摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-25页 |
1.1 自然界中锰的分布及存在形态 | 第11-12页 |
1.2 锰的地球化学作用与生理功能 | 第12-13页 |
1.3 自然界中锰氧化物的来源 | 第13页 |
1.4 生物氧化锰的意义 | 第13-14页 |
1.5 锰平均氧化度的测定方法 | 第14-16页 |
1.5.1 草酸还原-高锰酸钾返滴定法 | 第14-15页 |
1.5.2 碘代法 | 第15页 |
1.5.3 电势滴定法 | 第15-16页 |
1.5.4 光谱法 | 第16页 |
1.6 LBB与甲醛肟比色法相关概述 | 第16-17页 |
1.7 生物氧化锰的作用机制 | 第17-19页 |
1.8 锰氧化相关酶类研究进展 | 第19-22页 |
1.8.1 多铜氧化酶 | 第19-21页 |
1.8.2 多铜氧化酶CueO | 第21-22页 |
1.9 DFOB相关概述 | 第22-23页 |
1.10 研究的目的及意义 | 第23-25页 |
2 实验材料与方法 | 第25-36页 |
2.1 实验材料 | 第25-28页 |
2.1.1 实验试剂与耗材 | 第25页 |
2.1.2 主要培养基及溶液的配制 | 第25-27页 |
2.1.3 菌株、质粒和引物 | 第27-28页 |
2.1.4 实验仪器 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-36页 |
2.2.1 锰矿的合成 | 第28-29页 |
2.2.2 粉末X射线衍射(XRD)分析 | 第29页 |
2.2.3 样品元素分析和草酸-还原高锰酸钾返滴定法 | 第29-30页 |
2.2.4 X射线吸收近边结构光谱(XANES) | 第30页 |
2.2.5 新颖两步比色法 | 第30-31页 |
2.2.6 大肠杆菌MG1655中cueO基因的克隆 | 第31-33页 |
2.2.7 多铜氧化酶CueO的异源表达和亲和纯化 | 第33页 |
2.2.8 样品处理及SDS-PAGE电泳 | 第33页 |
2.2.9 低锰溶液体系下检测重组蛋白CueO的锰氧化活性 | 第33-34页 |
2.2.10 不同浓度Na_4P_2O_7对CueO蛋白氧化Mn(Ⅱ)的影响 | 第34页 |
2.2.11 检测Mn(Ⅲ)-DFOB的特征峰与绘制A_(310)-Mn(Ⅲ)标准曲线 | 第34页 |
2.2.12 DFOB对锰自氧化的影响 | 第34-35页 |
2.2.13 CueO蛋白体外氧化Mn(Ⅱ)的特性探究 | 第35页 |
2.2.14 CueO蛋白体外氧化Mn(Ⅲ)的特性探究 | 第35-36页 |
3 结果和分析 | 第36-51页 |
3.1 新颖两步比色法快速测定锰平均氧化度 | 第36-42页 |
3.1.1 粉末X射线衍射(XRD)图谱 | 第36页 |
3.1.2 草酸-还原高锰酸钾返滴定法 | 第36-37页 |
3.1.3 水羟锰矿、黑锰矿和酸性水钠锰矿Mn K边XANES图谱 | 第37-39页 |
3.1.4 新颖两步比色法 | 第39-41页 |
3.1.5 讨论 | 第41页 |
3.1.6 小结 | 第41-42页 |
3.2 CueO蛋白体外氧化Mn(Ⅱ)/Mn(Ⅲ)机制探究 | 第42-51页 |
3.2.1 大肠杆菌MG1655中cueO基因的克隆和载体构建 | 第42-43页 |
3.2.2 CueO蛋白的表达纯化 | 第43页 |
3.2.3 低锰溶液体系下检测重组蛋白CueO的锰氧化活性 | 第43-44页 |
3.2.4 不同浓度Na4P2O7对CueO蛋白锰氧化活性的影响 | 第44-45页 |
3.2.5 A_(310)-Mn(Ⅲ)、A620-Mn(Ⅲ)标准曲线的绘制 | 第45-46页 |
3.2.6 DFOB对锰自氧化的影响 | 第46-47页 |
3.2.7 CueO蛋白体外氧化Mn(Ⅱ)的特性探究 | 第47-48页 |
3.2.8 CueO蛋白体外氧化Mn(Ⅲ)的特性探究 | 第48-49页 |
3.2.9 讨论 | 第49-51页 |
3.2.10 小结 | 第51页 |
4 总结和展望 | 第51-54页 |
4.1 总结 | 第51-53页 |
4.2 展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60-61页 |