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慢性烟曲霉菌暴露对哮喘加重的免疫机制研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
英文缩写一览表第13-16页
引言第16-22页
    参考文献第19-22页
第一章 慢性烟曲霉菌暴露对哮喘大鼠气道炎症、气道反应性以及血清IgE水平的影响第22-43页
    1、实验材料第22-26页
        1.1、实验动物第22页
        1.2、烟曲霉菌株第22-23页
        1.3、实验试剂材料第23页
        1.4、实验设备第23-24页
        1.5、主要溶液配制第24-25页
        1.6、模型制备第25-26页
    2、实验方法第26-34页
        2.1、动物分组第26页
        2.3、烟曲霉菌孢子悬液的制备第26-28页
            2.3.1、烟曲霉菌孢子的收集第26-27页
            2.3.2、镜检计数、调定吸入浓度第27-28页
        2.4、气道高反应性测定第28-29页
            2.4.1、Buxco公司无束缚全身体积描记系统第28页
            2.4.2、Penh(enhanced pause,增强呼气间歇)第28-29页
        2.5、标本的收集第29-30页
        2.6、肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞计数第30-31页
            2.6.1、甩片第30页
            2.6.2、瑞氏吉姆萨染色第30-31页
        2.7、肺组织病理学检查第31-33页
            2.7.1、肺组织脱水、透明第31页
            2.7.2、浸蜡、包埋第31页
            2.7.3、切片的制作第31-32页
            2.7.4、HE染色第32-33页
        2.8、Elisa法测定血清中总IgE水平第33-34页
    3、统计学分析第34-35页
    4、实验结果第35-37页
        4.1、肺组织病理学检查第35页
        4.2、BALF中嗜酸粒细胞百分比第35-36页
        4.3、大鼠气道反应性第36-37页
        4.4、大鼠血清总IgE水平第37页
        4.5、相关性分析第37页
    5、讨论第37-40页
    参考文献第40-43页
第二章 糖皮质激素受体水平变化在慢性烟曲霉孢子加重哮喘过程中的作用第43-65页
    1、实验设备与材料第43-47页
        1.1、实验设备第43-44页
        1.2、实验试剂与材料第44-45页
        1.3、主要溶液配制第45-47页
        1.4、实验动物第47页
        1.5、烟曲霉菌孢子悬液的制备第47页
    2、实验动物分组及模型制备第47-57页
        2.1、分组第47页
        2.2、模型制备第47-49页
            2.2.1、哮喘模型制备第47-48页
            2.2.2、烟曲霉菌孢子雾化吸入第48-49页
        2.3、大鼠气道反应性测定第49页
        2.4、标本采集第49页
        2.5、Real-time PCR方法测定大鼠肺组织内GRmRNA的表达第49-53页
            2.5.1、肺组织内总RNA的提取第49-50页
            2.5.2、紫外分光光度计测定RNA浓度第50-51页
            2.5.3、逆转录第51页
            2.5.4、PCR反应第51-52页
            2.5.5、琼脂糖凝胶电泳鉴定扩增基因(GoldView染料)第52-53页
        2.6、Wester n Blot方法测定大鼠肺组织内GR的表达第53-57页
            2.6.1、蛋白样品的制备第53-54页
            2.6.2、蛋白浓度测定以及电泳样品的制备第54页
            2.6.3、凝胶制备、上样及电泳第54-55页
            2.6.4、转膜第55-56页
            2.6.5、免疫反应、显影第56-57页
    3、统计学分析第57页
    4、结果第57-60页
        4.1、烟曲霉菌孢子能够显著促进哮喘大鼠的气道炎症反应以及气道高反应性第57-59页
        4.2、烟曲霉菌暴露下,能够引起哮喘大鼠肺组织内糖皮质激素受体水平的下降第59-60页
            4.2.1、大鼠肺组织内GR mRNA的相对表达量第59-60页
            4.2.2、Western blot方法检测各组大鼠GR表达第60页
    5、讨论第60-62页
    参考文献第62-65页
致谢第65-66页
研究生期间撰写及发表的文章第66页

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