英文缩写注解 | 第19-21页 |
前言 | 第21-25页 |
技术路线 | 第25-26页 |
第一章 自杀基因治疗质粒pAFP-TK的构建 | 第26-50页 |
一、 材料与方法 | 第26-38页 |
二、 结果 | 第38-46页 |
1 间接免疫荧光证实HepG2细胞内AFP表达阳性,而HeLa细胞内AFP表达阴性 | 第38-39页 |
2 Western blot证实HepG2细胞为AFP表达阳性,HeLa细胞为AFP表达阴性 | 第39-40页 |
3 pAFP-LUC质粒的构建 | 第40-43页 |
4 荧光素酶分析证实AFP增强子序列在AFP阳性与阴性细胞内的作用 | 第43-44页 |
5 pAFP-TK质粒的构建 | 第44-46页 |
三、 讨论 | 第46-48页 |
四、 结论 | 第48-50页 |
第二章 聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(PBCA-NP)的制备及其与质粒DNA的连接 | 第50-73页 |
一、 材料与方法 | 第50-58页 |
二、 结果 | 第58-66页 |
1 聚氰基丙烯酸正丁酯纳米颗粒(PBCA-NP)的制备及形态粒径的观察检测 | 第58-60页 |
2 PBCA-NP与CTAB修饰的PBCA-NP转运体系的细胞毒性分析 | 第60-61页 |
3 DNA结合效率分析 | 第61-64页 |
4 CTAB修饰的PBCA-NP对质粒DNA的保护作用 | 第64-65页 |
5 CTAB修饰的PBCA纳米颗粒基因转运体的体外基因转运效率的分析 | 第65-66页 |
三、 讨论 | 第66-71页 |
四、 结论 | 第71-73页 |
第三章 PBCA纳米粒基因转运体介导的pAFP-TK/GCV系统对AFP阳性肝癌基因治疗的体外实验研究 | 第73-93页 |
一、 材料与方法 | 第73-79页 |
二、 结果 | 第79-88页 |
1 间接免疫荧光证实HepG2细胞内AFP表达阳性,而HeLa及3T3细胞内AFP表达阴性 | 第79-81页 |
2 Western blot证实HepG2细胞为AFP表达阳性,HeLa及3T3细胞为AFP表达阴性 | 第81页 |
3 转染后各细胞系中TK表达的RT-PCR检测 | 第81-82页 |
4 MTT法检测细胞对GCV的敏感性 | 第82-84页 |
5 GCV呈时间依赖性杀伤AFP阳性肿瘤细胞 | 第84页 |
6 MTT结果证实pAFP-TK表达质粒特异性抑制AFP阳性肿瘤细胞HepG2的增殖,而对AFP阴性细胞抑制作用较小 | 第84-86页 |
7 旁观者效应 | 第86-87页 |
8 GCV可诱导表达TK基因的细胞发生凋亡 | 第87-88页 |
三、 讨论 | 第88-91页 |
四、 结论 | 第91-93页 |
总结论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-104页 |
综述 | 第104-126页 |
致谢 | 第126-127页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第127页 |