摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
英文缩写一览表 | 第13-16页 |
引言 | 第16-22页 |
参考文献 | 第19-22页 |
第一章 慢性烟曲霉菌暴露对哮喘大鼠气道炎症、气道反应性以及血清IgE水平的影响 | 第22-43页 |
1、实验材料 | 第22-26页 |
1.1、实验动物 | 第22页 |
1.2、烟曲霉菌株 | 第22-23页 |
1.3、实验试剂材料 | 第23页 |
1.4、实验设备 | 第23-24页 |
1.5、主要溶液配制 | 第24-25页 |
1.6、模型制备 | 第25-26页 |
2、实验方法 | 第26-34页 |
2.1、动物分组 | 第26页 |
2.3、烟曲霉菌孢子悬液的制备 | 第26-28页 |
2.3.1、烟曲霉菌孢子的收集 | 第26-27页 |
2.3.2、镜检计数、调定吸入浓度 | 第27-28页 |
2.4、气道高反应性测定 | 第28-29页 |
2.4.1、Buxco公司无束缚全身体积描记系统 | 第28页 |
2.4.2、Penh(enhanced pause,增强呼气间歇) | 第28-29页 |
2.5、标本的收集 | 第29-30页 |
2.6、肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞计数 | 第30-31页 |
2.6.1、甩片 | 第30页 |
2.6.2、瑞氏吉姆萨染色 | 第30-31页 |
2.7、肺组织病理学检查 | 第31-33页 |
2.7.1、肺组织脱水、透明 | 第31页 |
2.7.2、浸蜡、包埋 | 第31页 |
2.7.3、切片的制作 | 第31-32页 |
2.7.4、HE染色 | 第32-33页 |
2.8、Elisa法测定血清中总IgE水平 | 第33-34页 |
3、统计学分析 | 第34-35页 |
4、实验结果 | 第35-37页 |
4.1、肺组织病理学检查 | 第35页 |
4.2、BALF中嗜酸粒细胞百分比 | 第35-36页 |
4.3、大鼠气道反应性 | 第36-37页 |
4.4、大鼠血清总IgE水平 | 第37页 |
4.5、相关性分析 | 第37页 |
5、讨论 | 第37-40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
第二章 糖皮质激素受体水平变化在慢性烟曲霉孢子加重哮喘过程中的作用 | 第43-65页 |
1、实验设备与材料 | 第43-47页 |
1.1、实验设备 | 第43-44页 |
1.2、实验试剂与材料 | 第44-45页 |
1.3、主要溶液配制 | 第45-47页 |
1.4、实验动物 | 第47页 |
1.5、烟曲霉菌孢子悬液的制备 | 第47页 |
2、实验动物分组及模型制备 | 第47-57页 |
2.1、分组 | 第47页 |
2.2、模型制备 | 第47-49页 |
2.2.1、哮喘模型制备 | 第47-48页 |
2.2.2、烟曲霉菌孢子雾化吸入 | 第48-49页 |
2.3、大鼠气道反应性测定 | 第49页 |
2.4、标本采集 | 第49页 |
2.5、Real-time PCR方法测定大鼠肺组织内GRmRNA的表达 | 第49-53页 |
2.5.1、肺组织内总RNA的提取 | 第49-50页 |
2.5.2、紫外分光光度计测定RNA浓度 | 第50-51页 |
2.5.3、逆转录 | 第51页 |
2.5.4、PCR反应 | 第51-52页 |
2.5.5、琼脂糖凝胶电泳鉴定扩增基因(GoldView染料) | 第52-53页 |
2.6、Wester n Blot方法测定大鼠肺组织内GR的表达 | 第53-57页 |
2.6.1、蛋白样品的制备 | 第53-54页 |
2.6.2、蛋白浓度测定以及电泳样品的制备 | 第54页 |
2.6.3、凝胶制备、上样及电泳 | 第54-55页 |
2.6.4、转膜 | 第55-56页 |
2.6.5、免疫反应、显影 | 第56-57页 |
3、统计学分析 | 第57页 |
4、结果 | 第57-60页 |
4.1、烟曲霉菌孢子能够显著促进哮喘大鼠的气道炎症反应以及气道高反应性 | 第57-59页 |
4.2、烟曲霉菌暴露下,能够引起哮喘大鼠肺组织内糖皮质激素受体水平的下降 | 第59-60页 |
4.2.1、大鼠肺组织内GR mRNA的相对表达量 | 第59-60页 |
4.2.2、Western blot方法检测各组大鼠GR表达 | 第60页 |
5、讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
研究生期间撰写及发表的文章 | 第66页 |