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测定Mn AOS新方法及重组蛋白CueO体外氧化Mn(Ⅱ)/Mn(Ⅲ)的特性探究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略语表第10-11页
1 前言第11-25页
    1.1 自然界中锰的分布及存在形态第11-12页
    1.2 锰的地球化学作用与生理功能第12-13页
    1.3 自然界中锰氧化物的来源第13页
    1.4 生物氧化锰的意义第13-14页
    1.5 锰平均氧化度的测定方法第14-16页
        1.5.1 草酸还原-高锰酸钾返滴定法第14-15页
        1.5.2 碘代法第15页
        1.5.3 电势滴定法第15-16页
        1.5.4 光谱法第16页
    1.6 LBB与甲醛肟比色法相关概述第16-17页
    1.7 生物氧化锰的作用机制第17-19页
    1.8 锰氧化相关酶类研究进展第19-22页
        1.8.1 多铜氧化酶第19-21页
        1.8.2 多铜氧化酶CueO第21-22页
    1.9 DFOB相关概述第22-23页
    1.10 研究的目的及意义第23-25页
2 实验材料与方法第25-36页
    2.1 实验材料第25-28页
        2.1.1 实验试剂与耗材第25页
        2.1.2 主要培养基及溶液的配制第25-27页
        2.1.3 菌株、质粒和引物第27-28页
        2.1.4 实验仪器第28页
    2.2 实验方法第28-36页
        2.2.1 锰矿的合成第28-29页
        2.2.2 粉末X射线衍射(XRD)分析第29页
        2.2.3 样品元素分析和草酸-还原高锰酸钾返滴定法第29-30页
        2.2.4 X射线吸收近边结构光谱(XANES)第30页
        2.2.5 新颖两步比色法第30-31页
        2.2.6 大肠杆菌MG1655中cueO基因的克隆第31-33页
        2.2.7 多铜氧化酶CueO的异源表达和亲和纯化第33页
        2.2.8 样品处理及SDS-PAGE电泳第33页
        2.2.9 低锰溶液体系下检测重组蛋白CueO的锰氧化活性第33-34页
        2.2.10 不同浓度Na_4P_2O_7对CueO蛋白氧化Mn(Ⅱ)的影响第34页
        2.2.11 检测Mn(Ⅲ)-DFOB的特征峰与绘制A_(310)-Mn(Ⅲ)标准曲线第34页
        2.2.12 DFOB对锰自氧化的影响第34-35页
        2.2.13 CueO蛋白体外氧化Mn(Ⅱ)的特性探究第35页
        2.2.14 CueO蛋白体外氧化Mn(Ⅲ)的特性探究第35-36页
3 结果和分析第36-51页
    3.1 新颖两步比色法快速测定锰平均氧化度第36-42页
        3.1.1 粉末X射线衍射(XRD)图谱第36页
        3.1.2 草酸-还原高锰酸钾返滴定法第36-37页
        3.1.3 水羟锰矿、黑锰矿和酸性水钠锰矿Mn K边XANES图谱第37-39页
        3.1.4 新颖两步比色法第39-41页
        3.1.5 讨论第41页
        3.1.6 小结第41-42页
    3.2 CueO蛋白体外氧化Mn(Ⅱ)/Mn(Ⅲ)机制探究第42-51页
        3.2.1 大肠杆菌MG1655中cueO基因的克隆和载体构建第42-43页
        3.2.2 CueO蛋白的表达纯化第43页
        3.2.3 低锰溶液体系下检测重组蛋白CueO的锰氧化活性第43-44页
        3.2.4 不同浓度Na4P2O7对CueO蛋白锰氧化活性的影响第44-45页
        3.2.5 A_(310)-Mn(Ⅲ)、A620-Mn(Ⅲ)标准曲线的绘制第45-46页
        3.2.6 DFOB对锰自氧化的影响第46-47页
        3.2.7 CueO蛋白体外氧化Mn(Ⅱ)的特性探究第47-48页
        3.2.8 CueO蛋白体外氧化Mn(Ⅲ)的特性探究第48-49页
        3.2.9 讨论第49-51页
        3.2.10 小结第51页
4 总结和展望第51-54页
    4.1 总结第51-53页
    4.2 展望第53-54页
参考文献第54-60页
致谢第60-61页

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