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PBCA纳米粒载体介导的肝癌HSV-TK/GCV基因治疗的体外实验研究

英文缩写注解第19-21页
前言第21-25页
技术路线第25-26页
第一章 自杀基因治疗质粒pAFP-TK的构建第26-50页
    一、 材料与方法第26-38页
    二、 结果第38-46页
        1 间接免疫荧光证实HepG2细胞内AFP表达阳性,而HeLa细胞内AFP表达阴性第38-39页
        2 Western blot证实HepG2细胞为AFP表达阳性,HeLa细胞为AFP表达阴性第39-40页
        3 pAFP-LUC质粒的构建第40-43页
        4 荧光素酶分析证实AFP增强子序列在AFP阳性与阴性细胞内的作用第43-44页
        5 pAFP-TK质粒的构建第44-46页
    三、 讨论第46-48页
    四、 结论第48-50页
第二章 聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(PBCA-NP)的制备及其与质粒DNA的连接第50-73页
    一、 材料与方法第50-58页
    二、 结果第58-66页
        1 聚氰基丙烯酸正丁酯纳米颗粒(PBCA-NP)的制备及形态粒径的观察检测第58-60页
        2 PBCA-NP与CTAB修饰的PBCA-NP转运体系的细胞毒性分析第60-61页
        3 DNA结合效率分析第61-64页
        4 CTAB修饰的PBCA-NP对质粒DNA的保护作用第64-65页
        5 CTAB修饰的PBCA纳米颗粒基因转运体的体外基因转运效率的分析第65-66页
    三、 讨论第66-71页
    四、 结论第71-73页
第三章 PBCA纳米粒基因转运体介导的pAFP-TK/GCV系统对AFP阳性肝癌基因治疗的体外实验研究第73-93页
    一、 材料与方法第73-79页
    二、 结果第79-88页
        1 间接免疫荧光证实HepG2细胞内AFP表达阳性,而HeLa及3T3细胞内AFP表达阴性第79-81页
        2 Western blot证实HepG2细胞为AFP表达阳性,HeLa及3T3细胞为AFP表达阴性第81页
        3 转染后各细胞系中TK表达的RT-PCR检测第81-82页
        4 MTT法检测细胞对GCV的敏感性第82-84页
        5 GCV呈时间依赖性杀伤AFP阳性肿瘤细胞第84页
        6 MTT结果证实pAFP-TK表达质粒特异性抑制AFP阳性肿瘤细胞HepG2的增殖,而对AFP阴性细胞抑制作用较小第84-86页
        7 旁观者效应第86-87页
        8 GCV可诱导表达TK基因的细胞发生凋亡第87-88页
    三、 讨论第88-91页
    四、 结论第91-93页
总结论第93-94页
参考文献第94-104页
综述第104-126页
致谢第126-127页
攻读学位期间主要的研究成果第127页

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