| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 前言 | 第7-9页 |
| 一 实验材料和方法 | 第9-18页 |
| 第一部分 脐带血CD34(+)CBHSPCs的分离及流式细胞仪检测 | 第9-11页 |
| 1. 实验材料 | 第9-10页 |
| 2. 实验方法 | 第10-11页 |
| 2.1 脐带血CD34(+)CBHSPCs的分离 | 第10-11页 |
| 2.2 流式细胞仪检测 | 第11页 |
| 第二部分 总RNA提取和逆转录反应 | 第11-13页 |
| 1. 实验材料 | 第11-12页 |
| 2. 实验方法 | 第12-13页 |
| 2.1 总RNA提取 | 第12-13页 |
| 2.2 DNasel处理 | 第13页 |
| 2.3 逆转录反应 | 第13页 |
| 第三部分 聚合酶链式反应(PCR) | 第13-15页 |
| 1. 实验材料 | 第13-14页 |
| 2. 实验方法 | 第14-15页 |
| 2.1 PCR反应：57种CYP450基因的初步筛选 | 第14-15页 |
| 2.2 PCR反应：确定阳性表达CYP450基因的引物最佳退火温度 | 第15页 |
| 2.3 切胶回收及DNA测序 | 第15页 |
| 2.4 PCR反应：确定在CD34(+)CBHSPCs中未能检测到的CYP450基因 | 第15页 |
| 第四部分 Real time PCR | 第15-18页 |
| 1. 实验材料 | 第15-16页 |
| 2. 实验方法 | 第16-18页 |
| 2.1 阳性表达的CYP450基因表达水平的初步分析 | 第16-17页 |
| 2.2 标准曲线的制备 | 第17页 |
| 2.3 测定CYP1B1和CYP2R1在CD34(+)CBHSPCs和MNCs中的相对表达量 | 第17-18页 |
| 2.4 统计学方法 | 第18页 |
| 二 实验结果与分析 | 第18-28页 |
| 第一部分 分选CD34(+)细胞及流式细胞仪检测 | 第18-19页 |
| 第二部分 总RNA提取和逆转录反应 | 第19页 |
| 2.1 总RNA提取 | 第19页 |
| 2.2 DNasel处理 | 第19页 |
| 2.3 逆转录反应 | 第19页 |
| 第三部分 PCR扩增及初步鉴定 | 第19-23页 |
| 3.1 PCR反应：57种CYP450基因的初步筛选 | 第19-20页 |
| 3.2 阳性表达CYP450基因的引物的最佳退火温度 | 第20-22页 |
| 3.3 切胶回收及DNA测序 | 第22页 |
| 3.4 PCR反应：在CD34(+)CBHSPCs中未能检测到的CYP450基因 | 第22-23页 |
| 第四部分 real time PCR | 第23-28页 |
| 2.1 阳性表达的CYP450基因表达水平的初步分析 | 第23-26页 |
| 2.2 标准曲线 | 第26-27页 |
| 2.3 CYP1B1和CYP2R1在CD34(+)CBHSPCs和MNCs中的相对表达量 | 第27-28页 |
| 讨论 | 第28-30页 |
| 结论 | 第30页 |
| 参考文献 | 第30-33页 |
| 论文综述 | 第33-45页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 附录 | 第45-53页 |
| 致谢 | 第53-55页 |
| 研宄生简历 | 第55-56页 |
