| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-32页 |
| 1.1 木本植物细胞壁结构 | 第14-15页 |
| 1.1.1 植物初生细胞壁结构 | 第14页 |
| 1.1.2 植物次生细胞壁结构 | 第14-15页 |
| 1.1.3 次生壁形成过程 | 第15页 |
| 1.2 木质素参与的次生壁木质化过程 | 第15-16页 |
| 1.2.1 木质素生物学特性 | 第15-16页 |
| 1.2.2 木质化过程 | 第16页 |
| 1.3 植物体内木质素的类型、组成及分子结构 | 第16-17页 |
| 1.3.1 木质素单体的分布 | 第17页 |
| 1.3.2 木质素单体的生物合成途径 | 第17页 |
| 1.4 影响木质素单体生物合成中几种主要结构酶 | 第17-20页 |
| 1.4.1 PAL、C4H和 4CL | 第17-18页 |
| 1.4.2 C3H、HCT、CSE、CCOAOMT以及CCR、CAD | 第18-20页 |
| 1.4.3 F5H和COMT | 第20页 |
| 1.5 影响次生壁木质化的转录调控网络 | 第20-29页 |
| 1.5.1 一级转录调控网络 | 第20页 |
| 1.5.2 二级转录调控网络 | 第20-21页 |
| 1.5.3 三级转录调控网络 | 第21-29页 |
| 1.6 MYB转录因子参与苯丙烷代谢途径次生产物的合成 | 第29-30页 |
| 1.6.1 黄酮类化合物的种类与功能 | 第29页 |
| 1.6.2 MYB转录因子调控苯丙烷代谢途径上其它化合物的合成 | 第29-30页 |
| 1.7 课题研究目的及意义 | 第30-32页 |
| 第二章 杨树PtoVNS11转录因子对次生壁形成的调控 | 第32-78页 |
| 引言 | 第32页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-36页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第32-33页 |
| 2.1.2 培养基及人工土配置 | 第33页 |
| 2.1.3 菌株和载体 | 第33页 |
| 2.1.4 试剂及仪器设备 | 第33-36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-58页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第36页 |
| 2.2.2 拟南芥实验方法 | 第36-40页 |
| 2.2.3 杨树实验方法 | 第40-50页 |
| 2.2.4 PtoVNS11:GFP融合蛋白在洋葱表皮细胞上的亚细胞定位 | 第50-54页 |
| 2.2.5 酵母单杂交 | 第54-55页 |
| 2.2.6 烟草瞬时侵染共转化 | 第55-57页 |
| 2.2.7 木质素含量测定 | 第57-58页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第58-76页 |
| 2.3.1 PtoVNS11基因的克隆及同源性分析 | 第58-61页 |
| 2.3.2 PtoVNS11基因的组织表达特异性分析 | 第61页 |
| 2.3.3 PtoVNS11亚细胞定位分析 | 第61-62页 |
| 2.3.4 酵母单杂交的转录激活分析 | 第62-64页 |
| 2.3.5 PtoVNS11基因启动子表达特异性分析 | 第64-65页 |
| 2.3.6 PtoVNS11回复拟南芥突变体功能缺陷实验 | 第65-68页 |
| 2.3.7 超表达PtoVNS11拟南芥表型分析 | 第68-69页 |
| 2.3.8 在毛白杨中验证 35S:PtoVNS11基因功能的结果与分析 | 第69-73页 |
| 2.3.9 PtoVNS11对木质素合成的调控方式分析 | 第73-76页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第76-78页 |
| 第三章 杨树PtoMYB156基因的克隆和功能分析 | 第78-102页 |
| 前言 | 第78页 |
| 3.1 实验材料、设备 | 第78页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第78页 |
| 3.1.2 菌株和载体 | 第78页 |
| 3.1.3 试剂及仪器设备 | 第78页 |
| 3.2 实验方法 | 第78-86页 |
| 3.2.1 生物信息学分析 | 第79页 |
| 3.2.2 PtoMYB156组织表达模式检测 | 第79页 |
| 3.2.3 启动子ProPto MYB156:GUS在拟南芥上的报告表达 | 第79-80页 |
| 3.2.4 杨树中过表达PtoMYB156 | 第80-83页 |
| 3.2.5 利用CRISPR/CAS9技术在杨树中敲除PtoMYB156基因 | 第83-85页 |
| 3.2.6 木质素单体含量检测（HPLC） | 第85-86页 |
| 3.2.7 次生壁厚度定量检测 | 第86页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第86-99页 |
| 3.3.1 生物信息学分析 | 第86-88页 |
| 3.3.2 PtoMYB156表达模式分析 | 第88-90页 |
| 3.3.3 PtoMYB156的亚细胞定位分析 | 第90-91页 |
| 3.3.4 PtoMYB156的转录抑制活性验证 | 第91页 |
| 3.3.5 超表达PtoMYB156的转基因杨树形态观察 | 第91-92页 |
| 3.3.6 超表达PtoMYB156杨树的木质素含量测定 | 第92-93页 |
| 3.3.7 超表达PtoMYB156杨树的木质部细胞显微结构观察 | 第93-94页 |
| 3.3.8 Pro35S:PtoMYB156转基因杨树的基因表达检测 | 第94-96页 |
| 3.3.9 PtoMYB156可以通过结合结构基因启动子影响该基因的表达 | 第96-97页 |
| 3.3.10 PtoMYB156基因敲除杨树的木质素测定 | 第97-99页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第99-102页 |
| 第四章 PtoMYB156在影响拟南芥的抗UV-B辐射适应性方面的功能研究 | 第102-118页 |
| 4.1 前言 | 第102-103页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第103页 |
| 4.2.1 植物材料 | 第103页 |
| 4.2.2 主要试剂和药品 | 第103页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第103页 |
| 4.3 实验方法 | 第103-106页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第106-115页 |
| 4.4.1 杨树内源PtoMYB156的表达响应UV-B辐射 | 第106页 |
| 4.4.2 PtoMYB156超表达杨树中苯丙烷代谢产物含量检测 | 第106-107页 |
| 4.4.3 超表达PtoMYB156转基因杨树中黄酮合成相关酶的表达水平的变化 | 第107-108页 |
| 4.4.4 异源超表达PtoMYB156的拟南芥表型和组分分析 | 第108-111页 |
| 4.4.5 转基因拟南芥种子中单宁含量的检测 | 第111页 |
| 4.4.6 超表达PtoMYB156降低拟南芥对UV-B辐射耐受性 | 第111-112页 |
| 4.4.7 超表达PtoMYB156拟南芥植株中抗UV-B辐射相关黄酮苷的检测 | 第112-114页 |
| 4.4.8 转基因拟南芥中黄酮合成途径相关酶基因表达水平分析 | 第114页 |
| 4.4.9 PtoMYB156与杨树中FLS、LAR的启动子瞬时共表达分析 | 第114-115页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第115-118页 |
| 第五章 总结与展望 | 第118-122页 |
| 5.1 研究总结 | 第118-120页 |
| 5.2 创新点 | 第120-121页 |
| 5.3 工作展望 | 第121-122页 |
| 附录 | 第122-126页 |
| 参考文献 | 第126-140页 |
| 致谢 | 第140-142页 |
| 攻读学位期间发表学术成果 | 第142页 |
