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3T3-L1前脂肪细胞分化过程中有丝分裂克隆扩增调控机制的研究

中文摘要第5-8页
Abstract第8-11页
英文缩略词表(Abbreviation)第12-13页
第一章 引言第13-28页
    1.1 肥胖与脂肪细胞第13-15页
        1.1.1 脂肪组织第13-14页
        1.1.2 脂肪细胞分化机制研究的意义第14-15页
    1.2 脂肪细胞分化的研究进展第15-19页
        1.2.1 脂肪细胞的体外研究模型及鉴定识别第15-16页
        1.2.2 脂肪细胞分化过程第16-17页
        1.2.3 脂肪细胞分化的转录调控第17-19页
    1.3 组学技术在脂肪细胞分化研究中的应用第19-27页
        1.3.1 基因芯片技术及在脂肪细胞分化研究中的应用第19-20页
        1.3.2 定量蛋白质组学技术及应用第20-25页
        1.3.3 生物信息技术及其应用第25-27页
    1.4 小结第27-28页
第二章 实验材料和方法第28-41页
    2.1 材料和仪器第28-31页
    2.2 实验步骤第31-41页
        2.2.1 细胞培养及诱导分化第31页
        2.2.2 FACS(fluorescence-activated cell sorter)测定第31-32页
        2.2.3 细胞蛋白的提取第32页
        2.2.4 Bradford法测定蛋白质含量第32页
        2.2.5 Western blotting第32-34页
        2.2.6 RNA抽提第34页
        2.2.7 实时定量PCR第34-35页
        2.2.8 RNA干扰第35-36页
        2.2.9 iTRAQ标记LC-MS/MS测定第36-38页
        2.2.10 蛋白质的检索鉴定和生物信息学分析第38-41页
第三章 实验结果与讨论第41-78页
    3.1 前脂肪细胞诱导分化及蛋白质筛选模式的设计第41-45页
        3.1.1 3T3-L1前脂肪细胞培养及诱导分化第41页
        3.1.2 3T3-L1前脂肪细胞MCE细胞周期检查点的确定第41-43页
        3.1.3 差异蛋白质筛选模式的设计第43-45页
    3.2 iTRAQ-2DLC-MS/MS测定3T3-L1前脂肪细胞分化早期蛋白质差异表达第45-60页
        3.2.1 iTRAQ前处理步骤、检测仪器和鉴定方式的选择第45-49页
        3.2.2 蛋白质鉴定、相对定量及结果分析第49-55页
        3.2.3 符合模式的差异蛋白质筛选分析第55-57页
        3.2.4 定量结果方法学验证第57-60页
    3.3 脂肪细胞分化MCE中转录调控网络与关键调控因子第60-72页
        3.3.1 脂肪细胞分化过程中差异表达蛋白的富集分析第60-66页
        3.3.2 C/EBPβ调控3T3-L1前脂肪细胞MCE靶基因的蛋白质水平筛选第66-68页
        3.3.3 3T3-L1脂肪细胞分化过程中MCE的转录调控网络分析第68-72页
    3.4 PKM2在3T3-L1前脂肪细胞分化MCE过程中的作用第72-78页
        3.4.1 PKM2在3T3-L1前脂肪细胞分化MCE过程中的表达第72-73页
        3.4.2 抑制PKM2表达对3T3-L1前脂肪细胞MCE的影响第73-74页
        3.4.3 C/EBPβ在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中对PKM2表达的作用第74-78页
第四章 全文总结与展望第78-81页
参考文献第81-88页
附表第88-128页
    附表1 595个表达含量变化趋势符合设定模式的蛋白第88-94页
    附表2 iTRAQ-2DLC-MS/MS定量结果第94-128页
致谢第128-129页

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