致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-40页 |
第一章 植物抗虫基因工程研究进展 | 第12-29页 |
1. 苏云金杆菌毒蛋白基因 | 第13-19页 |
1.1 苏云金杆菌的分类及特性 | 第13-15页 |
1.2 苏云金杆菌毒蛋白生物农药 | 第15-17页 |
1.3 苏云金杆菌毒蛋白基因在植物抗虫基因工程上的应用 | 第17-19页 |
2. 蛋白酶抑制剂基因 | 第19-27页 |
2.1 植物蛋白酶抑制剂抗虫机理 | 第19-21页 |
2.2 植物蛋白酶抑制剂种类及特性 | 第21-25页 |
2.3 水稻半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆及遗传转化 | 第25-27页 |
3. 淀粉酶抑制剂基因 | 第27-28页 |
4. 外源凝集素基因 | 第28页 |
5. 植物抗虫基因工程研究动态 | 第28-29页 |
第二章 植物转基因技术及其在桑树上的应用 | 第29-40页 |
1. 植物转基因技术 | 第29-32页 |
1.1 外源基因的种类 | 第29页 |
1.2 外源基因的载体 | 第29-30页 |
1.3 植物遗传转化的种类与方法 | 第30-31页 |
1.4 转化体的筛选与检测 | 第31页 |
1.5 转基因植物的田间释放及其安全性评价 | 第31-32页 |
2. 桑树基因工程研究进展 | 第32-37页 |
2.1 外源基因的种类及特性 | 第32-33页 |
2.2 遗传转化方法 | 第33-34页 |
2.3 桑树转基因研究进展 | 第34-35页 |
2.4 桑树转基因技术存在的问题与对策 | 第35-37页 |
3. 植物抗虫基因工程在桑树害虫防治中的应用前景 | 第37-40页 |
3.1 植物抗虫基因工程的特点 | 第37页 |
3.2 桑树主要害虫的种类及防治现状 | 第37-38页 |
3.3 水稻半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因在桑树害虫防治中的应用前景 | 第38-40页 |
第二部分 试验研究 | 第40-93页 |
第三章 材料与方法 | 第41-58页 |
1. 材料 | 第41页 |
1.1 植物材料 | 第41页 |
1.2 质粒 | 第41页 |
1.3 菌株 | 第41页 |
2. 方法 | 第41-58页 |
2.1 培养基类型与配制 | 第41-42页 |
2.2 DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
2.3 大肠杆菌感受态制备及转化 | 第42-43页 |
2.4 农杆菌介导转化试验 | 第43-45页 |
2.5 基因枪轰击法转化试验 | 第45-47页 |
2.6 转基因苗的检测 | 第47-58页 |
第四章 结果与分析 | 第58-93页 |
1. 农杆菌介导的桑树遗传转化 | 第58-68页 |
1.1 影响桑树叶片不定芽分化的因素 | 第58-63页 |
1.2 供试农杆菌生长曲线的分析 | 第63页 |
1.3 转OC基因Kan抗性苗的获得 | 第63-66页 |
1.4 转化桑苗的检测 | 第66-68页 |
2. 基因枪轰击的桑树遗传转化 | 第68-93页 |
2.1 基因枪轰击参数的变化与遗传转化效率 | 第69-77页 |
2.2 遗传转化植株的获得 | 第77-81页 |
2.3 转化植株的PCR鉴定 | 第81-86页 |
2.4 转化植株的DNA点杂交鉴定 | 第86-87页 |
2.5 转化植株的Southern blotting鉴定 | 第87-89页 |
2.6 转化植株的RNA点杂交鉴定 | 第89-90页 |
2.7 转化植株的Northern blotting鉴定 | 第90-93页 |
结论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-106页 |
Summary | 第106页 |
附录A: 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第108-109页 |
附录B: 常用缓冲液及培养基的配制 | 第109-116页 |
附录C: 本文所用载体图谱 | 第116-117页 |
附录D: 测序报告及基因序列 | 第117-119页 |
附录E: 博士期间形成的主要学术论文目录 | 第119页 |