| 致谢 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-12页 |
| 摘要（中文） | 第12-14页 |
| 摘要（英文） | 第14页 |
| 第1章 农杆菌介导法禾谷类作物转基因研究进展 | 第17-33页 |
| 1．1 农杆菌介导法植物遗传转化的机理 | 第17-21页 |
| 1．1．1 农杆菌的发现及早期研究 | 第17页 |
| 1．1．2 农杆菌的Ti质粒和Ri质粒 | 第17-19页 |
| 1．1．3 T-DNA转化植物细胞的过程 | 第19-21页 |
| 1．2 农杆菌介导法转基因的基本步骤 | 第21-22页 |
| 1．2．1 转基因载体的构建 | 第21页 |
| 1．2．2 农杆菌与受体组织的共培养 | 第21页 |
| 1．2．3 转化细胞的获得及其植株再生 | 第21-22页 |
| 1．3 农杆菌介导法禾谷类作物遗传转化 | 第22-23页 |
| 1．3．1 农杆菌介导法单子叶植物转基因的早期研究 | 第22页 |
| 1．3．2 农杆菌介导法禾谷类作物转基因的发展 | 第22-23页 |
| 1．4 影响农杆菌介导法禾谷类作物遗传转化的因素 | 第23-27页 |
| 1．4．1 农杆菌及Ti质粒的属性 | 第24-25页 |
| 1．4．2 农杆菌的活化状态 | 第25-26页 |
| 1．4．3 植物愈伤组织的生理生化特性 | 第26页 |
| 1．4．4 单、双子叶植物基因表达调控的差异 | 第26-27页 |
| 1．4．5 植物细胞壁成分对农杆菌附着的影响 | 第27页 |
| 1．5 农杆菌介导法转基因技术的优势和发展策略 | 第27-29页 |
| 1．5．1 农杆菌介导法转基因的优势 | 第27-28页 |
| 1．5．2 农杆菌介导法转基因技术的发展策略 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-33页 |
| 第2章 作物转基因抗虫育种现状及发展趋势 | 第33-48页 |
| 2．1 作物转基因抗虫育种的现状 | 第33-39页 |
| 2．1．1 来源于微生物的抗虫基因及其应用 | 第33-35页 |
| 2．1．1．1 Bt基因的研究和应用 | 第33-34页 |
| 2．1．1．2 来源于其他微生物的抗虫基因 | 第34-35页 |
| 2．1．2 来源于植物的抗虫基因及其应用 | 第35-39页 |
| 2．1．2．1 蛋白酶抑制剂基因 | 第36页 |
| 2．1．2．2 α-淀粉酶抑制剂基因 | 第36-37页 |
| 2．1．2．3 植物外源凝集素基因 | 第37页 |
| 2．1．2．4 其它来源于植物的抗虫基因 | 第37-39页 |
| 2．1．3 来源于动物的抗虫基因及其应用 | 第39页 |
| 2．2 作物转基因抗虫育种中存在的问题及发展趋势 | 第39-42页 |
| 2．2．1 转基因作物抗虫的有效性 | 第39-40页 |
| 2．2．2 转基因作物抗虫的持久性 | 第40-41页 |
| 2．2．3 转基因抗虫作物的安全性 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 第3章 转基因作物安全性分析及分子育种策略 | 第48-75页 |
| 3．1 转基因作物的发展优势 | 第48-49页 |
| 3．1．1 扩大了作物育种的基因库 | 第48页 |
| 3．1．2 提高了作物育种的效率 | 第48页 |
| 3．1．3 减轻了农业生产对环境的污染 | 第48页 |
| 3．1．4 拓宽了作物生产的范畴 | 第48-49页 |
| 3．2 转基因作物的安全性分析 | 第49-53页 |
| 3．2．1 转基因作物的生态安全性分析 | 第49-52页 |
| 3．2．1．1 转基因作物是否会转变为杂草 | 第50页 |
| 3．2．1．2 转基因漂移是否会导致新型杂草产生 | 第50-51页 |
| 3．2．1．3 转基因作物是否会导致新型病原体产生 | 第51页 |
| 3．2．1．4 转基因作物是否会对生态系统中的非靶标生物造成伤害 | 第51-52页 |
| 3．2．2 转基因作物的食用安全性分析 | 第52-53页 |
| 3．2．2．1 标记基因水平转移的可能性 | 第52页 |
| 3．2．2．2 转基因本身的安全性 | 第52-53页 |
| 3．2．2．3 转基因表达产物的安全性 | 第53页 |
| 3．3 作物安全性分子育种的策略 | 第53-65页 |
| 3．3．1 转基因作物中标记基因的去除 | 第53-56页 |
| 3．3．1．1 共转化法去除标记基因 | 第54-55页 |
| 3．3．1．2 基于转座子系统的标记基因去除策略 | 第55页 |
| 3．3．1．3 通过定点重组系统去除标记基因 | 第55页 |
| 3．3．1．4 不使用标记基因的转基因体系 | 第55-56页 |
| 3．3．2 转基因的组织特异性表达 | 第56-57页 |
| 3．3．3 转基因的诱导性表达 | 第57-61页 |
| 3．3．3．1 植物天然诱导型启动子的应用 | 第57-58页 |
| 3．3．3．2 化学诱导型调控系统的应用 | 第58-61页 |
| 3．3．4 防止转基因逃逸的策略 | 第61-64页 |
| 3．3．4．1 RBF结构的应用 | 第61-63页 |
| 3．3．4．2 质体遗传转化 | 第63-64页 |
| 3．3．4．3 其它防止转基因逃逸的方法 | 第64页 |
| 3．3．5 防止产生超级杂草的策略 | 第64-65页 |
| 3．4 作物转基因育种的发展及安全性评价 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 第4章 农杆菌介导法水稻高效转基因体系的建立 | 第75-86页 |
| 4．1 材料与方法 | 第75-78页 |
| 4．1．1 品种、菌株、质粒和试剂 | 第75页 |
| 4．1．2 愈伤组织诱导 | 第75-76页 |
| 4．1．3 双元载体导入农杆菌 | 第76-77页 |
| 4．1．4 细菌培养和共培养 | 第77页 |
| 4．1．5 GUS检测方法 | 第77页 |
| 4．1．6 抗性愈伤组织的筛选和植株再生 | 第77-78页 |
| 4．2 结果与分析 | 第78-82页 |
| 4．2．1 种子成熟度对愈伤诱导效果的影响 | 第78-79页 |
| 4．2．2 愈伤组织继代对转化效率的影响 | 第79-80页 |
| 4．2．3 预培养条件对转化效率的影响 | 第80-81页 |
| 4．2．3．1 激素种类对转化率的影响 | 第80-81页 |
| 4．2．3．2 预培养时间对转化效率的影响 | 第81页 |
| 4．2．4 共培养条件对转化效率的影响 | 第81-82页 |
| 4．3 讨论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-86页 |
| 第5章 农杆菌介导法水稻转双价抗虫基因研究 | 第86-97页 |
| 5．1 材料与方法 | 第86-91页 |
| 5．1．1 植物材料 | 第86页 |
| 5．1．2 试剂、质粒和菌株 | 第86-87页 |
| 5．1．3 双价抗虫基因植物表达载体的构建 | 第87页 |
| 5．1．4 农杆菌的活化 | 第87页 |
| 5．1．5 植物愈伤的转化、抗性愈伤的筛选和植株再生 | 第87-89页 |
| 5．1．6 水稻基因组DNA的小量提取 | 第89页 |
| 5．1．7 转基因植株的PCR及PCR-Southern检测 | 第89-90页 |
| 5．1．8 转基因水稻的抗虫性鉴定 | 第90-91页 |
| 5．2 结果与分析 | 第91-94页 |
| 5．2．1 抗性愈伤组织的筛选和植株再生 | 第91页 |
| 5．2．2 转基因植株的PCR及PCR-Southern鉴定 | 第91-93页 |
| 5．2．3 转基因株系的抗虫鉴定 | 第93-94页 |
| 5．3 讨论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| 第6章 转基因水稻中双价抗虫基因的遗传 | 第97-106页 |
| 6．1 材料和方法 | 第97-101页 |
| 6．1．1 植物材料 | 第97页 |
| 6．1．2 试剂和耗材 | 第97页 |
| 6．1．3 水稻基因组DNA的提取 | 第97-98页 |
| 6．1．4 抗虫基因的PCR检测 | 第98-99页 |
| 6．1．5 Southern分析 | 第99-101页 |
| 6．1．5．1 杂交膜的制作 | 第99-100页 |
| 6．1．5．2 探针的标记和杂交 | 第100-101页 |
| 6．1．6 T_1代株系的花粉育性观察和杂交分析 | 第101页 |
| 6．2 结果与分析 | 第101-104页 |
| 6．2．1 双价抗虫基因在T_1代的分离 | 第101页 |
| 6．2．2 正反交F_1代中Cry1Ac基因的分离 | 第101-102页 |
| 6．2．3 转基因水稻的Southern分析 | 第102-104页 |
| 6．3 讨论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-106页 |
| 第7章 水稻RSuS1启动子的克隆及其特异性表达 | 第106-116页 |
| 7．1 材料与方法 | 第106-109页 |
| 7．1．1 植物材料 | 第106页 |
| 7．1．2 试剂、质粒和菌株 | 第106页 |
| 7．1．3 启动子的克隆 | 第106-107页 |
| 7．1．4 表达载体的构建 | 第107页 |
| 7．1．5 水稻遗传转化 | 第107页 |
| 7．1．6 转基因植株的PCR鉴定 | 第107页 |
| 7．1．7 转基因水稻植株不同部位的GUS活性检测 | 第107-109页 |
| 7．2 结果与分析 | 第109-112页 |
| 7．2．1 克隆的启动子序列分析 | 第109页 |
| 7．2．2 再生植株的获得及其鉴定 | 第109-111页 |
| 7．2．3 转基因植株各器官的GUS组织化学分析 | 第111-112页 |
| 7．3 讨论 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-116页 |
| 第8章 Bt基因组织特异性表达载体的构建及其水稻遗传转化研究 | 第116-122页 |
| 8．1 材料与方法 | 第116-119页 |
| 8．1．1 植物材料 | 第116页 |
| 8．1．2 试剂、质粒和菌株 | 第116页 |
| 8．1．3 水稻蔗糖合酶基因启动子的克隆 | 第116-117页 |
| 8．1．4 转基因载体的构建 | 第117页 |
| 8．1．5 水稻遗传转化 | 第117-119页 |
| 8．1．6 转基因植株的培养及其PCR鉴定 | 第119页 |
| 8．2 结果与分析 | 第119-120页 |
| 8．2．1 转基因植株的获得 | 第119-120页 |
| 8．2．2 转基因植株的PCR鉴定及其GUS组织化学分析 | 第120页 |
| 8．3 讨论 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-122页 |
| 附录A 表目录 | 第122-123页 |
| 附录B 图目录 | 第123-124页 |
| 附录C 缩略词表 | 第124页 |
