.6.2 荧光检测转染率 | 第47页 |
| 2.6.3 流式细胞仪检测转染率 | 第47页 |
| 2.7 Western blotting法检测ClC-3 氯通道蛋白以及内质网相关蛋白（GRP78、ATF4、CHOP）表达水平 | 第47-49页 |
| 2.7.1 蛋白样品制备 | 第47页 |
| 2.7.2 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第47-49页 |
| 2.8 统计处理方法 | 第49页 |
| 3 实验结果 | 第49-57页 |
| 3.1 DIDS、DCPIB对CNE-2Z细胞存活率的影响 | 第49-50页 |
| 3.2 DAPI荧光染色后观察CNE-2Z细胞凋亡的变化 | 第50-51页 |
| 3.3 AV/PI荧光染色后观察CNE-2Z细胞凋亡的变化 | 第51页 |
| 3.4 流式细胞仪检测CNE-2Z细胞凋亡率的变化 | 第51-52页 |
| 3.5 ClC-3 siRNA转染CNE-2Z细胞的转染率 | 第52-53页 |
| 3.6 ClC-3 siRNA特异性抑制CNE-2Z细胞ClC-3 氯通道蛋白的表达 | 第53-54页 |
| 3.7 DAPI荧光染色后观察ClC-3 siRNA后CNE-2Z细胞的变化 | 第54-55页 |
| 3.8 DIDS和DCPIB对CNE-2Z细胞内质网相关蛋白的影响 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 5 小结 | 第59-60页 |
| 总结 | 第60-62页 |
| 实验路线图 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 综述 | 第69-76页 |
| 综述参考文献 | 第73-76页 |
| 附录 | 第76页 |
| 硕士期间发表的科研论文 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
